scFv antivielu atklāšanas pakalpojums

Alpha Lifetech Inc.ar lepnumu piedāvā visaptverošus scFv bibliotēku izveides pakalpojumus, lai apmierinātu dažādu pasaules zinātnieku vajadzības. Mūsu mērķis ir izprast un apmierināt dažādu klientu prasības, kā arī palīdzēt risināt visas iespējamās un jaunās problēmas pētniecības darbā.

Kas ir scFv — vienas ķēdes mainīgā fragmenta antiviela?

Vienas ķēdes antiviela sastāv no antivielas mainīgā vieglā (VL) un smagā (VH) fragmenta, kas savienots ar elastīgu peptīdu saiti, ko var viegli ekspresēt funkcionālā formā uz fāga virsmas, un tāpēc to parasti sauc par vienas ķēdes mainīgo fragmentu (scFv). scFv fragments ir mazākā imūnglobulīna molekulas vienība (izņemot nanoķermeņus) ar antigēnu saistīšanas funkciju un ļauj ar olbaltumvielu inženierijas palīdzību uzlabot scFv (vienas ķēdes fragmenta mainīgā) īpašības, piemēram, afinitātes palielināšanu un specifiskuma maiņu. Uzņēmumā Alpha Lifetech Inc. scFv antivielas galvenokārt ir konstruētas no hibridomas, imunizētu peļu liesas šūnām un cilvēku B limfocītiem. Kopējā RNS jeb mRNS vispirms tiek izolēta no hibridomas, liesas, limfas šūnām un kaulu smadzeņu šūnām, kam seko reversā transkripcija kDNS, lai kalpotu par veidni antivielu gēnu amplifikācijai (PCR).

scFv antivielu izstrādes fāgu displeja tehnoloģija

Bibliotēkas daudzveidību nosaka neatkarīgo klonu skaits. Lai izveidotu liela izmēra scFv antivielu bibliotēku, mūsu zinātnieki izmantos mūsu patentēto divpakāpju stratēģiju bibliotēkas ģenerēšanai. Aprakstītās procedūras pirmajā posmā no PCR produktiem, kas kodē VH, Vκ un Vλ domēnus, tiek sagatavoti primārie repertuāri, iegūstot tipiskas vidēja lieluma bibliotēkas (1–100 miljoni klonu). Otrajā posmā VH (vai VL) fragmenti tiek izolēti, sagremojot no primārajiem repertuāriem attīrītu plazmīdu DNS, un klonēti akceptora fāgmīda vektorā, kas satur VL (vai VH) repertuārus. Šis jauninājums ievērojami palielina bibliotēku lielumu (10¹⁰-10¹²kloni).

Liela mēroga un augstas caurlaidības scFv antivielu skrīnings

Liela mēroga scFv sagatavošanai ir acīmredzams, ka ekspresijas saimnieka izvēlei būs būtiska ietekme uz procesa dizainu, tālākās apstrādes stratēģijām un procesa izmaksām. Ražošanas ceļa izvēle būs atkarīga no translācijas pēcapstrādes atbilstības un klīniskās izstrādes un ekonomikas laika grafika, kas būtībā ir atkarīgi arī no "saimnieka sistēmas". Nav universālas ekspresijas sistēmas, kas nodrošinātu augstu produkta ekspresijas līmeni plašam dažādu antivielu vai pat olbaltumvielu klāstam.