Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas būvniecības platforma

Alpha Lifetech piedāvā vairākas peptīdu bibliotēku konstruēšanas tehnoloģijas. Mēs galvenokārt piedāvājam T7 peptīdu bibliotēku un M13 peptīdu bibliotēku konstruēšanas pakalpojumus atbilstoši fāgu tipiem; mēs piedāvājam lineāras cilpas 7 peptīdu bibliotēkas un 12 peptīdu bibliotēkas konstruēšanas pakalpojumus atbilstoši peptīdu molekulu secības lielumam utt. Mēs piedāvājam arī pielāgotus peptīdu bibliotēku konstruēšanas pakalpojumus. Mēs piedāvājam arī pielāgotus peptīdu sintēzes un konstruēšanas pakalpojumus.

Fāgu displeja tehnoloģija kā metode funkcionālu eksogēnu peptīdu pārvietošanai no fāga uz kapsīda virsmu, saglabājot eksogēnā proteīna vai peptīda strukturālo un funkcionālo aktivitāti, neietekmē rekombinantā fāga spēju inficēt saimniekšūnu. Katra fāga vīrusa daļiņa uz savas virsmas var attēlot tikai vienu eksogēnu nejaušu peptīdu, un visu fāgu, kas attēlo dažādus peptīdus, kolekcija veido fāgu displeja peptīdu bibliotēku. Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas ir spēcīgi rīki vairāku pielāgotu sintezētu peptīdu ekspresijai un specifiskai peptīdu skrīningam, un tās ir plaši izmantotas antigēnu epitopu analīzes, zāļu skrīninga un vakcīnu izstrādes jomā.

Ievads peptīdu bibliotēkas veidošanā

Peptīdu bibliotēkas konstruēšana ir peptīdu bibliotēku amplifikācija, ligējot peptīdu DNS sekvences dažādos formātos ar atbilstošajām fāga apvalka olbaltumvielu sekvencēm un izmantojot fāgu atkārtotu salikšanu, lai pārvietotu mērķa peptīdu uz fāga virsmas. Peptīdu bibliotēkas konstruēšana, kuras pamatā ir fāgu displeja tehnoloģija, pieder pie peptīdu sintēzes biosintēzes kategorijas, un tirgū ir pieejamas šķidrfāzes peptīdu sintēzes un cietfāzes peptīdu sintēzes metodes. Pašlaik Alpha Lifetech piedāvā dažādas peptīdu bibliotēku konstruēšanas tehnoloģijas, kas var nodrošināt iepriekš sagatavotas peptīdu bibliotēkas un nejaušinātas peptīdu bibliotēkas atbilstoši peptīdu molekulu secības lielumam, tostarp 7 peptīdu bibliotēkas konstruēšanu, 12 peptīdu bibliotēkas konstruēšanu, 15 peptīdu bibliotēkas konstruēšanu, cikliskās 7 peptīdu bibliotēkas konstruēšanu un cikliskās 12 peptīdu bibliotēkas konstruēšanu, un to var arī pielāgot, lai sintezētu peptīdu bibliotēkas dažādiem veidiem un pielietojumiem.

Peptīdu bibliotēkas veidošanas un skrīninga pielietojums

Ar fāgu displeja tehnoloģiju nejaušināti ģenerētas peptīdu bibliotēkas nodrošina funkcionālu piekļuvi peptīdiem un fizisku saikni starp fenotipu (parādīto peptīdu) un genotipu (kodēto DNS); šīs bibliotēkas ir piemērotas skrīninga procesiem, kas ar afinitātes attīrīšanu atdala saistītos klonus no nesaistītajiem kloniem. Ar fāgu displeja peptīdu bibliotēkas var izmantot (i) imūnšūnu epitopu raksturošanai, (ii) ar receptoriem vai olbaltumvielām saistītu bioaktīvu peptīdu, ar neolbaltumvielām saistītu peptīdu, šūnu vai orgānu specifisku peptīdu u. c. skrīningam un (iii) ar peptīdiem saistītu zāļu piegādes sistēmu izstrādei.

Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas process

1. attēls. Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas konstruēšanas platforma

Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas veidošanas darbplūsma

Process	Pakalpojuma saturs	Laika skala
1. Nukleotīdu secības sintēze	Klienta norādītā garuma nukleotīdu secību nejauša sintēze	2–3 nedēļas
2. Polimerizācija un gremošana	Sintezētā DNS secības polimerizācija un gremošana	1 diena
3. Elektrokonversijas bibliotēku izveide	Tika konstruētas ER2738 saimniekbaktērijas, un pēc tam E. coli tika transformēta ar labi konstruētu rekombinanto plazmīdu	1 nedēļa
4. Peptīdu bibliotēkas lieluma un daudzveidības noteikšana	Peptīdu bibliotēkas lieluma noteikšana, izmantojot koloniju skaitīšanu, un peptīdu bibliotēkas daudzveidības noteikšana, izmantojot sekvencēšanu	2–3 dienas
5. Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas izveide	Inficējot fāgu iepakošanas peptīdu bibliotēku	1 nedēļa