Fāgu displeja antivielu izstrādes platforma

Uzņēmums “Alpha Lifetech”, kam ir plaša projektu pieredze antivielu atklāšanā, var nodrošināt pielāgotus monoklonālo un poliklonālo antivielu pakalpojumus vairākām sugām, kā arī antivielu bibliotēku veidošanas un skrīninga pakalpojumus. Uzņēmums “Alpha Lifetech” var nodrošināt klientus ar kvalitatīviem antivielu un rekombinanto antivielu produktiem, kā arī atbilstošus pakalpojumus, lai sagatavotu efektīvas, ļoti specifiskas un stabilas antivielas. Izmantojot visaptverošas antivielu platformas un antivielu inženieriju, mēs nodrošinām pakalpojumus, kas aptver antivielu ražošanas augšupējo un lejupējo posmu, tostarp tehniskos pakalpojumus, piemēram, antivielu sagatavošanu, attīrīšanu, antivielu sekvencēšanu un validāciju.

Uzņēmumam Alpha Lifetech ir nobriedusi antivielu atklāšanas platforma, kas klientiem nodrošina virkni pakalpojumu, tostarp dzīvnieku imunitāti, fāgu displeja antivielu bibliotēkas izveidi un skrīningu, antivielu sekvencēšanu, antivielu ekspresiju, antivielu attīrīšanu, antivielu validāciju un antivielu marķēšanu, pamatojoties uz hibridomas tehnoloģiju, atsevišķu B šūnu tehnoloģiju, fāgu displeja tehnoloģiju un citiem. Uzņēmumam Alpha Lifetech ir standarta ražošanas līnija, un papildus antivielu sagatavošanas pakalpojumiem var tikt nodrošināti arī tādi atbalsta pakalpojumi kā antivielu humanizācija, antivielu afinitātes nobriešana, ADC zāļu izstrāde un izstrāde, kā arī CAR-T sekojošas sekvences izstrāde. Vienlaikus Alpha Lifetech ir izveidojis antivielu bibliotēku, kuras pamatā ir M13, T4 un T7 fāgu displeja tehnoloģiju platformas, ar uzglabāšanas ietilpību līdz 10^8-10^9. Bibliotēkas pozitīvais ātrums, ievietošanas ātrums un daudzveidība var sasniegt vairāk nekā 90%.

Fāgu displeja tehnoloģija

Monoklonālo antivielu ražošana sākotnēji tika sagatavota, izmantojot hibridomas monoklonālo antivielu tehnoloģiju, lai iegūtu peļu hibridomas monoklonālās antivielas. Konkrēti, sapludinot imunizētu peļu liesas šūnas ar cilvēku vai peļu mielomas šūnām, tiek veidotas hibridomas šūnas, kas izdala specifiskas hibridomas monoklonālās antivielas. Humanizēti modificējot peļu monoklonālās antivielas un ģenētiskās inženierijas ceļā modificējot antivielas, lai tām piešķirtu nemainīgu cilvēka imūnglobulīna reģionu, var samazināt to imunogenitāti. Monoklonālo antivielu inženierija tiek plaši izmantota biomedicīnas un klīniskajos pielietojumos.

Alpha Lifetech var nodrošināt pilna servisa antivielu inženierijas pakalpojumus, sākot no preklīnisko pētījumu protokolu izstrādes līdz antivielu zāļu konjugātu (ADC) atklāšanai un validācijai uz dzīvniekiem. Antivielu zāļu konjugāti (ADC) var piegādāt ķīmijterapijas zāles vēža šūnām. Pēc saistīšanās ar specifiskiem mērķiem, kas ekspresēti vēža šūnās, ADC izdala citotoksiskas zāles vēža šūnās. Alpha Lifetech var arī nodrošināt klientiem visaptverošus antivielu afinitātes nobriešanas pakalpojumus. Izmantojot uzlabotu mutāciju optimizāciju un augstas caurlaidības fāgu displeja skrīninga tehnoloģiju, vispirms tiek pārbaudītas antivielas ar noteiktu afinitāti, un pēc tam tiek ieviestas aminoskābju mutācijas, lai ģenerētu dažādus variantus. Pēc tam augstas afinitātes antivielas tika novērtētas un pārbaudītas, izmantojot skrīninga metodes. Pēc vairākām optimizācijas un strukturālās analīzes kārtām galu galā tika iegūtas antivielas ar augstāku afinitāti un spēcīgāku specifiskumu.

Alpha Lifetech var izveidot dažāda veida antivielu fāgu displeja bibliotēkas, tostarp imūnās bibliotēkas, dabiskās bibliotēkas, daļēji sintētiskās bibliotēkas un sintētiskās bibliotēkas. Balstoties uz antivielu bibliotēku lielo ietilpību, var iegūt ļoti specifiskas antivielas. Var nodrošināt vairākus fāgmīdu vektorus, piemēram, pMECS, pComb3X un pCANTAB 5E, kā arī tādus celmus kā TG1 E. coli, XL1 Blue un ER2738. Papildus bibliotēkas ietilpībai līdz 10^9, arī bibliotēkas mērķa fragmentu ievietošanas ātrums ir augsts, radot pietiekamus apstākļus antivielu skrīningam, kas apmierina klientus. Alpha Lifetech antivielu sagatavošanas pakalpojuma, kas balstīts uz fāgu displeja tehnoloģiju, blokshēma ir parādīta 1. attēlā.

1. att. Monoklonālo antivielu sagatavošanas procesa diagramma, kuras pamatā ir fāgu displeja tehnoloģija.

Fāgu displeja antivielu ražošanas darbplūsma

Soļi	Pakalpojuma saturs	Laika skala
1. darbība: dzīvnieku imunizācija	(1) Dzīvnieku imunizācija 4 reizes, revakcinācija 1 deva, kopā imunizētas 5 devas. (2) Pirms imunizācijas tika savākts negatīvs serums, un ceturtajai devai tika veikta ELISA, lai noteiktu seruma titru. (3) Ja ceturtās devas seruma antivielu titrs atbilst prasībām, 7 dienas pirms asins analīzes paņemšanas tiks ievadīta vēl viena imunizācijas deva. Ja tā neatbilst prasībām, tiks turpināta standarta imunizācija. (4) Kvalificēta iedarbība, asins paraugu ņemšana un monocītu atdalīšana	10 nedēļas
2. darbība: kDNS sagatavošana	(1) PBMC kopējās RNS ekstrakcija (RNS ekstrakcijas komplekts) (2) Augstas precizitātes RT-PCR kDNS sagatavošana (reversās transkripcijas komplekts)	1 diena
3. solis: antivielu bibliotēkas izveide	(1) Izmantojot kDNS kā veidni, gēni tika amplificēti ar divām PCR kārtām. (2) Fāgu konstruēšana un transformācija: gēnu splaisēšanas fāgemīda vektors, TG1 saimniekbaktēriju elektroporācijas transformācija, antivielu bibliotēkas konstruēšana. (3) Identifikācija: Nejauši atlasa 24 klonus, PCR identifikācijas pozitīvs ātrums + ievietošanas ātrums. (4) Palīgfāgu sagatavošana: M13 fāgu amplifikācija+attīrīšana. (5) Fāgu displeja bibliotēkas glābšana	3–4 nedēļas
4. solis: antivielu bibliotēkas skrīnings (3 kārtas)	(1) Noklusējuma 3 kārtu skrīnings (cietfāzes skrīnings): spiediena skrīnings, lai pēc iespējas vairāk noņemtu nespecifiskas antivielas. (2) Viena klona amplifikācija, atlasīti bakteriofāgi + IPTG inducēta ekspresija + pozitīvo klonu noteikšana ar ELISA metodi. (3) Visi pozitīvie kloni tika atlasīti gēnu sekvencēšanai.	4–5 nedēļas

Fāgu displeja tehnoloģijas priekšrocība

Uzņēmumam “Alpha Lifetech” ir bagāta pieredze antivielu izstrādes jomā. Gadu gaitā “Alpha Lifetech” ir izveidojis visaptverošu antivielu izstrādes platformu.

Atbalsta pakalpojumi

Atbilstoši klientu vajadzībām mēs varam nodrošināt dažādus uz dzīvniekiem balstītus imūnbibliotēku izveides pakalpojumus un dabisko antivielu bibliotēku skrīninga pakalpojumus.

Vairāki mērķi

Ir pieejami vairāki mērķa antivielu atklāšanas pakalpojumi: olbaltumvielas, peptīdi, mazas molekulas, vīrusi, membrānas olbaltumvielas, mRNS utt.

Vairāki vektori

Personalizēts bibliotēkas izveides pakalpojums, mēs varam nodrošināt dažādus bakteriofāgu vektorus, tostarp PMECS, pComb3X un pCANTAB 5E, un modificēt tos atbilstoši klientu vajadzībām.

Nobriedušu cilvēku platforma

Uzglabāšanas ietilpība var sasniegt 10^8-10^9, ievietošanas ātrums pārsniedz 90%, un skrīninga laikā iegūto antivielu afinitāte parasti ir nM pM līmenī.

Saistītie PAKALPOJUMI

Vairākas antivielu attīstības stratēģijas

Monoklonālo antivielu izstrādes pakalpojums

Hibridomas tehnoloģiju platforma

Viena B šūnu šķirošanas platforma

Fāgu displeja antivielu izstrādes platforma

monoklonālo antivielu izstrāde — Alpha Lifetech

Monoklonālo antivielu izstrādes pakalpojums

Mēs varam nodrošināt augstas kvalitātes, augstas tīrības pakāpes un ļoti specifisku monoklonālo antivielu izstrādes pakalpojumus, tostarp peļu monoklonālo antivielu un trušu monoklonālo antivielu ražošanu.

Hibridomas tehnoloģiju platforma

Ieskaitot imunizācijas programmu, antivielu sagatavošanas pakalpojumus, antivielu attīrīšanu, antivielu augstas caurlaidspējas sekvencēšanu, antivielu validāciju utt.

Viena B šūnu šķirošanas platforma

Alpha Lifetech ir priekšrocības skrīninga laika un augstas kvalitātes antivielu iegūšanas ziņā. Tas var nodrošināt antigēnu dizainu, sintēzi un modifikāciju, dzīvnieku imunitāti, atsevišķu B šūnu bagātināšanas skrīningu, atsevišķu šūnu sekvencēšanu.