Fagų demonstravimo antikūnų kūrimo platforma

„Alpha Lifetech“, turėdama didelę antikūnų atradimo projektų patirtį, gali teikti pritaikytas monokloninių ir polikloninių antikūnų paslaugas įvairioms rūšims, taip pat antikūnų bibliotekų kūrimo ir atrankos paslaugas. „Alpha Lifetech“ gali suteikti klientams kokybiškus antikūnų ir rekombinantinių antikūnų produktus, taip pat atitinkamas paslaugas, skirtas efektyviems, labai specifiškiems ir stabiliems antikūnams paruošti. Naudodami išsamias antikūnų platformas ir antikūnų inžineriją, teikiame paslaugas, apimančias antikūnų gamybos pradinius ir galutinius etapus, įskaitant technines paslaugas, tokias kaip antikūnų paruošimas, gryninimas, antikūnų sekoskaita ir patvirtinimas.

„Alpha Lifetech“ turi brandžią antikūnų paieškos platformą, teikiančią klientams įvairias paslaugas, įskaitant gyvūnų imunitetą, fagų demonstravimo antikūnų bibliotekos sudarymą ir atranką, antikūnų sekoskaitą, antikūnų ekspresiją, antikūnų gryninimą, antikūnų patvirtinimą ir antikūnų žymėjimą, pagrįstą hibridomos technologija, vienos B ląstelės technologija, fagų demonstravimo technologija ir kt. „Alpha Lifetech“ turi standartinę gamybos liniją ir, be antikūnų paruošimo paslaugų, taip pat gali teikti tokias pagalbines paslaugas kaip antikūnų humanizavimas, antikūnų afininis brandinimas, ADC vaistų kūrimas ir vystymas bei CAR-T vėlesnis sekos kūrimas. Tuo pačiu metu „Alpha Lifetech“ sukūrė antikūnų biblioteką, pagrįstą M13, T4 ir T7 fagų demonstravimo technologijų platformomis, kurios saugojimo talpa siekia iki 10^8–10^9. Bibliotekos teigiamo dažnio, įterpimo dažnio ir įvairovės rodiklis gali siekti daugiau nei 90 %.

Fagų rodymo technologija

Iš pradžių monokloninių antikūnų gamybai buvo naudojama hibridomos monokloninių antikūnų technologija, siekiant gauti pelių hibridomos monokloninius antikūnus. Tiksliau, suliejus imunizuotų pelių blužnies ląsteles su žmonių arba pelių mielomos ląstelėmis, susidaro hibridomos ląstelės, kurios išskiria specifinius hibridomos monokloninius antikūnus. Humanizuotai modifikuojant pelių monokloninius antikūnus ir genetinės inžinerijos būdu modifikuojant antikūnus, kad jie turėtų pastovų žmogaus imunoglobulino regioną, galima sumažinti jų imunogeniškumą. Monokloninių antikūnų inžinerija plačiai naudojama biomedicinos ir klinikinėse srityse.

„Alpha Lifetech“ gali teikti visapusiškas antikūnų inžinerijos paslaugas – nuo ikiklinikinių tyrimų protokolo kūrimo iki antikūnų ir vaistų junginių (AVK) atradimo ir patvirtinimo gyvūnais. Antikūnų ir vaistų junginiai (AVK) gali pernešti chemoterapinius vaistus į vėžio ląsteles. Prisijungę prie specifinių vėžio ląstelėse ekspresuojamų taikinių, AKV išskiria citotoksinius vaistus į vėžio ląsteles. „Alpha Lifetech“ taip pat gali teikti klientams išsamias antikūnų afininio brandinimo paslaugas. Taikant pažangią mutacijų optimizavimo ir didelio našumo fagų demonstravimo patikros technologiją, pirmiausia tikrinami tam tikro afiniteto antikūnai, o tada įvedamos aminorūgščių mutacijos, siekiant sukurti įvairius variantus. Vėliau didelio afiniteto antikūnai buvo įvertinti ir tikrinami naudojant patikros metodus. Po kelių optimizavimo ir struktūrinės analizės etapų galiausiai gauti didesnio afiniteto ir stipresnio specifiškumo antikūnai.

„Alpha Lifetech“ gali sukurti įvairių tipų antikūnų fagų demonstravimo bibliotekas, įskaitant imunines bibliotekas, natyvias bibliotekas, pusiau sintetines bibliotekas ir sintetines bibliotekas. Dėl didelės antikūnų bibliotekų talpos galima gauti labai specifiškus antikūnus. Galima pateikti kelis fagemidų vektorius, tokius kaip pMECS, pComb3X ir pCANTAB 5E, taip pat tokias padermes kaip TG1 E. coli, XL1 Blue ir ER2738. Be bibliotekos talpos iki 10^9, bibliotekos tikslinių fragmentų įterpimo greitis taip pat yra didelis, todėl sudaromos pakankamos sąlygos antikūnų atrankai, tenkinančiai klientus. „Alpha Lifetech“ antikūnų paruošimo paslaugos, pagrįstos fagų demonstravimo technologija, schema parodyta 1 paveiksle.

1 pav. Monokloninių antikūnų, pagamintų naudojant fagų demonstravimo technologiją, gamybos proceso schema.

Fagų demonstravimo antikūnų gamybos darbo eiga

Žingsniai	Paslaugos turinys	Chronologija
1 veiksmas: gyvūnų imunizacija	(1) Gyvūnų imunizacija 4 kartus, revakcinacija 1 doze, iš viso imunizuota 5 dozės. (2) Prieš imunizaciją buvo surinktas neigiamas serumas, o ketvirtajai dozei buvo atliktas ELISA serumo titrui nustatyti. (3) Jei ketvirtosios dozės serumo antikūnų titras atitinka reikalavimus, 7 dienas prieš kraujo paėmimą bus suleista dar viena imunizacijos dozė. Jei ji neatitinka reikalavimų, bus tęsiama įprastinė imunizacija. (4) Kvalifikuotas stiprumas, kraujo paėmimas ir monocitų atskyrimas	10 savaičių
2 veiksmas: kDNR paruošimas	(1) PBMC bendros RNR ekstrakcija (RNR ekstrakcijos rinkinys) (2) Didelės tikslumo RT-PGR kDNR paruošimas (atvirkštinės transkripcijos rinkinys)	1 diena
3 veiksmas: antikūnų bibliotekos kūrimas	(1) Naudojant kDNR kaip šabloną, genai buvo amplifikuoti dviem PGR etapais. (2) Fagų konstravimas ir transformacija: genų splaisingo fagemidų vektorius, TG1 šeimininko bakterijų elektroporacijos transformacija, antikūnų bibliotekos konstravimas. (3) Identifikavimas: Atsitiktinai pasirinkite 24 klonus, PGR identifikavimo teigiamas dažnis + įterpimo dažnis. (4) Pagalbinis fagų paruošimas: M13 fagų amplifikacija + gryninimas. (5) Fagų demonstravimo bibliotekos gelbėjimas	3–4 savaitės
4 veiksmas: antikūnų bibliotekos patikra (3 etapai)	(1) Numatytasis 3 etapų atrankos metodas (kietosios fazės atrankos metodas): atrankos metodas, kuriuo siekiama kuo labiau pašalinti nespecifinius antikūnus. (2) Vieno klono amplifikacija, atrinktas bakteriofagas + IPTG sukelta ekspresija + teigiamų klonų aptikimas ELISA metodu. (3) Visi teigiami klonai buvo atrinkti genų sekvenavimui.	4–5 savaitės

Fagų rodymo technologijos pranašumas

„Alpha Lifetech“ turi didelę patirtį antikūnų kūrimo srityje. Bėgant metams, „Alpha Lifetech“ sukūrė išsamią antikūnų kūrimo platformą.

Pagalbos paslaugos

Pagal klientų poreikius galime teikti įvairias gyvūnų pagrindu sukurtų imuninės bibliotekos kūrimo ir natūralių antikūnų bibliotekos patikros paslaugas.

Keli taikiniai

Galima rasti įvairių tikslinių antikūnų: baltymų, peptidų, mažų molekulių, virusų, membraninių baltymų, mRNR ir kt.

Keli vektoriai

Individualizuotos bibliotekos kūrimo paslaugos, galime pasiūlyti įvairius bakteriofagų vektorius, įskaitant PMECS, pComb3X ir pCANTAB 5E, ir modifikuoti juos pagal kliento poreikius.

Subrendusi platforma

Saugojimo talpa gali siekti 10^8–10^9, įterpimo dažnis viršija 90 %, o atrankos būdu gautų antikūnų afinitetas paprastai yra nM pM lygyje.

Susijusi PASLAUGA

Kelios antikūnų kūrimo strategijos

Monokloninių antikūnų kūrimo tarnyba

Hibridomos technologijų platforma

Vienos B ląstelės rūšiavimo platforma

Fagų demonstravimo antikūnų kūrimo platforma

Monokloninių antikūnų kūrimas – „Alpha Lifetech“

Monokloninių antikūnų kūrimo tarnyba

Galime teikti aukštos kokybės, didelio grynumo ir labai specifiškų monokloninių antikūnų kūrimo paslaugas, įskaitant pelių ir triušių monokloninių antikūnų gamybą.

Hibridomos technologijų platforma

Įskaitant imunizacijos programą, antikūnų paruošimo paslaugas, antikūnų gryninimą, didelio našumo antikūnų sekvenavimą, antikūnų patvirtinimą ir kt.

Vienos B ląstelės rūšiavimo platforma

„Alpha Lifetech“ pranašumai yra susiję su atrankos laiko sutrumpinimu ir aukštos kokybės antikūnų gavimu. Ji gali teikti antigenų kūrimo, sintezės ir modifikavimo, gyvūnų imuniteto nustatymo, pavienių B ląstelių praturtinimo atrankos ir pavienių ląstelių sekvenavimo paslaugas.