ວິສະວະກຳພູມຕ້ານທານແມ່ນຫຍັງ?

ດ້ວຍການຊ່ວຍເຫຼືອຂອງວິສະວະກຳພູມຕ້ານທານ, ມັນເປັນໄປໄດ້ທີ່ຈະດັດແປງຂະໜາດໂມເລກຸນ, ການຢາ, ການສ້າງພູມຕ້ານທານ, ຄວາມຜູກພັນ, ຄວາມຈຳເພາະ ແລະ ໜ້າທີ່ຂອງພູມຕ້ານທານ. ຫຼັງຈາກການສັງເຄາະພູມຕ້ານທານ, ການຜູກພັນສະເພາະຂອງພູມຕ້ານທານເຮັດໃຫ້ພວກມັນມີຄຸນຄ່າສູງໃນການວິນິດໄສ ແລະ ການປິ່ນປົວທາງດ້ານຄລີນິກ. ຜ່ານວິສະວະກຳພູມຕ້ານທານ, ພວກມັນສາມາດຕອບສະໜອງຄວາມຕ້ອງການຂອງຢາ ແລະ ການພັດທະນາໃນໄລຍະຕົ້ນໆຂອງການວິນິດໄສ.

ຈຸດປະສົງຂອງວິສະວະກຳພູມຕ້ານທານແມ່ນເພື່ອອອກແບບ ແລະ ຜະລິດໜ້າທີ່ທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສູງ ແລະ ໝັ້ນຄົງທີ່ພູມຕ້ານທານທຳມະຊາດບໍ່ສາມາດບັນລຸໄດ້, ເຊິ່ງເປັນພື້ນຖານໃຫ້ແກ່ການຜະລິດພູມຕ້ານທານທາງການປິ່ນປົວ.

ບໍລິສັດ Alpha Lifetech, ດ້ວຍປະສົບການໂຄງການຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນດ້ານວິສະວະກຳພູມຕ້ານທານ, ສາມາດໃຫ້ບໍລິການພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄລນ ແລະ ໂພລີໂຄລນທີ່ກຳນົດເອງສຳລັບຫຼາຍຊະນິດ, ພ້ອມທັງການກໍ່ສ້າງ ແລະ ການບໍລິການກວດຄັດກອງພູມຕ້ານທານຂອງຟາຈ. ບໍລິສັດ Alpha Lifetech ສາມາດໃຫ້ບໍລິການລູກຄ້າດ້ວຍພູມຕ້ານທານທາງຊີວະພາບທີ່ຄ້າຍຄືກັນ ແລະ ຜະລິດຕະພັນໂປຣຕີນປະສົມທີ່ມີຄຸນນະພາບ, ພ້ອມທັງການບໍລິການທີ່ສອດຄ້ອງກັນ, ເພື່ອຜະລິດພູມຕ້ານທານທີ່ມີປະສິດທິພາບ, ມີຄວາມຈຳເພາະສູງ ແລະ ໝັ້ນຄົງ. ໂດຍການນຳໃຊ້ພູມຕ້ານທານທີ່ຄົບຖ້ວນ, ແພລດຟອມໂປຣຕີນ ແລະ ລະບົບການສະແດງຟາຈ, ພວກເຮົາໃຫ້ບໍລິການທີ່ກວມເອົາຕົ້ນທາງ ແລະ ປາຍທາງຂອງການຜະລິດພູມຕ້ານທານ, ລວມທັງການບໍລິການດ້ານວິຊາການເຊັ່ນ: ການເຮັດໃຫ້ພູມຕ້ານທານເປັນມະນຸດ, ການກັ່ນຕອງພູມຕ້ານທານ, ການຈັດລຳດັບພູມຕ້ານທານ, ແລະ ການກວດສອບພູມຕ້ານທານ.

ຂັ້ນຕອນການບຸກເບີກຂອງວິສະວະກຳພູມຕ້ານທານແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບສອງເຕັກໂນໂລຢີຄື:

--ເທັກໂນໂລຢີ DNA ປະສົມ

--ເທັກໂນໂລຢີໄຮບຣິໂດມາ

ການພັດທະນາຢ່າງວ່ອງໄວຂອງວິສະວະກຳພູມຕ້ານທານແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບສາມເຕັກໂນໂລຢີທີ່ສຳຄັນຄື:

--ເຕັກໂນໂລຊີການໂຄນພັນທຸກໍາ ແລະ ປະຕິກິລິຍາລະບົບຕ່ອງໂສ້ໂພລີເມີເຣສ

--ການສະແດງອອກຂອງໂປຣຕີນ: ໂປຣຕີນທີ່ຜະລິດຄືນໃໝ່ແມ່ນຜະລິດໂດຍລະບົບການສະແດງອອກເຊັ່ນ: ເຊື້ອລາ, ໄວຣັສຮູບຊົງກ້ານ, ແລະພືດ

--ການອອກແບບໂຄງສ້າງດ້ວຍຄອມພິວເຕີຊ່ວຍ

ພູມຕ້ານທານລຸ້ນທຳອິດໄດ້ຖືກເຮັດໃຫ້ເປັນຂອງມະນຸດເພື່ອຜະລິດພູມຕ້ານທານແບບ chimeric, ບ່ອນທີ່ພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ຂອງພູມຕ້ານທານ monoclonal ຂອງໜູໄດ້ຖືກເຊື່ອມຕໍ່ກັບພາກພື້ນຄົງທີ່ຂອງໂມເລກຸນ IgG ຂອງມະນຸດ. ພາກພື້ນຜູກມັດ antigen (CDR) ຂອງພູມຕ້ານທານ monoclonal ຂອງໜູລຸ້ນທີສອງໄດ້ຖືກປູກຖ່າຍເຂົ້າໄປໃນ IgG ຂອງມະນຸດ. ຍົກເວັ້ນພາກພື້ນ CDR, ພູມຕ້ານທານອື່ນໆທັງໝົດແມ່ນພູມຕ້ານທານຂອງມະນຸດເກືອບທັງໝົດ, ແລະມີຄວາມພະຍາຍາມທີ່ຈະຫຼີກລ່ຽງການກະຕຸ້ນການຕອບສະໜອງຂອງພູມຕ້ານທານຕ້ານໜູຂອງມະນຸດ (HAMA) ເມື່ອໃຊ້ພູມຕ້ານທານໂຄນໜູສຳລັບການປິ່ນປົວຂອງມະນຸດ.

 

ເພື່ອສ້າງຫ້ອງສະໝຸດສະແດງຜົນຂອງຟາຈ, ຂັ້ນຕອນທຳອິດແມ່ນການໄດ້ຮັບຍີນທີ່ເຂົ້າລະຫັດພູມຕ້ານທານ, ເຊິ່ງສາມາດແຍກອອກຈາກຈຸລັງ B ຂອງສັດທີ່ໄດ້ຮັບພູມຕ້ານທານ (ການກໍ່ສ້າງຫ້ອງສະໝຸດພູມຕ້ານທານ), ສະກັດໂດຍກົງຈາກສັດທີ່ບໍ່ໄດ້ຮັບພູມຕ້ານທານ (ການກໍ່ສ້າງຫ້ອງສະໝຸດທຳມະຊາດ), ຫຼືແມ່ນແຕ່ປະກອບໃນຫຼອດທົດລອງດ້ວຍຊິ້ນສ່ວນຂອງຍີນພູມຕ້ານທານ (ການກໍ່ສ້າງຫ້ອງສະໝຸດສັງເຄາະ). ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ຍີນຈະຖືກຂະຫຍາຍໂດຍ PCR, ໃສ່ເຂົ້າໄປໃນພລາສມິດ, ແລະສະແດງອອກໃນລະບົບໂຮດທີ່ເໝາະສົມ (ການສະແດງອອກຂອງເຊື້ອລາ (ໂດຍປົກກະຕິແມ່ນ Pichia pastoris), ການສະແດງອອກຂອງໂປຣແຄຣີໂອດ (ໂດຍປົກກະຕິແມ່ນ E. coli), ການສະແດງອອກຂອງຈຸລັງສັດລ້ຽງລູກດ້ວຍນົມ, ການສະແດງອອກຂອງຈຸລັງພືດ, ແລະການສະແດງອອກຂອງຈຸລັງແມງໄມ້ທີ່ຕິດເຊື້ອໄວຣັດຮູບກ້ານ). ລະບົບທີ່ພົບເລື້ອຍທີ່ສຸດແມ່ນລະບົບການສະແດງອອກຂອງ E. coli, ເຊິ່ງລວມເອົາລຳດັບພູມຕ້ານທານທີ່ເຂົ້າລະຫັດສະເພາະໃສ່ຟາຈ ແລະເຂົ້າລະຫັດໂປຣຕີນເປືອກຟາຈອັນໜຶ່ງ (pIII ຫຼື pVIII). ການລວມຕົວຂອງຍີນ, ແລະສະແດງຢູ່ເທິງໜ້າດິນຂອງແບັກທີເຣຍຟາຈ. ຫຼັກຂອງເທັກໂນໂລຢີນີ້ແມ່ນເພື່ອສ້າງຫ້ອງສະໝຸດສະແດງຜົນຂອງຟາຈ, ເຊິ່ງມີຂໍ້ໄດ້ປຽບເໜືອຫ້ອງສະໝຸດທຳມະຊາດ ເພາະມັນສາມາດມີການຜູກມັດສະເພາະ. ຕໍ່ມາ, ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະຂອງແອນຕິເຈນຈະຖືກກວດສອບຜ່ານຂະບວນການຄັດເລືອກທາງຊີວະພາບ, ແອນຕິເຈນເປົ້າໝາຍຈະຖືກແກ້ໄຂ, ຟາຈທີ່ບໍ່ໄດ້ຜູກມັດຈະຖືກລ້າງອອກຊ້ຳແລ້ວຊ້ຳອີກ, ແລະ ຟາຈທີ່ຖືກຜູກມັດຈະຖືກລ້າງອອກເພື່ອການເສີມສ້າງຕື່ມອີກ. ຫຼັງຈາກການເຮັດຊ້ຳສາມຮອບຫຼືຫຼາຍກວ່ານັ້ນ, ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສູງ ແລະ ມີຄວາມສາມາດໃນການພົວພັນສູງຈະຖືກແຍກອອກ.

ຮູບທີ 3: ການສ້າງ ແລະ ການກວດຫາຫ້ອງສະໝຸດແອນຕິບໍດີ

ເຕັກໂນໂລຊີ DNA ທີ່ຖືກປັບປຸງໃໝ່ສາມາດໃຊ້ເພື່ອສ້າງຊິ້ນສ່ວນຂອງພູມຕ້ານທານໄດ້. ໃນເບື້ອງຕົ້ນ, ພູມຕ້ານທານ Fab ສາມາດຖືກໄຮໂດຣໄລສ໌ໂດຍໂປຣຕີເອສໃນກະເພາະອາຫານເພື່ອຜະລິດຊິ້ນສ່ວນ (Fab ') 2, ເຊິ່ງຫຼັງຈາກນັ້ນຈະຖືກຍ່ອຍໂດຍ papain ເພື່ອສ້າງຊິ້ນສ່ວນ Fab ແຕ່ລະອັນ. ຊິ້ນສ່ວນ Fv ປະກອບດ້ວຍ VH ແລະ VL, ເຊິ່ງມີຄວາມໝັ້ນຄົງທີ່ບໍ່ດີເນື່ອງຈາກບໍ່ມີພັນທະ disulfide. ດັ່ງນັ້ນ, VH ແລະ VL ຈຶ່ງເຊື່ອມຕໍ່ກັນຜ່ານ peptide ສັ້ນຂອງກົດອະມິໂນ 15-20 ຊະນິດເພື່ອສ້າງພູມຕ້ານທານຊິ້ນສ່ວນຕົວແປດຽວ (scFv) ທີ່ມີນ້ຳໜັກໂມເລກຸນປະມານ 25KDa.

ການສຶກສາໂຄງສ້າງພູມຕ້ານທານໃນ Camelidae (Camel, LIama, ແລະ Alpaca) ໄດ້ອະທິບາຍວ່າພູມຕ້ານທານມີແຕ່ຕ່ອງໂສ້ໜັກ ແລະ ບໍ່ມີຕ່ອງໂສ້ເບົາ, ດັ່ງນັ້ນພວກມັນຈຶ່ງຖືກເອີ້ນວ່າພູມຕ້ານທານຕ່ອງໂສ້ໜັກ (hcAb). ໂດເມນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ຂອງພູມຕ້ານທານຕ່ອງໂສ້ໜັກເອີ້ນວ່າພູມຕ້ານທານໂດເມນດຽວ ຫຼື nanobodies ຫຼື VHH, ມີຂະໜາດ 12-15 kDa. ໃນຖານະເປັນໂມໂນເມີ, ພວກມັນບໍ່ມີພັນທະໄດຊູນໄຟດ໌ ແລະ ມີຄວາມໝັ້ນຄົງຫຼາຍ, ມີຄວາມຜູກພັນສູງຫຼາຍສຳລັບແອນຕິເຈນ.

ຮູບທີ 5: ແອນຕິບໍດີຕ່ອງໂສ້ໜັກ ແລະ VHH/ນາໂນບໍດີ

ການສະແດງອອກຢ່າງເສລີຂອງຈຸລັງນຳໃຊ້ການສະແດງອອກຂອງ DNA ທຳມະຊາດ ຫຼື ສັງເຄາະເພື່ອບັນລຸການສັງເຄາະໂປຣຕີນໃນຫຼອດທົດລອງ, ໂດຍປົກກະຕິແລ້ວແມ່ນໃຊ້ລະບົບການສະແດງອອກຂອງ E. coli. ມັນຜະລິດໂປຣຕີນໄດ້ໄວ ແລະ ຫຼີກລ່ຽງພາລະທາງເມຕາໂບລິດ ແລະ ພິດຕໍ່ຈຸລັງເມື່ອຜະລິດໂປຣຕີນປະສົມຈຳນວນຫຼວງຫຼາຍໃນຮ່າງກາຍ. ມັນຍັງສາມາດຜະລິດໂປຣຕີນທີ່ສັງເຄາະຍາກ, ເຊັ່ນໂປຣຕີນທີ່ຍາກທີ່ຈະດັດແປງຫຼັງຈາກການແປ ຫຼື ສັງເຄາະໂປຣຕີນເຍື່ອຫຸ້ມເຊວ.