Įvadas į sintezuotų antikūnų bibliotekas

Sintetintų antikūnų biblioteka, taip pat žinoma kaip De novo biblioteka, yra sintetinis metodas, kuris naudoja tokius metodus kaip DNR sintezė arba fagų demonstravimas, kad būtų galima sukurti ir susintetinti visas antikūnų kintamąsias sritis, įskaitant karkaso sritis ir CDR, nepasikliaujant naiviomis antikūnų bibliotekomis.

Pusiau sintetinė antikūnų biblioteka sukurta sujungiant natūraliai susidariusias antikūnų bibliotekas su sintetine įvairove. Paprastai tai apima DNR oligonukleotidų sintezę, kad būtų sukurtas skirtingų komplementarių determinuojančių regionų (CDR) rinkinys, kuris vėliau sujungiamas su pastovia antikūnų struktūra, gauta iš natūralių šaltinių, tokių kaip žmogaus ar gyvūno B ląstelės. Susintetintas CDR įveda į biblioteką įvairovę, todėl antikūnai nukreipti į platų epitopų spektrą. Pusiau sintetinių antikūnų biblioteka sudaro kompromisą tarp natūralios imuninės sistemos įvairovės ir kontroliuojamos įvairovės, pasiekiamos sintetiniais metodais.

Skirtumas tarp naivių ir sintetinių antikūnų bibliotekų priklauso nuo imunoglobulino genų šaltinio. Tuo tarpu skirtumas tarp pusiau sintezuotų ir susintetintų antikūnų bibliotekos yra tas, kad pirmoji susideda iš dalies naivių antikūnų segmentų, tokių kaip lengvoji arba sunkioji grandinė, ir tik vienas iš jų yra sintezuojamas in vitro; o susintetintas yra visiškai gautas iš dirbtinės sintezės PGR in vitro būdu.

Alpha Lifetech gali pasiūlyti

Alpha Lifetech Inc.gali pasiūlyti pusiau sintezuotų / sintezuotų gyvūnų ir žmonių antikūnų biblioteką, pagrįstą mūsų profesionalia antikūnų atradimo platforma. Turint ilgametę genetinės modifikacijos ir bibliotekų kūrimo patirtį, galima sukurti sintezuotas bibliotekas, kurios gali gaminti sintetinius antikūnus, kurių afinitetas ir specifiškumas viršija natūralių antikūnų pajėgumą.Alpha Lifetechekspertai didžiuojasi galėdami pranešti, kad galime garantuoti aukštą antikūnų bibliotekos, kurioje yra 10^8–10^10 nepriklausomų klonų, kūrimo sėkmės rodiklį.

Alpha Lifetech Inc.didžiuojasi galėdamas pasiūlyti visapusiškas antikūnų bibliotekos konstravimo paslaugas, skirtas patenkinti įvairius pasaulinių tyrėjų poreikius, įskaitant scFv, Fab, VHH antikūnus ir pritaikytas bibliotekas. Mūsų tikslas yra suprasti ir patenkinti skirtingų klientų poreikius bei padėti sprendžiant bet kokias artėjančias ir kylančias problemas atliekant tiriamąjį darbą.

Sintetinių antikūnų bibliotekų kūrimo paslaugų procesas

Dizainas
Projektavimo fazė apima antikūnų karkasų ir komplementarumą lemiančių regionų (CDR) parinkimą pagal esamas antikūnų sekas arba struktūrinius duomenis. Sintetiniai CDR antikūnai taip pat gali būti sukurti tam, kad būtų įdiegtos specifinės funkcijos arba sustiprintos jungimosi savybės.

Sintezė
Sintetinė DNR, koduojanti sukurtas antikūnų sekas, įskaitant karkaso sritis ir CDR, sintezuojama cheminiais arba fermentiniais metodais.

Surinkimas
Susintetinti DNR fragmentai surenkami į antikūnų ekspresijos vektorius, naudojant tokius metodus kaip PGR, ligavimas arba Gibsono surinkimas. Tada šie vektoriai gali būti įvedami į ekspresijos sistemas, tokias kaip bakterijų, mielių ar žinduolių ląstelės antikūnų gamybai.

Atranka ir atranka
Sukurtos antikūnų bibliotekos yra patikrinamos ir atrenkamos norimų savybių antikūnams, naudojant didelio našumo atrankos metodus. Tai gali apimti tokius metodus kaip fagų rodymas, mielių rodymas arba ribosomų rodymas, priklausomai nuo bibliotekos formato ir programos.

Susintetintų antikūnų bibliotekų kūrimo paslauga

Alpha Lifetech Inc.suteikia klientams vieno langelio antikūnų bibliotekų dizainą ir susintetintą paslaugą, susiejant sunkiosios ir lengvosios grandinės V-genų repertuarus į fago vektorių, naudojant Cre-lox vietai būdingą rekombinacijos sistemą, kad būtų sukurtas Fabs, rodomas fage, repertuaras, kurį sudaro 6,5 × 10^10 klonų. Biblioteka davė Abs prieš daugelį antigenų, kai kurie su nanomoliniais afinitetais. Žmogaus antikūnų bibliotekos generavimas pagrįstas M13 fagų rodymo technologija (parodyta paveikslėlyje žemiau).