Įvadas į susintetintų antikūnų bibliotekas

Susintetinta antikūnų biblioteka, dar vadinama „de novo“ biblioteka, yra sintezės metodas, kai naudojami tokie metodai kaip DNR sintezė arba fagų demonstravimas, siekiant sukurti ir susintetinti pilnus antikūnų kintamuosius regionus, įskaitant karkasinius regionus ir CDR, nesiremiant naivinėmis antikūnų bibliotekomis.

Pusiau sintetinė antikūnų biblioteka sukuriama derinant natūraliai susidarančias antikūnų bibliotekas su sintetine įvairove. Paprastai tai apima DNR oligonukleotidų sintezę, siekiant gauti skirtingų komplementarumo nustatymo regionų (CDR) rinkinį, kuris vėliau sujungiamas su pastovia antikūnų struktūra, gauta iš natūralių šaltinių, tokių kaip žmogaus ar gyvūnų B ląstelės. Susintetintas CDR į biblioteką įneša įvairovės, todėl antikūnai veikia platų epitopų spektrą. Pusiau sintetinė antikūnų biblioteka suteikia kompromisą tarp natūralios imuninės sistemos įvairovės ir kontroliuojamos įvairovės, pasiektos sintetiniais metodais.

Skirtumas tarp naivinių ir sintetinių antikūnų bibliotekų priklauso nuo imunoglobulinų genų šaltinio. Tuo tarpu skirtumas tarp pusiau susintetintos ir susintetintos antikūnų bibliotekos yra tas, kad pirmąją sudaro dalis naivinių antikūnų segmentų, tokių kaip lengvoji arba sunkioji grandinė, ir tik vienas iš jų yra susintetintas in vitro; o susintetinta biblioteka yra visiškai gauta dirbtinės sintezės būdu, naudojant PGR in vitro.

„Alpha Lifetech“ gali suteikti

„Alpha Lifetech Inc.“Remdamiesi mūsų profesionalia antikūnų paieškos platforma, galime pasiūlyti pusiau susintetintų / susintetintų antikūnų biblioteką iš gyvūnų ir žmonių. Turėdami ilgametę genetinės modifikacijos ir bibliotekų kūrimo patirtį, galime sukurti susintetintas bibliotekas, kurios geba gaminti sintetinius antikūnus, kurių afinitetas ir specifiškumas viršija natūralių antikūnų galimybes.„Alpha Lifetech“Ekspertai didžiuojasi galėdami pranešti, kad galime garantuoti aukštą sėkmės rodiklį sudarant antikūnų biblioteką, kurioje yra 10^8–10^10 nepriklausomų klonų.

„Alpha Lifetech Inc.“didžiuojasi galėdama pasiūlyti išsamias antikūnų bibliotekų kūrimo paslaugas, skirtas patenkinti įvairius viso pasaulio tyrėjų poreikius, įskaitant scFv, Fab, VHH antikūnų ir pritaikytas bibliotekas. Mūsų tikslas – suprasti ir patenkinti skirtingų klientų poreikius bei padėti spręsti visas kylančias ir kylančias problemas mokslinių tyrimų darbe.

Susintetintų antikūnų bibliotekų kūrimo paslaugos procesas

Dizainas
Projektavimo etapas apima antikūnų struktūrų ir komplementarumą lemiančių regionų (CDR) parinkimą remiantis esamomis antikūnų sekomis arba struktūriniais duomenimis. Sintetiniai CDR antikūnai taip pat gali būti sukurti siekiant įdiegti specifines funkcijas arba pagerinti prisijungimo savybes.

Sintezė
Sintetinė DNR, koduojanti sukurtas antikūnų sekas, įskaitant ir karkaso regionus, ir CDR, yra sintezuojama naudojant cheminius arba fermentinius metodus.

Asamblėja
Susintetinti DNR fragmentai surenkami į antikūnų ekspresijos vektorius, naudojant tokius metodus kaip PGR, ligavimas arba Gibsono surinkimas. Šie vektoriai gali būti įvedami į ekspresijos sistemas, tokias kaip bakterijų, mielių ar žinduolių ląstelės, antikūnų gamybai.

Atranka ir atranka
Sukurtos antikūnų bibliotekos yra tikrinamos ir atrenkamos, ieškant antikūnų su norimomis savybėmis, naudojant didelio našumo atrankos metodus. Tai gali apimti tokius metodus kaip fagų demonstravimas, mielių demonstravimas arba ribosomų demonstravimas, priklausomai nuo bibliotekos formato ir taikymo.

Susintetintų antikūnų bibliotekų kūrimo paslauga

„Alpha Lifetech Inc.“teikia klientams vieno langelio principu veikiančias antikūnų bibliotekų projektavimo ir sintezės paslaugas, liguojant sunkiosios ir lengvosios grandinės V genų repertuarus į fagų vektorių, naudojant Cre-lox vietai specifinę rekombinacijos sistemą, kad būtų sukurtas ant fagų rodomas Fab repertuaras, kurį sudaro 6,5 × 10^10 klonų. Biblioteka davė antikūnus prieš daugybę antigenų, kai kurie iš jų turėjo nanomolinį afinitetą. Žmogaus antikūnų bibliotekos generavimas pagrįstas M13 fagų demonstravimo technologija (parodyta paveikslėlyje žemiau).