Aptamer sintēzes platforma
Atkarībā no mērķa, nukleīnskābju aptamēri ietver DNS aptamērus, RNS aptamērus, olbaltumvielu aptamērus un šūnu membrānas aptamērus.
SAZINIETIES AR MUMS01
Aptamer sintēzes platforma
Ievads nukleīnskābju aptamēros
Nukleīnskābju aptamēri, kas pazīstami arī kā aptamēri, kompleksi un ķīmiskās antivielas, tiek iegūti, veicot in vitro selex skrīningu ar ligandu eksponenciālās bagātināšanas sistēmas evolūcijas (SELEX) metodi. Tā ir vienpavedienu dezoksiribonukleīnskābe (ssDNS) jeb ribonukleīnskābe (RNS), kas specifiski un efektīvi saistās ar mērķa molekulu un parasti sastāv no 20–80 bāzēm.
Ar in vitro skrīningu iegūtie nukleīnskābju aptamēri ir strukturāli stabili, vienkārši sintezējami un viegli modificējami, un tie ir pārāki par parasti izmantotajām bioloģiski iegūtajām antivielām sintēzes un pielietojuma ziņā; turklāt nukleīnskābju aptamēri var specifiski saistīties ar saviem mērķiem, izmantojot dažādus spēkus, kopumā tie mijiedarbojas ar mazām molekulām, kuru pamatā ir plašs konformāciju klāsts (piemēram, matadatas, ieliekti izliektas, pseidosagrievotas utt.), izmantojot ūdeņraža saites, elektrostatiskos spēkus, hidrofobas mijiedarbības utt. Atkarībā no mērķa nukleīnskābju aptamēri ietver DNS aptamērus, RNS aptamērus, olbaltumvielu aptamērus un šūnu membrānas aptamērus.
Alpha Lifetech aptameru sintēzes platforma, kas galvenokārt ietver SELEX aptameru bibliotēkas sintēzes pakalpojumu un aptameru (DNS, RNS vai XNA) izstrādes pakalpojumu, kā arī aptameru skrīninga, aptameru optimizācijas un aptameru identifikācijas analīzes pakalpojumus.
Aptameru sintēzes tehniskais process
Pamatprincips un tehnoloģiskais process
Nukleīnskābju aptameru sintēzes tehnoloģijas process ir tāds, ka in vitro ķīmiski sintezē vienpavedienu oligonukleotīdu bibliotēku, sajauc to ar mērķa vielu, un maisījumā ir mērķa vielas un nukleīnskābes komplekss, nukleīnskābe, kas nesaistās ar mērķa vielu, tiek izskalota, un nukleīnskābes molekulas, kas saistās ar mērķa vielu, tiek izolētas, un nukleīnskābes molekulas tiek izmantotas kā veidnes, lai veiktu PCR amplifikāciju nākamajai skrīninga kārtai. Atkārtoti veicot selex skrīningu un amplifikāciju, dažas DNS vai RNS molekulas, kas nesaistās ar mērķa vielu vai kurām ir zema vai vidēja afinitāte pret mērķa vielu, tiks izskalotas, un aptamēri, t.i., DNS vai RNS ar augstu afinitāti pret mērķa vielu, tiks atdalīti no ļoti lielās nejaušās bibliotēkas, un to tīrība palielināsies līdz ar SELEX procesu, un galu galā tie aizņems lielu bibliotēkas daļu.
Tehniskā procesa galvenie punkti
Nukleīnskābju aptameru selex skrīninga process sākas ar ķīmiski sintezētu nejaušu oligonukleotīdu bibliotēku montāžu. Nejaušām oligonukleotīdu bibliotēkām ir liela bibliotēkas ietilpība. Augsta daudzveidība ir to būtiska priekšrocība. Teorētiski, ja nejaušā secība oligonukleotīdā sastāv no n bāzēm, bibliotēkas ietilpība ir 4n. Ja ņemam vērā mākslīgās modifikācijas bibliotēku, tā palielinās nejaušo secību daudzveidību. Pašlaik SELEX eksperimentos parasti izmantoto oligonukleotīdu nejaušo secību garums parasti ir 30 bāzes, un bibliotēkas ietilpība var sasniegt pat 10^18. Bibliotēkas ietilpība ir izšķiroša augstas afinitātes ligandu selex skrīningam. Tomēr, tā kā sintētisko bibliotēku koncentrācija ir noteikta, pārāk garas nejaušas secības samazinās katra oligonukleotīda daudzumu bibliotēkās, kas samazinās selex skrīninga varbūtību konkrētam aptameram. Parasti bibliotēkas ietilpība 10^13~10^15 pirmajā selex skrīninga kārtā var apmierināt praktiskās vajadzības.
1. attēls. SELEX tehniskais process
Nukleīnskābes aptamera priekšrocības
| Priekšrocības | Sīkāka informācija |
|---|---|
| Tiešs | Izvairoties no tradicionālā dzīvnieku eksperimentu procesa un atlasot tieši no in vitro bibliotēkām; selex skrīnings mērķa molekulu aptamēriem, kas nav imunogēni, ar zemu imunogēnu līmeni vai pat toksiski. |
| Plašs pielietojumu klāsts | Mērķa molekulas var būt organiskās krāsvielas, aminoskābes, olbaltumvielas, antibiotikas, peptīdi, vitamīni, zāles, pat šūnas, patogēni, vīrusi, audi utt. |
| Spēcīga afinitāte | Aptamēriem ir augsta specifiskums un afinitāte mērķa molekulu in vitro skrīningā. |
| Stabilitāte | Aptamēri ir maza izmēra, viegli iegūstami, reproducējami sintēzē, un to stabilitāti var uzlabot ar ķīmisku sintēzi un modificēšanu. Aptamēri ir ķīmiski stabili, tiem ir ilgs glabāšanas laiks un tos var transportēt istabas temperatūrā. |
01/
Klīniskā medicīna: mērķtiecīga audzēju terapija, vēža diagnostikas metodes
Gladtrust kredītvēstures ziņojumi ir veiksmīgi veidoti, pamatojoties uz lielāko tiešsaistes uzņēmumu kredītinformācijas datubāzi — CreditVision.
Datubāze savlaicīgi apkopo un dinamiski atjaunina informāciju no vairāk nekā 200 000 datu avotiem. Informācijas atjaunināšanas un pārvaldības process var garantēt informācijas precizitāti.
Datubāze savlaicīgi apkopo un dinamiski atjaunina informāciju no vairāk nekā 200 000 datu avotiem. Informācijas atjaunināšanas un pārvaldības process var garantēt informācijas precizitāti.
02/
Analītiskās testēšanas joma: organisko piesārņotāju noteikšana, mazo molekulu zāļu noteikšana, pārtikas izraisītu patogēnu noteikšana
Šajā jomā nukleīnskābju aptameru sintēzes tehnoloģija tiks izmantota kopā ar koloidālā zelta imunohromatogrāfiju, kurā vispirms tiks sagatavots koloidālais zelts un noteikta tā kvalitāte, pēc tam tas tiks savienots ar nukleīnskābju aptameru, raksturots un uzsmidzināts uz saistīšanas paliktņa, un tiks sagatavotas testa strēmeles, izmantojot detektējamo poliklonālo antivielu kā detektēšanas līniju un nukleīnskābju aptameru komplementāro secību kā kvalitātes kontroles līniju, lai analizētu mērķa vielas klātbūtni, pamatojoties uz negatīvo un pozitīvo eksperimentu rezultātiem.
03/
Bioloģijas joma: biosensoru izstrāde
Nukleīnskābju aptameru sensori izmanto aptameru kā atpazīšanas elementu mērķa vielas atpazīšanai un atpazīšanas rezultāta pārveidošanai signālā, ko var izmērīt. Signāla pārveidošana var būt elektroķīmiska, optiska, temperatūras, pjezoelektriska, magnētiska un mikromehāniska vai šo metožu kombinācija. Salīdzinot ar esošajām noteikšanas metodēm, uz nukleīnskābju aptameru bāzes veidotie sensori parasti ir viegli lietojami, specifiski, atsaucīgi un jutīgi, un šīs priekšrocības atvieglo to pielietošanu reālos paraugos un tiem ir labas attīstības perspektīvas.
SELEX aptamēru sintēzes pakalpojums
Alpha Lifetech SELEX aptameru sintēzes pakalpojums ietver SELEX aptameru bibliotēkas izveidi, SELEX optimizāciju utt. Alpha Lifetech mērķis ir iegūt klientiem augstas afinitātes un specifiskuma SELEX aptamerus, izmantojot in vitro skrīninga procesu.
LASĪT VAIRĀK
Nukleīnskābju aptameru izstrādes pakalpojums
Alpha Lifetech nukleīnskābju aptameru izstrādes pakalpojums galvenokārt balstās uz SELEX tehnoloģiju SELEX aptameru skrīningam, tostarp DNS aptameru, RNS aptameru un XNA aptameru izstrādi, ietverot bibliotēkas dizainu, oligonukleotīdu sintēzi, bibliotēkas konstruēšanu un verifikāciju.
LASĪT VAIRĀKJa jums ir kādi jautājumi, lūdzu, sazinieties ar mums jebkurā laikā.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102