Вовед во библиотеки за синтетизирани антитела

Библиотеката за синтетизирани антитела, позната и како De novo библиотека, е синтетички метод кој користи техники како синтеза на ДНК или прикажување на фаг за дизајнирање и синтеза на целосни променливи региони на антитела, вклучувајќи рамковни региони и CDR, без да се потпира на наивни библиотеки на антитела.

Полу-синтетичките библиотеки на антитела се создаваат со комбинирање на природни библиотеки на антитела со синтетичка разновидност. Обично вклучува синтетизирање на ДНК олигонуклеотиди за да се произведе збир на различни комплементарни одредувачки региони (CDRs), кои потоа се комбинираат со константна рамка на антитела добиена од природни извори како што се човечки или животински Б-клетки. Синтетизираниот CDR воведува разновидност во библиотеката, што резултира со антитела насочени кон широк опсег на епитопи. Библиотеката со полу-синтетички антитела обезбедува компромис помеѓу природната разновидност на имунолошкиот систем и контролираната разновидност постигната преку синтетички методи.

Разликата помеѓу наивни и синтетички библиотеки на антитела зависи од изворот на имуноглобулинските гени. Во меѓувреме, разликата помеѓу полу-синтетизираната и синтетизираната библиотека на антитела лежи во тоа што првата се состои од дел од наивни сегменти на антитела, како што е лесен ланец или тежок ланец, а само еден од нив се синтетизира ин витро; додека синтетизираниот е целосно изведен од вештачка синтеза со PCR in vitro.

Алфа Lifetech може да обезбеди

Alpha Lifetech Inc.може да понуди полу-синтетизирана/синтетизирана библиотека на антитела од животни и луѓе врз основа на нашата професионална платформа за откривање антитела. Со долгогодишно искуство во генетска модификација и изградба на библиотеки, може да се конструираат синтетизирани библиотеки кои се способни да произведат синтетички антитела со афинитет и специфичност над капацитетот на природните антитела.Alpha Lifetech'sекспертите со гордост објавуваат дека можеме да гарантираме висока стапка на успех во изградбата на библиотека за антитела која содржи 10^8 – 10^10 независни клонови.

Alpha Lifetech Inc.е горд што нуди сеопфатни услуги за изградба на библиотеки за антитела за да ги задоволи различните потреби на глобалните истражувачи, вклучувајќи scFv, Fab, VHH антитела и приспособени библиотеки. Нашата цел е да ги разбереме и исполниме барањата на различни клиенти и да помогнеме со какви било претстојни и појавни проблеми во истражувачката работа.

Процес на изградба на библиотеки за синтетизирани антитела

Дизајн
Фазата на дизајнирање вклучува избор на рамки на антитела и региони за одредување на комплементарноста (CDRs) врз основа на постоечките секвенци на антитела или структурни податоци. Синтетичките CDR антитела, исто така, можат да бидат дизајнирани да воведат специфични функционалности или да ги подобрат сврзувачките својства.

Синтеза
Синтетичката ДНК што ги кодира дизајнираните секвенци на антитела, вклучувајќи ги и рамковните региони и CDRs, се синтетизира со употреба на хемиски или ензимски методи.

Собрание
Синтетизираните ДНК фрагменти се составуваат во вектори за изразување на антитела користејќи техники како што се PCR, лигатура или склопување на Гибсон. Овие вектори потоа може да се воведат во експресивни системи како што се бактериски, квасец или клетки на цицачи за производство на антитела.

Скрининг и селекција
Конструираните библиотеки на антитела се проверуваат и се избираат за антитела со саканите својства со користење на методи на скрининг со висока пропусна моќ. Ова може да вклучува техники како што се прикажување на фаг, приказ на квасец или приказ на рибозом, во зависност од форматот и апликацијата на библиотеката.

Служба за изградба на библиотеки за синтетизирани антитела

Alpha Lifetech Inc.на клиентите им нуди едношалтерски дизајн и синтетизирана услуга на библиотеки на антитела со поврзување на репертоарите на V-генот со тешки и лесни ланци во фаг вектор користејќи го Cre-lox-специфичниот систем за рекомбинација на локацијата за да се создаде репертоар на Fabs прикажани на фагот кој содржи 6,5 × 10^10 клонови. Библиотеката даде Abs против бројни антигени, некои со наномоларни афинитети. Генерирањето на библиотеката за човечки антитела се заснова на технологијата за прикажување на фагот M13 (прикажано на сликата подолу).