Serivisy Famoronana Antikôra Monoklonal
Afaka manome faminaniana epitope, fananganana peptide, fanehoana proteinina, famokarana antibody polyclonal na monoclonal ary koa fanadiovana antibody avy amin'ny kolontsaina sela, tsiranoka ascites na serum manontolo ny Alpha Lifetech.
MIFANDRAISA AMINAYSerivisy Famoronana Antikôra Monoklonal
Alpha Lifetech Inc.dia afaka manome faminaniana epitope, fananganana peptide, fanehoana proteinina, famokarana antibody polyclonal, na monoklonal ary koa fanadiovana antibody avy amin'ny kolontsaina sela, tsiranoka ascites na serum manontolo.
Alpha Lifetech Inc.Za-draharaha amin'ny fanomezana tolotra sela isan-karazany azo antoka ho an'ny mpanjifa, anisan'izany ny sela hybridoma, ny sela fanitsiana genome, ny sela knockdown, ary ny sela overexpression. Miezaka manolotra tolotra sela manokana mandroso ho an'ny mpanjifa tsirairay izahay ary voaporofo sy azo itokisana ny tolotra atolotray.
Tetikady Fampandrosoana Antikôra
1. Famolavolana sy fanomanana ny antigène
Mety ho proteinina, peptide, na molekiola hafa ireo antigène ireo. Ny famolavolana immunogen dia mitaky fomba fiasa feno izay mampiditra fahalalana momba ny firafitry ny antigène, ny imunolojia ary ny rafitra fanaterana. Manana teknolojia famolavolana antigène ny Alpha Lifetech izay afaka mamolavola immunogen ho an'ny mpanjifa mila izany.
Manolotra vokatra proteinina recombinant ho an'ny mpanjifa ny Alpha Lifetech mba hisafidianana. Manana karazana rafitra fanehoana proteinina isan-karazany izahay, toy ny rafitra fanehoana E. coli, rafitra fanehoana leviora, rafitra fanehoana baculovirus-bibikely, rafitra fanehoana biby mampinono, sns., mba hamokarana ireo proteinina recombinant ilainao amin'ny fikarohana.
2. Famokarana biby
Afaka manome fiarovana amin'ny aretina ho an'ny mpanjifa ny Alpha Lifetech, ary misy biby fiarovana amin'ny aretina toy ny totozy, bitro, ondry, alpaca, kisoa ginea, hamster, sns. azonao isafidianana.
3. Fomba famokarana antibody monoklonal
●Famokarana Mabs amin'ny alàlan'ny teknolojia Hybridoma
Sela hybrida novokarin'ny fampifangaroana karazana sela roa ny Hybridoma, dia ny sela myeloma amin'ny totozy sy ny sela plasma (lymphocyte B), izay ahafahan'ny sela heterozygous mamokatra antikôra mitohy manohitra ny antikôra mahaliana in vitro. Ny famokarana sela hybridoma dia misy fizarana telo: ny famolavolana antikôra (hapten, molekiola kely, ary peptides), ny vaksiny biby, ny fampifangaroana sela, ary ny fitiliana clone tsara. Amin'ny fampiasana fomba fiasa vaksiny miavaka, dia mahazo fahombiazana avo lenta amin'ny fampifangaroana sela (1-10 hybridomas isaky ny sela B arivo) sy titers antibody avo lenta izahay, izay mampitombo ny tahan'ny fahombiazanay amin'ny fitsapana famakafakana manaraka izay ahitana ny fitiliana biochemika, ny fanadihadiana mifototra amin'ny sela in-vitro, ary ny fandalinana biby.
●Famokarana Mabs amin'ny alàlan'ny teknolojia fampisehoana phage
Ny fampisehoana phage dia manolotra fomba iray hafa hamokarana antikôra monoclonal. Ny lymphocytes B dia alaina avy amin'ny ran'ny biby ary alaina ny mRNA-ny. Amin'ny alàlan'ny PCR, ity mRNA ity dia ovaina ho cDNA, izay mampitombo ny fizarana VH sy VL rehetra. Ireo fizarana ireo dia avy eo dia atambatra ho vector, matetika amin'ny endrika singa miovaova rojo tokana (scFv), miaraka amin'ny proteinina PIII an'ny bacteriophage. Aorian'izay, ity rafitra ity dia ampiasaina mba hamindrana ny E. coli, ka miteraka tranomboky misy sela 10^10 eo ho eo amin'ny alàlan'ny fampidirana phage mpanampy. Avy eo ny E. coli dia afaka mamoaka ny bacteriophage izay mitahiry ny fizarana VH sy VL ho ampahany amin'ny fonony. Aorian'izany, ny fizarana VH sy VL manokana mikendry ny antigen mahaliana dia azo fidina ary ampiasaina hamerenana ny E. coli amin'ny bacteriophage. Avy eo dia atokana sy arahina ny filaharan'ny sela misy ny plasmid.
4. Fijerena ny fampifangaroana
●Fifangaroan'ny sela sy ny fifantenana
Avy eo dia ampiarahina amin'ny sela myeloma, izay sela homamiadana izay afaka miparitaka tsy misy fiafarany ao anaty kolontsaina, ireo sela B voaangona. Ny fampiraisana dia matetika tanterahina amin'ny alàlan'ny teknika toy ny fampiraisana polyethylene glycol (PEG).
Aorian'ny fampiraisana, dia ambolena ao anaty tontolo voafantina izay mamela ny hybridomas ihany ho velona ireo sela hybridoma. Matetika ny tontolo dia misy aminopterin, izay misoroka ny fitomboan'ny sela myeloma tsy mifamatotra.
●Fanaraha-maso sy fanidiana
Ireo sela hybridoma vokarina dia sivana mba hahitana ny famokarana antikôra manokana ho an'ny antigène kendrena. Izany dia matetika atao amin'ny fampiasana teknika toy ny enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), Western blot, immunoprecipitation, ary flow cytometry.
Rehefa fantatra ny sela hybridoma mamokatra ny antikôra, dia amboarina izy ireo mba hamoronana vondron'ny sela mitovy. Izany dia miantoka fa mitovy ny antikôra vokarin'ny sela hybridoma tsirairay.
5. Fanamarinana ny fiasan'ny Antikôra
Manome fanamarinana ny fiasan'ny antibody ny Alpha Lifetech, toy ny Western blotting, immunohistochemistry, na functional assays, mba hamantarana ny antibody monoclonal sy hanamafisana ny maha-manokana, ny fifandraisana ary ny fiasan'ny antibody.
6. Fanatsarana ny Antikôra
Fanadiovana ny hery fiarovana avy amin'ny supernatant kolontsaina amin'ny alalan'ny teknika toy ny chromatography proteinina A na proteinina G affinity, ary ny Alpha Lifetech dia afaka manome fomba fanovana ny hery fiarovana mba hanatsarana ny affinity an'ny hery fiarovana.
7. Famokarana antikora
Afaka manombana ireo antibody mety ho ampiasaina amin'ny fitiliana avo lenta sy amin'ny famokarana amin'ny ambaratonga lehibe ny Alpha Lifetech.
- 1
Ahoana no fisafidianana hybridoma fusion mety?
Mandritra ny fizotran'ny fampifangaroana, dia asiana fangaro mifangaro mifangaro 96-lavaka miisa 10-15. Ny takelaka tsirairay dia omena fitaovana fifantenana HAT-IMDM ary tehirizina ao anaty incubator gazy karbonika amin'ny mari-pana 37 degre Celsius. 9 - 14 andro aorian'ny fampifangaroana, dia andramana ny fisian'ny antibody manokana mahaliana ao anaty supernatants mifangaro.
- 2
Ahoana no hanatsarana ny fahombiazan'ny fifantenana?
Tsy mahomby 100% ny fampiraisana sela plasma amin'ny sela myeloma mitovy aminy. Na dia ao anatin'ny toe-javatra tsara indrindra sy ny fanentanana mahomby indrindra aza, ny fampiraisana sela dia mbola mamokatra fifangaroan'ny sela tsy mifangaro sy mifangaro izay mila sarahina. Mba hanatsarana ny fahombiazan'ny dingana fifantenana, ny sela myeloma ampiasaina amin'ny fampiraisana dia tsy manana HGPRT, anzima fototra amin'ny lalan'ny famonjena nucleotide. Avy eo dia novolena tao anaty tontolo HAT ilay fangaro, izay sela misy ny anzima HGPRT ihany, hybridomas izay nandova HGPRT avy amin'ny sela plasma, no velona.
- 3
Ahoana no fomba handinihana ny asan'ny antibody ao amin'ny sela hybridoma?
Dingana tena ilaina ny fanombanana ireo karazana hybride. Matetika, ny fitiliana ny supernatant hybridoma, clone, ary subclone dia atao amin'ny alàlan'ny enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), Western blot assay, ary fluorescence activated cell sorting (FACS). Hisafidy ny hanao ny fitiliana ny supernatant rehetra ao amin'ny laboratoara misy anay izahay.
- 4
Omeo toromarika amin'ny antsipiriany momba ny fomba fanaovana fitiliana ny asan'ny antibody?
Mety ho eo anelanelan'ny 500 sy 1.440 ny santionany azo avy amin'ny "hybridoma supernates" izay hotsapaina ary ho vonona hotsapaina amin'ny andro faha-9-14. Mety hipoitra ao anatin'ny telo ka hatramin'ny dimy andro izany na mety ho vonona avokoa amin'ny andro iray ihany, noho izany dia zava-dehibe ho an'ny laboratoara mpanjifa ny miomana herinandro maromaro mialoha amin'ny alalan'ny fitiliana faharoa manokana araka izay tiany.
- 5
Nahoana no mila atao subcloning ny hybridomas positive?
Rehefa hita fa tsara ny "Wells" nandritra ny fomba fitiliana ELISA voalohany, dia nafindra tany amin'ny toerana lehibe kokoa ny "hybridomes", izany hoe takelaka misy lavaka 24, ho fanomanana ny fomba "subcloning". Matetika ny "subcloning" ny "hybridomes" dia atao amin'ny alalan'ny fomba "limited dilution" mba hahazoana antoka fa voatokana ny "monoclones" marin-toerana. Ny teknika dia ahitana ny fanalefahana ny kolontsaina "hybridomes" ary ny fanaparitahana azy ireo any amin'ny takelaka misy lavaka 96 mba hahazoana "monoclonality" (sela iray isaky ny lavaka). Farafahakeliny, tokony hatao ny "limited dilutions" roa farafahakeliny mba hampihenana ny mety hisian'ny vondron'olona "hybridomes" mifangaro.
- 6
Inona avy ireo tombontsoa azo avy amin'ny fampiasana ny teknolojia hybridoma amin'ny fitadiavana antibody?
Noderaina noho ny fahafahany mamokatra hery fiarovana avo lenta, fitoniana ary fahaiza-manao manokana amin'ny fomba mahomby indrindra ny andian-sela hybride.
Serivisy famokarana antikora monoklonal amin'ny totozy
Afaka manome ny serivisy feno momba ny totozy hybridoma ho an'ny mpahay siansa manerantany ny Alpha Lifetech. Ireo serivisy ireo dia ahitana ny famolavolana/fananganana antigen, ny fanaovana vaksiny ny totozy, ny fampifangaroana sela, ary ny fisafidianana/toetran'ny hybridoma, izay ahafahantsika manokana amin'ny tetikasa tsirairay.
HAMAKY BEBE KOKOA
Serivisy famokarana antikora monoklonal bitro
Manana traikefa an-taonany maro eo amin'ny sehatry ny antibody ny Alpha Lifetech ary efa nanangana sehatra feno ho an'ny fampandrosoana antibody monoclonal bitro.
HAMAKY BEBE KOKOA
2018-07-16 
