Вовед во библиотеките на синтетизирани антитела

Библиотеката со синтетизирани антитела, позната и како библиотека De novo, е синтетички метод што користи техники како што се синтеза на ДНК или фажен дисплеј за дизајнирање и синтетизирање на комплетни варијабилни региони на антитела, вклучувајќи рамковни региони и CDR, без да се потпира на наивни библиотеки на антитела.

Полусинтетичката библиотека со антитела се создава со комбинирање на природно присутни библиотеки со антитела со синтетичка разновидност. Обично вклучува синтетизирање на ДНК олигонуклеотиди за да се произведе збир од различни комплементарни детерминантни региони (CDR), кои потоа се комбинираат со константна рамка на антитела добиени од природни извори како што се човечки или животински Б-клетки. Синтетизираниот CDR воведува разновидност во библиотеката, што резултира со антитела насочени кон широк спектар на епитопи. Полусинтетичката библиотека со антитела обезбедува компромис помеѓу природната разновидност на имунолошкиот систем и контролираната разновидност постигната преку синтетички методи.

Разликата помеѓу наивните и синтетичките библиотеки на антитела зависи од изворот на имуноглобулинските гени. Во меѓувреме, разликата помеѓу полусинтетизирана и синтетизирана библиотека на антитела лежи во тоа што првата се состои од дел од наивните сегменти на антитела, како што се лесни или тешки ланци, и само еден од нив се синтетизира in vitro; додека синтетизираната е целосно добиена од вештачка синтеза со PCR in vitro.

Алфа Лајфтек може да обезбеди

Алфа Лајфтек Инк.може да понуди полусинтетизирана/синтетизирана библиотека со антитела од животни и луѓе врз основа на нашата професионална платформа за откривање антитела. Со долгогодишно искуство во генетска модификација и изградба на библиотеки, може да се конструираат синтетизирани библиотеки кои се способни да произведат синтетички антитела со афинитет и специфичност што ги надминуваат капацитетите на природните антитела.Алфа ЛајфтекЕкспертите со гордост објавуваат дека можеме да гарантираме висока стапка на успех во изградбата на библиотека со антитела што содржи 10^8 – 10^10 независни клонови.

Алфа Лајфтек Инк.со гордост нуди сеопфатни услуги за изградба на библиотеки со антитела за да ги задоволи разновидните потреби на глобалните истражувачи, вклучувајќи scFv, Fab, VHH антитела и прилагодени библиотеки. Нашата цел е да ги разбереме и задоволиме барањата на различните клиенти и да помогнеме со сите претстојни и нови проблеми во истражувачката работа.

Процес на изградба на услуги за библиотеки со синтетизирани антитела

Дизајн
Фазата на дизајнирање вклучува избор на рамки на антитела и региони што ја одредуваат комплементарноста (CDR) врз основа на постоечки секвенци на антитела или структурни податоци. Синтетичките CDR антитела можат да бидат дизајнирани и за воведување специфични функционалности или подобрување на својствата на врзување.

Синтеза
Синтетичката ДНК што ги кодира дизајнираните секвенци на антитела, вклучувајќи ги и рамковните региони и CDR-ите, се синтетизира со употреба на хемиски или ензимски методи.

Собрание
Синтетизираните ДНК фрагменти се склопуваат во вектори за експресија на антитела со користење на техники како што се PCR, лигација или Гибсоново склопување. Овие вектори потоа можат да се воведат во системи за експресија како што се бактериски, квасни или цицачки клетки за производство на антитела.

Скрининг и селекција
Конструираните библиотеки со антитела се скенираат и селектираат за антитела со посакувани својства со користење на методи за скрининг со висок проток. Ова може да вклучува техники како што се фажен приказ, квасец или рибозомски приказ, во зависност од форматот и примената на библиотеката.

Служба за изградба на библиотеки со синтетизирани антитела

Алфа Лајфтек Инк.им обезбедува на клиентите дизајн на едно место и синтетизирана услуга на библиотеки со антитела со лигирање на репертоарите на V-гените со тежок и лесен ланец во фаг вектор користејќи го Cre-lox системот за рекомбинација специфичен за местото за да се создаде репертоар на Fab-ови прикажани на фаг кој содржи 6,5 × 10^10 клонови. Библиотеката даде Ab-ови против бројни антигени, некои со наномоларни афинитети. Генерирањето на библиотеката со човечки антитела се базира на технологијата за прикажување на фаг M13 (прикажана на сликата подолу).