Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas platforma
Balstoties uz fāgu displeja tehnoloģiju, Alpha Lifetech var nodrošināt klientiem augstas kvalitātes fāgu displeja peptīdu bibliotēku veidošanas un skrīninga pakalpojumus, tostarp lineāru 7 peptīdu bibliotēkas, lineāru 9 peptīdu bibliotēkas, lineāru 10 peptīdu bibliotēkas, lineāru 15 peptīdu bibliotēkas, lineāru 12 peptīdu bibliotēkas, ciklisku 7 peptīdu bibliotēkas un citas peptīdu bibliotēkas, bibliotēku daudzveidība, ievietošanas ātrums, pozitīvais ātrums var sasniegt vairāk nekā 90%, lai apmierinātu dažādu klientu dažādās vajadzības pēc fāgu displeja peptīdu bibliotēkām.
Fāgu displeja bibliotēkas tiek plaši izmantotas biomedicīnas pētījumos un pielietojumos. Piemēram, antivielu inženierijā un antivielu izstrādē fāgu displeja bibliotēkas var izmantot, lai pārbaudītu un uzlabotu antivielu variantus; zāļu skrīningā un zāļu mērķu atklāšanā fāgu displeja bibliotēkas var izmantot, lai meklētu olbaltumvielas vai peptīdus ar zāļu potenciālu. Vakcīnu pētījumos fāgu displeja bibliotēku var izmantot vakcīnu antigēnu atlasei un vakcīnu izstrādei. Turklāt fāgu displeja bibliotēkas var izmantot arī daudzās jomās, piemēram, olbaltumvielu mijiedarbības pētījumos, vēža diagnostikā un ārstēšanā.
Fāgu displeja tehnoloģija
Fāgu displeja tehnoloģija ir tehnoloģija, kas sapludina mērķa proteīna gēnu ar fāgu virsmas proteīna gēnu un, izmantojot gēnu ekspresiju, padara mērķa proteīnu uz fāgu virsmas esošu saplūšanas proteīna veidā. Šie uz fāgu virsmas attēlotie proteīni var saglabāt relatīvu telpisko struktūru un bioloģisko aktivitāti, un tos var pārbaudīt, noteikt un atpazīt, mijiedarbojoties ar specifiskām antivielām vai citām molekulām. Fāgu displeja tehnoloģijas attēlošanas objekti ietver antivielas, antivielu fragmentus, peptīdu segmentus, kDNS utt.
Fāgu displeja tehnoloģijas sistēma galvenokārt ietver M13 fāgu displeja sistēmu (piemēram, PⅢ displeja sistēmu, PⅧ displeja sistēmu utt.), λ fāgu displeja sistēmu, T4 fāgu displeja sistēmu, T7 fāgu displeja sistēmu utt. Katrai no šīm sistēmām ir savas īpašības, un tā ir piemērota dažādām pētniecības vajadzībām. M13 fāgs, pateicoties savām lizogēnajām īpašībām, pēc inficēšanas nelizē saimniekšūnu, kas ļauj tam nepārtraukti replicēties un ekspresēt svešus fragmentus saimniekšūnā, kas ir piemērots ilgstošai skrīningam un stabilai ekspresijai. Īsā dzīves cikla un augstās replikācijas efektivitātes dēļ T7 fāgs var ātri radīt lielu skaitu pēcnācēju fāgu, kas ir piemērots augstas caurlaidības skrīningam un ātrai ekspresijai.
| M13 fāgs | T7 fāgs | |
|---|---|---|
| 1. Morfoloģiskā struktūra | Filamentozs fāgs | Daudzslāņu fāgs |
| 2. Ģenētiskais materiāls | Apļveida vienpavedienu DNS molekula | Lineāra, divpavedienu, termināli lieka DNS |
| 3. Replikācija un inficēšanās | Lizogēnās fāgas, kas saliktas periplazmā, var tikt izdalītas no baktēriju membrānām, nelizējot saimniekšūnas. | Virulentās fāgas, baktēriju citoplazmā salikto fāgu pēcnācēji, tiek atbrīvotas ar šūnu membrānas līzi. |
| 4. Displeja sistēma | Izmantojot pIII un PVIII kapsīdu proteīnus, tika konstruēta displeja sistēma, kas piemērota dažāda izmēra svešu peptīdu/proteīnu attēlošanai. | Displeja sistēma ir konstruēta ar 10B kapsīda proteīnu, kam nav nepieciešams sekrēcijas process un kas ir piemērots peptīdu/proteīnu, kuriem ir inhibējoša ietekme uz sekrēcijas procesu, attēlošanai. |
| 5. Lietojumprogrammas priekšrocība | Tas ir piemērots mazu molekulu peptīdu attēlošanai un ilgtermiņa skrīningam. | Tam ir priekšrocības makromolekulāro olbaltumvielu ātrā ekspresijā un augstas caurlaidības skrīningā. |
Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas veidi
Uzņēmumam “Alpha Lifetech” ir pieredze fāgu displeja peptīdu bibliotēku veidošanā un skrīningā, un tas piedāvā dažādus peptīdu bibliotēku veidus, no kuriem izvēlēties. Atkarībā no peptīda garuma to var iedalīt 7 peptīdu bibliotēkās, 9 peptīdu bibliotēkās, 10 peptīdu bibliotēkās, 12 peptīdu bibliotēkās un 15 peptīdu bibliotēkās. Atkarībā no polipeptīdu telpiskās konformācijas to var iedalīt lineārā fāgu peptīdu bibliotēkā un cikliskā fāgu peptīdu bibliotēkā.
Lineārā fāgu peptīdu bibliotēka
Peptīda gēns tiek ievietots fāga genoma apvalka proteīna kodēšanas reģionā, parasti pIII vai PVIII, un tiek attēlots kā lineāra taisna ķēde. Lineāras lineāras ķēdes peptīdi var viegli noārdīties in vivo, un to saistīšanās spēja un stabilitāte var tikt ietekmēta.
cikliskā fāga peptīdu bibliotēka
Modificētais gredzena peptīds disulfīda saišu vai citu saistīšanās saišu iedarbībā veidos fiksētu konformāciju, kas ne tikai ievērojami uzlabos vielmaiņas stabilitāti un biopieejamību, bet arī labāk atbildīs receptoru-ligandu (antivielu-antigēnu) konformācijas saistīšanās prasībām.
Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas process
Fāgu atlase
Par nesējiem parasti tiek izvēlēti M13 tipa fāgi vai T7 tipa fāgi.
fāgu displeja peptīdu bibliotēkas izveide
Izveidot fāgu vektoru, kas spēj saturēt svešu olbaltumvielu vai polipeptīdu kodējošo secību, kas parasti ietver promotoru, selektīvos marķierus un atbilstošus regulējošus elementus. Svešas olbaltumvielas vai peptīda kodējošās secības ievietošana fāgu nesējā, parasti izmantojot restrikcijas enzīmu griešanas un ligācijas metodes. Izveidotais fāgu vektors tiek transformēts saimniekšūnā, ļaujot fāgam replicēties un ekspresēt svešas olbaltumvielas vai peptīdus šūnā. Fāgu bibliotēkas, kas satur vairākus dažādus svešas olbaltumvielas vai peptīdus, tiek sagatavotas, izmantojot plašu transformāciju un amplifikāciju.
fāgu displeja peptīdu bibliotēkas skrīnings
Fiksējiet mērķa molekulas (piemēram, olbaltumvielas, receptorus vai antivielas) uz cietfāzes nesēja. Inkubējiet konstruēto fāgu displeja peptīdu bibliotēku ar fiksētu mērķi, lai ļautu peptīdiem uz fāga saistīties ar mērķa molekulu. Šī procesa laikā nesaistītie bakteriofāgi tiek atdalīti, mazgājot, vienlaikus saglabājot bakteriofāgus, kas saistās ar mērķi, un augstas afinitātes saistītie bakteriofāgi tiek eluēti. Atgūtie bakteriofāgi tiek amplificēti, inficējot Escherichia coli, un pēc tam pakļauti nākamajai skrīninga kārtai. Parasti ir nepieciešamas 3–5 skrīninga kārtas, lai iegūtu peptīdus ar augstu saistīšanās efektivitāti.
Peptīdu dizains un sintēze
Sintezē peptīdus, pamatojoties uz skrīninga vietām.

1. attēls. Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas konstruēšana un skrīninga process

Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas būvniecības platforma
Alpha Lifetech piedāvā vairākas peptīdu bibliotēku veidošanas tehnoloģijas. Mēs galvenokārt piedāvājam T7 peptīdu bibliotēku veidošanas pakalpojumus un M13 peptīdu bibliotēku veidošanas pakalpojumus atbilstoši fāgu tipiem.
LASĪT VAIRĀK
Fāgu displeja peptīdu bibliotēkas skrīninga platforma
Uzņēmumam “Alpha Lifetech” ir bagāta pieredze peptīdu fāgu bibliotēku skrīningā, nodrošinot spēcīgu tehnisko atbalstu mazo molekulu zāļu atklāšanai, klīniskajai diagnostikai, slimību ārstēšanai un bioloģiskajiem pētījumiem.
LASĪT VAIRĀK Ja jums ir kādi jautājumi, lūdzu, sazinieties ar mums jebkurā laikā.
Leave Your Message
0102





