Ievads sintezēto antivielu bibliotēkās

Sintezētā antivielu bibliotēka, kas pazīstama arī kā De novo bibliotēka, ir sintētiska metode, kas izmanto tādas metodes kā DNS sintēze vai fāgu displejs, lai izstrādātu un sintezētu pilnīgus antivielu mainīgos reģionus, tostarp karkasa reģionus un CDR, nepaļaujoties uz naivām antivielu bibliotēkām.

Daļēji sintētisko antivielu bibliotēka ir izveidota, apvienojot dabā sastopamas antivielu bibliotēkas ar sintētisko daudzveidību. Tas parasti ietver DNS oligonukleotīdu sintezēšanu, lai iegūtu dažādu komplementāru noteicošo reģionu (CDR) kopumu, kas pēc tam tiek apvienots ar konstantu antivielu sistēmu, kas iegūta no dabīgiem avotiem, piemēram, cilvēka vai dzīvnieku B šūnām. Sintezētais CDR ievieš bibliotēkā daudzveidību, kā rezultātā antivielas ir vērstas pret plašu epitopu klāstu. Daļēji sintētisko antivielu bibliotēka nodrošina kompromisu starp imūnsistēmas dabisko daudzveidību un kontrolēto daudzveidību, kas panākta ar sintētiskām metodēm.

Atšķirība starp naivajām un sintētisko antivielu bibliotēkām ir atkarīga no imūnglobulīna gēnu avota. Tikmēr atšķirība starp daļēji sintezētu un sintezētu antivielu bibliotēku slēpjas tajā, ka pirmā sastāv no naivu antivielu segmentu daļas, piemēram, vieglās ķēdes vai smagās ķēdes, un tikai viens no tiem tiek sintezēts in vitro; savukārt sintezētais ir pilnībā iegūts no mākslīgas sintēzes ar PCR in vitro.

Alpha Lifetech var nodrošināt

Alpha Lifetech Inc.var piedāvāt daļēji sintezētu/sintezētu antivielu bibliotēku no dzīvniekiem un cilvēkiem, pamatojoties uz mūsu profesionālo antivielu atklāšanas platformu. Ar gadu pieredzi ģenētiskās modifikācijas un bibliotēku veidošanā var izveidot sintezētas bibliotēkas, kas spēj ražot sintētiskas antivielas ar afinitāti un specifiskumu, kas pārsniedz dabisko antivielu spējas.Alpha Lifetecheksperti ar lepnumu paziņo, ka mēs varam garantēt augstu panākumu līmeni antivielu bibliotēkas izveidē, kurā ir 10^8–10^10 neatkarīgi kloni.

Alpha Lifetech Inc.lepojas ar iespēju piedāvāt visaptverošus antivielu bibliotēku veidošanas pakalpojumus, lai apmierinātu dažādās globālo pētnieku vajadzības, tostarp scFv, Fab, VHH antivielas un pielāgotas bibliotēkas. Mūsu mērķis ir izprast un apmierināt dažādu klientu prasības un palīdzēt ar visām gaidāmajām un jaunām problēmām pētniecības darbā.

Sintezētu antivielu bibliotēku izveides pakalpojuma process

Dizains
Projektēšanas fāze ietver antivielu struktūru un komplementaritāti noteicošo reģionu (CDR) atlasi, pamatojoties uz esošajām antivielu sekvencēm vai strukturālajiem datiem. Sintētiskās CDR antivielas var arī izstrādāt, lai ieviestu specifiskas funkcijas vai uzlabotu saistīšanās īpašības.

Sintēze
Sintētiskā DNS, kas kodē izstrādātās antivielu sekvences, ieskaitot gan karkasa reģionus, gan CDR, tiek sintezēta, izmantojot ķīmiskas vai fermentatīvās metodes.

Montāža
Sintezētie DNS fragmenti tiek apkopoti antivielu ekspresijas vektoros, izmantojot tādas metodes kā PCR, ligēšana vai Gibsona montāža. Pēc tam šos vektorus var ievadīt ekspresijas sistēmās, piemēram, baktēriju, rauga vai zīdītāju šūnās antivielu ražošanai.

Skrīnings un atlase
Izveidotās antivielu bibliotēkas tiek pārbaudītas un atlasītas, lai noteiktu antivielas ar vēlamajām īpašībām, izmantojot augstas caurlaidības skrīninga metodes. Tas var ietvert tādas metodes kā fāgu displejs, rauga displejs vai ribosomu displejs atkarībā no bibliotēkas formāta un lietojumprogrammas.

Sintezēto antivielu bibliotēku būvniecības pakalpojums

Alpha Lifetech Inc.nodrošina klientiem vienas pieturas dizainu un sintezētu antivielu bibliotēku pakalpojumu, sasaistot smagās un vieglās ķēdes V-gēnu repertuārus fāga vektorā, izmantojot Cre-lox vietnei specifisko rekombinācijas sistēmu, lai izveidotu fāgā parādīto Fab repertuāru, kas ietver 6,5 × 10^10 klonus. Bibliotēka radīja Abs pret daudziem antigēniem, dažiem ar nanomolāru afinitāti. Cilvēka antivielu bibliotēkas ģenerēšana ir balstīta uz M13 fāga displeja tehnoloģiju (parādīts attēlā zemāk).