ແພລດຟອມການພັດທະນາພູມຕ້ານທານແບບຈຳເພາະສອງຊະນິດ

Alpha Lifetech ສາມາດສະໜອງຜະລິດຕະພັນ ແລະ ການບໍລິການການຄົ້ນພົບພູມຕ້ານທານ ແລະ ໂປຣຕີນປະສົມທີ່ມີຄຸນນະພາບໃຫ້ແກ່ລູກຄ້າ.

ແພລດຟອມການພັດທະນາພູມຕ້ານທານແບບຈຳເພາະສອງຊະນິດ

ບໍລິສັດ Alpha Lifetech ສາມາດໃຫ້ບໍລິການລູກຄ້າດ້ວຍການຄົ້ນພົບພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄຸນນະພາບ ແລະ ຜະລິດຕະພັນ ແລະ ການບໍລິການໂປຣຕີນປະສົມ. ພວກເຮົາສາມາດກະກຽມພູມຕ້ານທານທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງ, ມີຄວາມຈຳເພາະສູງ, ແລະ ມີຄວາມໝັ້ນຄົງດີ. ບໍລິສັດ Alpha Lifetech ມີເຄື່ອງມື ແລະ ອຸປະກອນການກັ່ນຕອງພູມຕ້ານທານຫຼາກຫຼາຍຊະນິດ, ເຊິ່ງສາມາດໃຫ້ບໍລິການການກັ່ນຕອງພູມຕ້ານທານຈາກແຫຼ່ງຕ່າງໆເຊັ່ນ: ພູມຕ້ານທານແບບໂມໂນໂຄນຂອງກະຕ່າຍ, ແກະ, ໄກ່ ແລະ ໜູ, ພ້ອມທັງການບໍລິການການກັ່ນຕອງຄວາມສຳພັນຂອງໂປຣຕີນ A/G ແລະ ການບໍລິການແຍກ ແລະ ການກັ່ນຕອງພູມຕ້ານທານ. ໂດຍອີງໃສ່ການກໍ່ສ້າງລະບົບແພລດຟອມທີ່ສົມບູນແບບຂອງແພລດຟອມການຄົ້ນພົບພູມຕ້ານທານ, ແພລດຟອມໂປຣຕີນ, ແລະອື່ນໆ, ພວກເຮົາກວມເອົາການບໍລິການຕົ້ນທາງ ແລະ ປາຍທາງຂອງການຜະລິດພູມຕ້ານທານ, ແລະ ສາມາດໃຫ້ບໍລິການດ້ານວິຊາການຕັ້ງແຕ່ການກະກຽມພູມຕ້ານທານ, ການກັ່ນຕອງພູມຕ້ານທານແບບສອງຊະນິດ ແລະ ການແຍກ ແລະ ການກັ່ນຕອງພູມຕ້ານທານ, ການຈັດລຳດັບພູມຕ້ານທານ, ການກວດສອບພູມຕ້ານທານ, ແລະອື່ນໆ, ເຊິ່ງສາມາດໃຊ້ສຳລັບການປິ່ນປົວດ້ວຍພູມຕ້ານທານແບບສອງຊະນິດ.

ແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລ ໝາຍເຖິງອິມມູໂນໂກລບູລິນທີ່ຜະລິດໂດຍເຊວ B ດຽວທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສູງສຳລັບແອນຕິເຈນ ຫຼື ເອພິໂທບ. ການຜະລິດແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລໃນເບື້ອງຕົ້ນໄດ້ຖືກກະກຽມໂດຍໃຊ້ເທັກໂນໂລຢີໄຮບຣິດມາເພື່ອຜະລິດແອນຕິບໍດີໜູ. ໂດຍສະເພາະ, ໂດຍການລວມເຊວມ້າມຈາກໜູທີ່ໄດ້ຮັບພູມຕ້ານທານກັບເຊວ myeloma ຈາກມະນຸດ ຫຼື ໜູ, ເຊວໄຮບຣິດມາຈະຖືກສ້າງຕັ້ງຂຶ້ນ, ເຊິ່ງປ່ອຍແອນຕິບໍດີສະເພາະ. ແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລຂອງໜູທີ່ສ້າງຂຶ້ນສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ໃນການຄົ້ນຄວ້າສັດ ແລະ ການວິນິດໄສພະຍາດຫຼັງຈາກການບໍລິການບໍລິສຸດ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຮ່າງກາຍຂອງມະນຸດຈະຜະລິດການຕອບສະໜອງຂອງພູມຕ້ານທານຕໍ່ໂປຣຕີນໜູຕ່າງປະເທດ, ສະນັ້ນມີຂໍ້ຈຳກັດທີ່ສຳຄັນໃນການນຳໃຊ້ທາງດ້ານການແພດຂອງການຜະລິດແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລຂອງໜູ. ຕໍ່ມາ, ຜູ້ຄົນໄດ້ໃຊ້ "ຄວາມເປັນມະນຸດ" ເພື່ອກະກຽມແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລຈາກໜູ, ແລະ ໄດ້ໃຊ້ເທັກໂນໂລຢີວິສະວະກຳພັນທຸກຳເພື່ອດັດແປງແອນຕິບໍດີໜູໃຫ້ມີພາກພື້ນທີ່ຄົງທີ່ຂອງອິມມູໂນໂກລບູລິນຂອງມະນຸດເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການສ້າງພູມຕ້ານທານຂອງພວກມັນ. ແອນຕິບໍດີປະເພດນີ້ຍັງເປັນທີ່ຮູ້ຈັກກັນໃນນາມແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລຂອງມະນຸດ. ນອກຈາກນັ້ນ, ການໃຊ້ເຊວຂອງມະນຸດເພື່ອຜະລິດແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລເອີ້ນວ່າການກະກຽມແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລຂອງມະນຸດທັງໝົດ. ແອນຕິບໍດີໂມໂນໂຄນນອລຖືກນຳໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນການນຳໃຊ້ທາງດ້ານຊີວະວິທະຍາ ແລະ ທາງດ້ານການແພດ. ໃນການຄົ້ນຄວ້າທາງການແພດ, ພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄລນສາມາດໃຊ້ເປັນຕົວປັບພູມຕ້ານທານ, ພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄລນທີ່ໃຊ້ໃນການປິ່ນປົວສາມາດໃຊ້ສຳລັບການປິ່ນປົວດ້ວຍທາງເຄມີບຳບັດມະເຮັງ ແລະ ການປິ່ນປົວການຕິດເຊື້ອໄວຣັດ, ແລະ ການພັດທະນາຕົວປະສົມພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄລນສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນໃຊ້ສຳລັບການປິ່ນປົວມະເຮັງ.

ການແນະນຳກ່ຽວກັບແອນຕິບໍດີ Bispecific

ໃນປີ 1960, ແນວຄວາມຄິດຂອງພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດໄດ້ຖືກສະເໜີຂຶ້ນ. ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ, ເຊິ່ງເອີ້ນກັນວ່າພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄນອລທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ, ແມ່ນພູມຕ້ານທານທີ່ສັງເຄາະດ້ວຍວິທີທຽມໂດຍໃຊ້ເຕັກໂນໂລຊີວິສະວະກຳທາງພັນທຸກຳ. ໃນຖານະທີ່ເປັນພູມຕ້ານທານທຽມທີ່ວິສະວະກຳ, ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດມັກຈະຢູ່ໃນຊັ້ນຍ່ອຍ IgG ແລະ ມີຊິ້ນສ່ວນຜູກມັດແອນຕິເຈນທີ່ແນໃສ່ໜ່ວຍຍ່ອຍ CD3. ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດມີສອງບ່ອນຜູກມັດແອນຕິເຈນສະເພາະທີ່ສາມາດຜູກມັດ ແລະ ຮັບຮູ້ແອນຕິເຈນທີ່ແຕກຕ່າງກັນສອງຊະນິດພ້ອມກັນ, ຫຼື ສອງ epitopes ທີ່ແຕກຕ່າງກັນຂອງແອນຕິເຈນ. ເມື່ອປຽບທຽບກັບພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄນອລ, ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດມີບ່ອນຜູກມັດແອນຕິເຈນສະເພາະເພີ່ມເຕີມ, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງມີຄວາມຈຳເພາະ ແລະ ຄວາມສາມາດໃນການກຳນົດເປົ້າໝາຍທີ່ເຂັ້ມແຂງກວ່າ, ເຊິ່ງສາມາດກຳນົດເປົ້າໝາຍຈຸລັງເນື້ອງອກໄດ້ຢ່າງຖືກຕ້ອງກວ່າ ແລະ ຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເປັນພິດນອກເປົ້າໝາຍ. ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດສາມາດປະຕິບັດໜ້າທີ່ທາງຊີວະວິທະຍາຫຼາຍຢ່າງພ້ອມກັນ, ເຊັ່ນ: ການຮັບສະໝັກຈຸລັງພູມຕ້ານທານ, ການສະກັດກັ້ນເສັ້ນທາງສັນຍານ, ແລະ ການຂ້າຈຸລັງເນື້ອງອກໂດຍກົງ. ພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດໃນຕອນຕົ້ນສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນຖືກກະກຽມຜ່ານການປະສົມທາງເຄມີ ຫຼື ການລວມຕົວຂອງຈຸລັງ, ແຕ່ວິທີການນີ້ອາດຈະມີຄວາມຄືບໜ້າຊ້າໆເນື່ອງຈາກການປະສົມປະສານແບບສຸ່ມ ແລະ ຄວາມຫຍຸ້ງຍາກໃນການແຍກການປະສົມປະສານເປົ້າໝາຍ. ດ້ວຍການພັດທະນາຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງຂອງເຕັກໂນໂລຊີວິສະວະກຳທາງພັນທຸກໍາ, ແພລດຟອມເຕັກໂນໂລຊີໃໝ່ຫຼາຍແຫ່ງໄດ້ຖືກພັດທະນາຂຶ້ນ, ເຊັ່ນ: ການຜູກມັດໃນຮູ (KIH), CrossMab, DVD Ig, ແລະອື່ນໆ. ແພລດຟອມເຫຼົ່ານີ້ແກ້ໄຂບັນຫາຕ່າງໆເຊັ່ນ: ຄວາມບໍ່ກົງກັນຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ໜັກ ແລະ ລະບົບຕ່ອງໂສ້ເບົາໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ, ແລະ ປັບປຸງຄວາມເປັນເອກະພາບ ແລະ ຜົນຜະລິດຂອງພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະ.

ຮູບທີ 1 ພາບລວມແບບງ່າຍໆຂອງກົນໄກການອອກລິດທີ່ສະເໜີໄວ້ສຳລັບພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ (bsAbs) ໃນການທົດລອງທາງຄລີນິກສຳລັບມະເຮັງວິທະຍາ.(ທີ່ມາຂອງຮູບພາບ: ການທົບທວນຄືນພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຢ່າງ ແລະ ໂຄງສ້າງພູມຕ້ານທານໃນບັນຫາມະເຮັງ ແລະ ສິ່ງທ້າທາຍທາງດ້ານຄລີນິກ - ScienceDirect)

ເຕັກໂນໂລຊີການຜະລິດພູມຕ້ານທານແບບຈຳເພາະສອງຊະນິດ

ວິທີການຫຼັກສຳລັບການຜະລິດພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດປະກອບມີການເຊື່ອມຕໍ່ທາງເຄມີ, ການປະສົມພັນສີ່ແຫຼ່ງ, ແລະການກະກຽມພູມຕ້ານທານວິສະວະກຳພັນທຸກຳ. ໃນນັ້ນ, ວິທີການເຊື່ອມຕໍ່ທາງເຄມີເຊື່ອມຕໍ່ສອງ IgG ທີ່ຍັງບໍ່ປ່ຽນແປງ ຫຼື ສອງຊິ້ນສ່ວນພູມຕ້ານທານ F (ab ') 2 ເຂົ້າໄປໃນພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດໂດຍໃຊ້ຕົວແທນເຊື່ອມຕໍ່ທາງເຄມີເຊັ່ນ: phthalimide ແລະ dithioacylbenzoic acid. ວິທີການນີ້ແມ່ນງ່າຍດາຍ ແລະ ງ່າຍຕໍ່ການໃຊ້ງານ, ແຕ່ມັນອາດຈະທຳລາຍສະຖານທີ່ຜູກມັດແອນຕິເຈນ, ຫຼຸດຜ່ອນກິດຈະກຳຂອງພູມຕ້ານທານ, ແລະຕົວແທນເຊື່ອມຕໍ່ເອງຍັງມີລະດັບການກໍ່ມະເຮັງໃນລະດັບໜຶ່ງ. ວິທີການປະສົມພັນສີ່ແຫຼ່ງແມ່ນອີງໃສ່ການລວມຕົວຂອງຈຸລັງໂຊມາຕິກຈາກສອງສາຍຈຸລັງປະສົມພັນທີ່ແຕກຕ່າງກັນເພື່ອສະແດງອອກ IgG ຂອງໜູທີ່ສອດຄ້ອງກັນ. ຜ່ານເຕັກໂນໂລຊີວິສະວະກຳພັນທຸກຳ, ພູມຕ້ານທານສາມາດຖືກດັດແປງທາງພັນທຸກຳເພື່ອສ້າງພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ. ພູມຕ້ານທານໂມໂນໂຄນສອງຊະນິດທີ່ແຕກຕ່າງກັນໄດ້ຖືກສ້າງຂຶ້ນ, ແລະຊິ້ນສ່ວນ Fab ຫຼືພາກພື້ນທີ່ປ່ຽນແປງໄດ້ຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້ໜັກ ແລະ ລະບົບຕ່ອງໂສ້ເບົາຂອງສອງພູມຕ້ານທານໄດ້ຖືກແຍກອອກຈາກກັນ. ຜ່ານປະຕິກິລິຍາການເຊື່ອມຕໍ່ ຫຼື ເຕັກໂນໂລຊີການລວມຕົວກັນຂອງລະບົບຕ່ອງໂສ້, ຊິ້ນສ່ວນທັງສອງໄດ້ຖືກລວມເຂົ້າກັນເພື່ອສ້າງພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ. ເຖິງແມ່ນວ່າຄວາມສັບສົນຂອງເຕັກໂນໂລຊີວິສະວະກຳພັນທຸກຳແມ່ນຂ້ອນຂ້າງສູງ, ປະຈຸບັນມັນເປັນວິທີການທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປທີ່ສຸດສຳລັບການຜະລິດພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດເພື່ອປັບໂຄງສ້າງ ແລະ ໜ້າທີ່ຂອງພູມຕ້ານທານ. ເມື່ອດຳເນີນການອອກແບບພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ, ຫຼັກການຂອງປະຕິກິລິຍາຂ້າມພູມຕ້ານທານອາດຈະຖືກນຳໃຊ້, ແຕ່ປະຕິກິລິຍາຂ້າມພູມຕ້ານທານອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດປະຕິກິລິຍາທີ່ບໍ່ຈຳເພາະ, ສະນັ້ນມັນຈະຖືກພິຈາລະນາຢ່າງລະມັດລະວັງໃນການນຳໃຊ້ຕົວຈິງຂອງການອອກແບບພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ, ເຊັ່ນການປິ່ນປົວດ້ວຍພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ.

ການບໍລິສຸດຂອງພູມຕ້ານທານສອງຊະນິດ

ການບໍລິສຸດຂອງພູມຕ້ານທານແບບ Bispecific ແມ່ນຂະບວນການແຍກ ແລະ ການບໍລິສຸດຂອງພູມຕ້ານທານເປົ້າໝາຍທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງ. ສອງວິທີຄື ການປั่นແຍກ ແລະ ການກັ່ນຕອງເລິກ ແມ່ນໃຊ້ເພື່ອກຳຈັດສິ່ງເຈືອປົນທີ່ລະລາຍໄດ້ບາງຊະນິດ. ພູມຕ້ານທານແບບ Bispecific ເປົ້າໝາຍໃນເບື້ອງຕົ້ນຈະຖືກຈັບໂດຍ affinity chromatography. ສຳລັບພູມຕ້ານທານແບບ Bispecific ຄືກັບ IgG, affinity chromatography ຂອງໂປຣຕີນ A ຖືກນໍາໃຊ້, ໃນຂະນະທີ່ສໍາລັບພູມຕ້ານທານແບບ Bispecific ທີ່ບໍ່ແມ່ນ IgG, affinity chromatography ທີ່ອີງໃສ່ລະບົບຕ່ອງໂສ້ແສງສາມາດໃຊ້ໄດ້. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ພູມຕ້ານທານຈະຖືກຟັກພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂ pH ຕໍ່າເປັນໄລຍະເວລາທີ່ແນ່ນອນ, ເຮັດໃຫ້ໂຄງສ້າງໂປຣຕີນຢູ່ເທິງໜ້າຜິວຂອງຊອງໄວຣັສຖືກລົບກວນ, ດັ່ງນັ້ນຈຶ່ງສູນເສຍຄວາມສາມາດໃນການຕິດເຊື້ອຈຸລັງ. ການກັ່ນຕອງເລິກລະດັບປານກາງແມ່ນປະຕິບັດເພື່ອກຳຈັດສິ່ງເຈືອປົນເຊັ່ນ: ໂປຣຕີນຈຸລັງເຈົ້າພາບ (HCP). ຄວາມບໍລິສຸດຂອງພູມຕ້ານທານໄດ້ຮັບການປັບປຸງຜ່ານວິທີການຕ່າງໆເຊັ່ນ: ion exchange chromatography, ແລະໄວຣັສທີ່ເຫຼືອຈະຖືກກຳຈັດອອກຜ່ານເຕັກນິກ nanofiltration ຫຼື ultrafiltration. ສຸດທ້າຍ, ຕົວຢ່າງຈະຖືກເຂັ້ມຂຸ້ນ ແລະ ປ່ຽນແທນດ້ວຍບັຟເຟີສູດທີ່ເໝາະສົມ.

ຂະບວນການເຮັດວຽກບໍລິການຜະລິດພູມຕ້ານທານແບບຈຳເພາະສອງຊະນິດ

ຂັ້ນຕອນ	ເນື້ອໃນການບໍລິການ	ໄລຍະເວລາ
ການສັງເຄາະພັນທຸກໍາ	ການສ້າງໂຄງຮ່າງການອອກແບບທີ່ແຕກຕ່າງກັນສູງສຸດ 3 ແບບ, ການສ້າງພລາສມິດ DNA ຂອງພູມຕ້ານທານ recombinant de novo	2-3 ອາທິດ
ການທົດສອບຂະໜາດນ້ອຍ	ການຜະລິດໂປຣຕີນພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ → ການສະແດງອອກຂະໜາດນ້ອຍໃນສາຍເຊວສັດລ້ຽງລູກດ້ວຍນົມແມ່ → ການກວດສອບຄວາມຖືກຕ້ອງໂດຍ SDS-PAGE → ການວິເຄາະການຜູກມັດກັບແອນຕິເຈນໂປຣຕີນ recombinant ໂດຍ ELISA → ການປຽບທຽບໂຄນທີ່ມີພູມຕ້ານທານພໍ່ແມ່	5-6 ອາທິດ
ລະບຸ	ການສະແດງອອກຂອງພູມຕ້ານທານສອງຊະນິດທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດທຳອິດ → ການວິເຄາະການຜູກມັດໂດຍ ELISA → ການປະເມີນ ELISA ຂອງພູມຕ້ານທານທີ່ຮັບຮູ້ໂດຍພູມຕ້ານທານໜູ	1 ອາທິດ
ການຜະລິດພູມຕ້ານທານ	ການຜະລິດແອນຕິບໍດີຂະໜາດໃຫຍ່	3-4 ອາທິດ

ຂໍ້ໄດ້ປຽບຂອງພວກເຮົາ

ພວກເຮົາກວມເອົາການບໍລິການຕົ້ນທາງ ແລະ ປາຍທາງຂອງການຜະລິດພູມຕ້ານທານ, ແລະ ສາມາດໃຫ້ບໍລິການດ້ານວິຊາການຕັ້ງແຕ່ການກະກຽມພູມຕ້ານທານ, ການກັ່ນຕອງພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ ແລະ ການແຍກ ແລະ ການບໍລິສຸດພູມຕ້ານທານ, ການຈັດລຳດັບພູມຕ້ານທານ, ການຢັ້ງຢືນພູມຕ້ານທານ, ແລະອື່ນໆ, ເຊິ່ງສາມາດໃຊ້ສຳລັບການປິ່ນປົວດ້ວຍພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະສອງຊະນິດ.

ການສະແດງອອກສູງ

ການສະແດງອອກຂອງໂປຣຕີນສູງໃນຈຸລັງ CHO.
ການເກັບຮັກສາທີ່ໝັ້ນຄົງ

>2 ອາທິດ ໃນເຊລັ່ມທີ່ອຸນຫະພູມ 37°C.
ບໍ່ມີບັນຫາກ່ຽວກັບການລະລາຍ

>30 ມກ/ມລ
ຊ່ອງທາງເຊວທີ່ໝັ້ນຄົງ

ສາຍເຊວທີ່ໝັ້ນຄົງຫຼາຍສາຍທີ່ມີແອນຕິເຈນຂອງເນື້ອງອກໄດ້ຖືກພັດທະນາຂຶ້ນເພື່ອກວດສອບພູມຕ້ານທານທີ່ມີຄວາມຈຳເພາະຫຼາຍຊະນິດ