Hibridomos technologijų platforma

„Alpha Lifetech“ turi didelę patirtį antikūnų kūrimo srityje. Per daugelį metų „Alpha Lifetech“ sukūrė išsamią antikūnų kūrimo platformą (įskaitant monokloninių antikūnų kūrimą, polikloninių antikūnų kūrimą, rekombinantinių monokloninių antikūnų kūrimą ir kitas antikūnų paruošimo ir kūrimo paslaugas).

„Alpha Lifetech“ klientams teikia kokybiškus antikūnų ir rekombinantinių antikūnų produktus bei paslaugas, o paruošti antikūnai pasižymi dideliu specifiškumu ir geru stabilumu. Antikūnų gryninimo paslaugoms iš įvairių šaltinių, tokių kaip triušių, avių, vištų, pelių monokloniniai antikūnai, taip pat baltymų A/G afininio gryninimo ir antikūnų atskyrimo paslaugoms teikti gali būti naudojami keli antikūnų gryninimo prietaisai ir įranga.

Remdamasi įvairiais antikūnų paruošimo metodais, tokiais kaip hibridomos ląstelių technologija, „Alpha Lifetech“ gali teikti individualiai pritaikytas paslaugas, skirtas skirtingų rūšių monokloniniams ir polikloniniams antikūnams. Be to, gali būti teikiamas platus paslaugų spektras – nuo didelio našumo sekoskaitos, antikūnų paruošimo, antikūnų gryninimo iki antikūnų patvirtinimo. Gryninimo metodą parinksime atsižvelgdami į konkretų kliento tikslą. Remdamasi išsamiomis platformų sistemomis, tokiomis kaip antikūnų kūrimo platforma ir baltymų platforma, „Alpha Lifetech“ teikia antikūnų gamybos tiekimo ir vartojimo paslaugas, teikdama antikūnų gryninimą, didelio našumo sekoskaitą, antikūnų patvirtinimą ir kitas technines paslaugas.

Hibridomos technologija

Hibridomos technologija gali būti naudojama monokloniniams antikūnams gaminti. Suliejus imunizuotų pelių blužnies ląsteles su žmonių arba pelių mielomos ląstelėmis, susidaro hibridomos ląstelės, kurios išskiria specifinius antikūnus. Sukurti pelių monokloniniai antikūnai gali būti naudojami moksliniuose tyrimuose, tokiuose kaip fermentinis imunosorbentinis tyrimas, radioimuninis tyrimas, imunohistochemija, srauto citometrija, baltymų gryninimas ir kt. Monokloninių antikūnų mėginiai apima ascitą, hibridomos supernatantą ir kt. Mėginys, gautas suleidžiant hibridomos ląsteles į gyvūnų pilvo ertmę ir naudojant gyvūno pilvo ertmės fiziologinę aplinką antikūnams gaminti, vadinamas ascito mėginiu. Hibridomos ląstelės, suleidžiamos į gyvūnų pilvo ertmę, gali daugintis ir išskirti monokloninius antikūnus, kurie gali kauptis ascite. Dėl galimų priemaišų (gyvūninių baltymų, hormonų ir kt.) šiuose antikūnuose, juos reikia išgryninti. Atsižvelgiant į B limfocitų sekrecijos funkciją, kultivuojant hibridomos ląsteles, monokloniniai antikūnai dažnai išskiriami į kultūros terpę. Skystis, kuriame yra monokloninių antikūnų kultūros terpėje, vadinamas hibridomos supernatantu. Monokloninių antikūnų grynumas supernatate yra gana didelis, tačiau didelio masto paruošimui reikalingas tolesnis gryninimas, nes jie gaunami kultivuojant in vitro.

Antikūnų gryninimas gali išskirti didelio grynumo antikūnus iš kompleksų. Šiuo metu antikūnų afininis gryninimas ir antikūnų atskyrimas bei gryninimas yra dažniausiai naudojami antikūnų gryninimo metodai, daugiausia apimantys baltymų A/G gryninimą, jonų mainų chromatografiją, gelio filtravimą, nusodinimą ir hidrofobinės sąveikos chromatografiją. Tarp jų baltymų A/G afininio gryninimo paslauga yra plačiai populiari įvairiose antikūnų gryninimo srityse. „Alpha Lifetech“ monokloninių antikūnų, pagrįstų hibridomos technologija, gamybos procesas parodytas 1 paveiksle.

hibridomų technologija – „Alpha Lifetech“

1 pav. Monokloninių antikūnų, pagamintų naudojant hibridomų technologiją, gamybos proceso schema.

Antikūnų ir vaistų konjugatų bei hibridomų technologija

Antikūnų ir vaistų konjugatas (ADC) yra naujas biologinis agentas, chemiškai sujungiantis antikūnus su citotoksiniais vaistais. Antikūnų ir vaistų konjugatas sujungia specifinį antikūnų atpažinimo gebėjimą su galingu citotoksinių vaistų naikinamuoju poveikiu ir tiksliai per antikūnus tiekia citotoksinius vaistus į naviko ląsteles, taip pasiekdamas tikslų gydymą. ADC vaistų antikūnų dalis dažnai gaminama naudojant hibridomų technologiją arba kitus antikūnų gamybos metodus, tokius kaip genetinės inžinerijos antikūnų technologija. Hibridomų technologija suteikia aukštos kokybės antikūnų žaliavas ADC vaistams. ADC vaistai ir monokloniniai antikūnai, paruošti naudojant hibridomų technologiją, atlieka svarbų vaidmenį tokiose srityse kaip vėžio gydymas. Jie gali būti naudojami atskirai arba kartu, siekiant padidinti terapinį veiksmingumą.

Hibridomos technologijos būdu pagaminti monokloniniai antikūnai pasižymi dideliu specifiškumu, gali tiksliai prisijungti prie specifinių antigenų ir juos atpažinti, be to, juos galima gaminti dideliu mastu. Hibridomos sekoskaitos technologijos pagalba galima išskirti ir sekvenuoti hibridomos ląstelių antikūnų genus, kad būtų gautos atitinkamos sekos, o tai naudinga vėlesnei antikūnų ekspresijai. Hibridomos technologijos būdu pagaminti monokloniniai antikūnai gali būti naudojami specifiniams ligų žymenims, tokiems kaip navikų žymenys, virusų antigenai ir kt., aptikti, o tai suteikia tvirtą pagrindą ankstyvai ligų diagnostikai. Be to, jie taip pat gali būti naudojami tokiuose eksperimentuose kaip imunoblotavimas ir imunohistochemija, siekiant tirti baltymų ekspresiją, lokalizaciją, struktūrą ir funkciją.

hibridomos technologijos gamybos antikūnų paslaugos darbo eiga

Žingsniai	Paslaugos turinys	Chronologija
1 veiksmas: gyvūnų imunizacija	(1) Gyvūnų imunizacija 4 kartus, revakcinacija 1 doze, iš viso imunizuota 5 dozės. (2) Prieš imunizaciją buvo surinktas neigiamas serumas, o ketvirtajai dozei buvo atliktas ELISA serumo titrui nustatyti. (3) Jei ketvirtosios dozės serumo antikūnų titras atitinka reikalavimus, 7 dienas prieš kraujo paėmimą bus suleista dar viena imunizacijos dozė. Jei ji neatitinka reikalavimų, bus tęsiama įprastinė imunizacija. (4) Kvalifikuotas stiprumas. Blužnies ląstelės yra išskiriamos ląstelių susiliejimui.	10–12 savaičių
2 veiksmas: suliejimas ir atranka	(1) Suliejimas: Po imunizacijos pelės blužnies ląstelės buvo surinktos ir sulietos su mielomos ląstelėmis. (2) Proliferacija ir atranka: gautos hibridomos ląstelės buvo proliferacijos ir ELISA atrankos būdu atrinktos, siekiant gauti labai efektyvius klonus.	6 savaitės
3 veiksmas: subklonavimas	15–25 teigiamų motininių ląstelių subklonavimas naudojant riboto skiedimo metodą ir galiausiai 10–15 teigiamų klonų nustatymas	3–4 savaitės
4 veiksmas: ascito gamyba ir antikūnų gryninimas	(1) Ascito gamyba: pelėms ascito gamybai naudojamos 10–15 hibridomų padermių (jei gaunamas didelis hibridomų padermių skaičius, jos bus siunčiamos ląstelinėje formoje). (2) Ascito identifikavimas: ascito ELISA aptikimas, stiprumas (baltymas / virusas > 10 ^ 5, maža molekulė / peptidas > 10 ^ 4) tolesniam gryninimui (3) A/G baltymo valymas: ascito valymas	3–4 savaitės
5 veiksmas: Pristatymas	(1) Pateikite 3–5 monokloninių antikūnų hibridomų padermes. (2) Kiekvienoje hibridomos ląstelėje yra 1 mg išgryninto antikūno (ascito gryninimas). (3) Eksperimentinio proceso ataskaita	1 savaitė

Hibridomos technologijos pranašumas

„Alpha Lifetech“ turi didelę patirtį antikūnų kūrimo srityje. Bėgant metams, „Alpha Lifetech“ sukūrė išsamią antikūnų kūrimo platformą.

Kelios rūšys

Imunitetas gali būti suteiktas įvairiems gyvūnams, įskaitant, bet neapsiribojant, pelėms, triušiams, avims ir kt.

Keli taikiniai

Remiantis hibridomų technologija, galima rasti kelių taikinių antikūnų paieškos paslaugas: baltymų, peptidų, mažų molekulių, virusų, membraninių baltymų, mRNR ir kt.

Atsekamumo įrašai

KK kokybės kontrolės standartai (imuninis stiprumas, PBMC kokybės kontrolė, bibliotekos kokybės kontrolė ir atrankos patvirtinimo kokybės kontrolė), anglų kalbos eksperimentinės ataskaitos, originalūs eksperimentiniai įrašai

Asmeninė programa

Individualus programos pritaikymas, siekiant patenkinti įvairių klientų tyrimų projektų poreikius

Susijusi PASLAUGA

Kelios antikūnų kūrimo strategijos

Monokloninių antikūnų kūrimo tarnyba

Hibridomos technologijų platforma

Vienos B ląstelės rūšiavimo platforma

Fagų demonstravimo antikūnų kūrimo platforma

Monokloninių antikūnų kūrimas – „Alpha Lifetech“

Monokloninių antikūnų kūrimo tarnyba

Galime teikti aukštos kokybės, didelio grynumo ir labai specifiškų monokloninių antikūnų kūrimo paslaugas, įskaitant pelių ir triušių monokloninių antikūnų gamybą.