Fāgu displeja sistēma
Uzņēmums Alpha Lifetech jau daudzus gadus ir dziļi iesaistījies fāgu displeja tehnoloģijā. Alpha Lifetech ir izveidojis perfektu, stabilu fāgu displeja tehnoloģijas platformu, kas ietaupa laiku zinātniskajiem pētījumiem vai projektu pētījumiem un atvieglo sekojošu ražošanu. Mums ir pieejamas vairākas fāgu displeja sistēmas, no kurām izvēlēties, tostarp M13 fāgu, T7 fāgu, T4 fāgu un λ fāgu displeja sistēmas. Atkarībā no jūsu eksperimentālajām vajadzībām jūs varat izvēlēties atbilstošu fāgu displeja sistēmu. Alpha Lifetech var sniegt arī tādus pakalpojumus kā vhh antivielu ražošana, scfv antivielu ražošana un Fab antivielu ražošana.
Ievads fāgu displejā
Fāgu displeja tehnoloģija ir metode, kurā fāgi (vīrusi, kas inficē baktērijas) tiek izmantoti, lai meklētu specifisku olbaltumvielu vai peptīdu funkcionālās saistošās molekulas. Fāgu antivielu bibliotēkas konstruēšanas metodes ietver Fab antivielu antivielu bibliotēkas konstruēšanu, scFv antivielu bibliotēkas konstruēšanu, vhh antivielu bibliotēkas konstruēšanu utt. Atkarībā no bakteriofāgu veida tos var iedalīt bakteriofāgos m13, T7 bakteriofāgos, T4 bakteriofāgos, λ bakteriofāgos un citos bakteriofāgos. Atkarībā no bibliotēkas veida to var iedalīt nejaušo peptīdu bibliotēkā, kDNS bibliotēkā, antivielu bibliotēkā un olbaltumvielu bibliotēkā. Fāgu displeja tehnoloģija ir vienkārši lietojama un lēta, un tā ietver Fab fāgu displeju, scfv fāgu displeju, vhh fāgu displeju. Tomēr šī metode ierobežo molekulārās ģenētikas daudzveidību bibliotēkā, jo tā nevar ekspresēt pārāk garas sekvences.
Fāgu displeja tehnoloģija spēj izveidot fizisku saikni starp attēloto molekulu un DNS secību, kas kodē attēloto molekulu, un konkrēta konjugāta aminoskābju secību var noteikt acumirklī, veicot vēlamā fragmenta DNS sekvencēšanu fāgu genomā.
Pašlaik plaši tiek izmantota fāgu displeja tehnoloģija. Starp tām ir ievērojami sasniegumi jaunu vakcīnu (lētu un efektīvu sintētisko vakcīnu) izpētē un izstrādē, antivielu zāļu (skrīninga enzīmu inhibitoru) izstrādē, šūnu signālu pārraidē (simulētu epitopu skrīnings) un antigēnu epitopu izpētē (monoklonālo antivielu sagatavošana).
Fāgu displeja princips
Fāgu displeji ir molekulāra tehnoloģija, kuras pamatā ir fāgu DNS ģenētiska modifikācija, kas saista mērķa fragmentu ar fāgu apvalka proteīnu un tādējādi to ekspresē uz fāga virsmas. Svešā DNS sekvence tiek ievadīta noteiktā vietā fāgu genoma nukleotīdu secībā, kas kodē fāgu apvalka proteīnu (1. att.).
Kad notiek fāga infekcija, fāga gēns sāk ekspresēties baktēriju saimniekorganismā, un ievietotais mērķa fragments tiek parādīts uz fāga virsmas kā saistītā gēna, kas kodē apvalka proteīnu, un klonētās secības kombinācija.

1. att. Bakteriofāga M13 viriona arhitektūra un fāgu displeja tehnoloģijas princips.(Atsauces avots: Fāgu displejs un citas peptīdu displeja tehnoloģijas | FEMS mikrobioloģijas apskati | Oxford Academic (oup.com))
fāgu displeja sistēmas
Filamentārie fāgi ir visbiežāk izmantotā fāgu displeja sistēma, un fāgu displeja sistēmas var konstruēt, izmantojot citus fāgus. Šādas sistēmas var efektīvāk attēlot relatīvi lielus peptīdus vai pārbaudīt kDNS bibliotēkas nekā uz filamentāriem fāgiem balstītas sistēmas.

2. att. Bakteriofāgu veidi, ko izmanto fāgu displejā.(Atsauces avots: Fāgu displejs un citas peptīdu displeja tehnoloģijas | FEMS mikrobioloģijas apskati | Oxford Academic (oup.com))
Fāgu displeja sistēmas priekšrocība
Fāgu displeja sistēmās parasti tiek izmantoti pavedienveida fāgi, tostarp M13, fd un f1. Salīdzinot ar M13 fāgiem, T7 bakteriofāgu fāgi sastāv no divpavedienu DNS, kam ir lielāka stabilitāte un kas replikācijas laikā ir mazāk pakļauts mutācijām. T7 fāgs kā nesējs ātri aug un var veidot plāksnes 3 stundu laikā, kas ietaupa daudz laika klonēšanai un skrīningam.
T7 fāgu bibliotēkas veidošana ir izmantota virsmas un nevirsmas gēnu ekspresijai, kā arī peptīdu, kDNS, genoma DNS un antivielu displeja bibliotēku veidošanai. Tas ļauj T7 fāgu izmantot ne tikai kā pretmikrobu līdzekli, bet arī zāļu mērķu skrīningam orgānu mērķu skrīningā (piemēram, smadzenēs, aknās un plaušās), antivielu atpazīšanas mērķu skrīningā, fizioloģisko mehānismu pētījumos utt. To var izmantot arī dažādu slimību diagnosticēšanai un ārstēšanai.
Citas bakteriofāgu formas
Selektīvi infekciozs fāgs
Atšķirībā no tradicionālās fāgu displeja, selektīvais infekciozais fāgs (SIP) saista ražošanas olbaltumvielu-ligandu mijiedarbību tieši ar fāgu infekciju un paplašināšanos, neizmantojot eluēšanas soļus.

3. att. Selektīvi infekciozais fāgs (SIP).(Atsauces avots: Fāgu displejs un citas peptīdu displeja tehnoloģijas | FEMS mikrobioloģijas apskati | Oxford Academic (oup.com))
Ainavu fāgi
Ainavu fāgus izraisa tūkstošiem svešu peptīdu kopiju, kas izvietotas ap cauruļveida kapsīdiem īpaši cieši atkārtojošos modeļos, un polivalentais attēlojums ainavu fāgos veicina augstas afinitātes selekciju, tāpēc nav iespējams atšķirt peptīdu ligandu augsto un zemo afinitāti.

4. att. Ainavu fāgu ideja. (Atsauces avots: Fāgu displejs un citas peptīdu displeja tehnoloģijas | FEMS mikrobioloģijas apskati | Oxford Academic (oup.com))


Vairākas fāgu displeja sistēmas
Klientiem pieejama M13 fāga, T7 fāga, T4 fāga, λ fāga displeja sistēma.


Augstas caurlaidspējas skrīninga iespējas
Mēs varam izmantot fāgu displeja sistēmas, lai ātri izveidotu liela mēroga fāgu bibliotēkas un sasniegtu augstas caurlaidības skrīninga eksperimentus.


Pielāgots fāgu displeja pakalpojums
Klienti var pielāgot visaptverošus pakalpojumus atbilstoši projekta prasībām, piemēram, augstas afinitātes antivielu skrīningu utt.


Plašs pielietojuma klāsts
Pielieto tādās jomās kā antivielu inženierija, peptīdu un olbaltumvielu inženierija, zāļu atklāšana un izstrāde, olbaltumvielu mijiedarbības pētījumi utt.
Ja jums ir kādi jautājumi, lūdzu, sazinieties ar mums jebkurā laikā.
Leave Your Message
0102







2018-07-16 

