Ievads sintezēto antivielu bibliotēkās

Sintezēta antivielu bibliotēka, kas pazīstama arī kā De novo bibliotēka, ir sintētiska metode, kas izmanto tādas metodes kā DNS sintēze vai fāgu displejs, lai izstrādātu un sintezētu pilnīgus antivielu mainīgos reģionus, tostarp pamatreģionus un CDR, nepaļaujoties uz naivām antivielu bibliotēkām.

Pussintētiskā antivielu bibliotēka tiek veidota, apvienojot dabiski sastopamas antivielu bibliotēkas ar sintētisku daudzveidību. Tas parasti ietver DNS oligonukleotīdu sintezēšanu, lai iegūtu dažādu komplementāri noteicošo reģionu (CDR) komplektu, kurus pēc tam apvieno ar nemainīgu antivielu struktūru, kas iegūta no dabiskiem avotiem, piemēram, cilvēka vai dzīvnieku B šūnām. Sintezētais CDR ievieš bibliotēkā daudzveidību, kā rezultātā antivielas ir vērstas pret plašu epitopu klāstu. Pussintētiskā antivielu bibliotēka nodrošina kompromisu starp imūnsistēmas dabisko daudzveidību un kontrolēto daudzveidību, kas panākta ar sintētiskām metodēm.

Atšķirība starp naivajām un sintētiskajām antivielu bibliotēkām ir atkarīga no imūnglobulīnu gēnu avota. Tikmēr atšķirība starp daļēji sintezētu un sintezētu antivielu bibliotēku ir tāda, ka pirmā sastāv no daļas naivo antivielu segmentu, piemēram, vieglās ķēdes vai smagās ķēdes, un tikai viens no tiem tiek sintezēts in vitro; savukārt sintezētā bibliotēka ir pilnībā iegūta mākslīgas sintēzes rezultātā ar PCR in vitro.

Alpha Lifetech var nodrošināt

Alpha Lifetech Inc.Var piedāvāt daļēji sintezētu/sintezētu antivielu bibliotēku no dzīvniekiem un cilvēkiem, pamatojoties uz mūsu profesionālo antivielu atklāšanas platformu. Pateicoties daudzu gadu pieredzei ģenētiskajā modifikācijā un bibliotēku veidošanā, var izveidot sintezētas bibliotēkas, kas spēj radīt sintētiskas antivielas ar afinitāti un specifiskumu, kas pārsniedz dabisko antivielu spējas.Alpha LifetechEksperti ar lepnumu paziņo, ka varam garantēt augstu veiksmes līmeni antivielu bibliotēkas, kas satur 10^8–10^10 neatkarīgus klonus, izveidē.

Alpha Lifetech Inc.ar lepnumu piedāvā visaptverošus antivielu bibliotēku veidošanas pakalpojumus, lai apmierinātu pētnieku dažādās vajadzības visā pasaulē, tostarp scFv, Fab, VHH antivielas un pielāgotas bibliotēkas. Mūsu mērķis ir izprast un apmierināt dažādu klientu prasības, kā arī palīdzēt risināt visas iespējamās un jaunās problēmas pētniecības darbā.

Sintezētu antivielu bibliotēku izveides pakalpojuma process

Dizains
Projektēšanas fāze ietver antivielu karkasu un komplementaritāti noteicošo reģionu (CDR) izvēli, pamatojoties uz esošajām antivielu sekvencēm vai strukturālajiem datiem. Sintētiskās CDR antivielas var arī izstrādāt, lai ieviestu specifiskas funkcijas vai uzlabotu saistīšanās īpašības.

Sintēze
Sintētiskā DNS, kas kodē izstrādātās antivielu sekvences, tostarp gan karkasa reģionus, gan CDR, tiek sintezēta, izmantojot ķīmiskas vai fermentatīvas metodes.

Asambleja
Sintezētie DNS fragmenti tiek salikti antivielu ekspresijas vektoros, izmantojot tādas metodes kā PCR, ligācija vai Gibsona montāža. Šos vektorus pēc tam var ievadīt ekspresijas sistēmās, piemēram, baktēriju, rauga vai zīdītāju šūnās, antivielu ražošanai.

Atlase un atlase
Izveidotās antivielu bibliotēkas tiek pārbaudītas un atlasītas, lai noteiktu antivielas ar vēlamajām īpašībām, izmantojot augstas caurlaidības skrīninga metodes. Tas var ietvert tādas metodes kā fāgu displejs, rauga displejs vai ribosomu displejs atkarībā no bibliotēkas formāta un pielietojuma.

Sintezētu antivielu bibliotēku būvniecības pakalpojums

Alpha Lifetech Inc.nodrošina klientiem universālu antivielu bibliotēku izstrādes un sintezēšanas pakalpojumu, ligējot smagās un vieglās ķēdes V gēnu repertuārus fāgu vektorā, izmantojot Cre-lox vietnei specifisku rekombinācijas sistēmu, lai izveidotu Fab repertuāru, kas attēlots uz fāga, kas satur 6,5 × 10^10 klonus. Bibliotēka ieguva antivielas pret daudziem antigēniem, dažiem ar nanomolāru afinitāti. Cilvēka antivielu bibliotēkas ģenerēšana ir balstīta uz M13 fāgu displeja tehnoloģiju (parādīta attēlā zemāk).