Эсрэгбиеийг хүмүүнжүүлэх хөгжлийн платформ

Хүмүүнжүүлсэн эсрэгбие нь хүний дархлааны тогтолцооны хариу урвалыг хамгийн бага буюу огт үүсгэдэггүй. Танин мэдэхүйн зах зээлийн судалгаагаар дэлхийн эсрэгбиеийг хүмүүнжүүлэх зах зээлийн хэмжээ 2024 онд 92.5 сая ам.доллар бөгөөд 2024-2031 он хүртэл жилийн нийлмэл өсөлтийн хурд (CAGR) 13.00%-иар тэлэх болно. Alpha Lifetech нь боловсорч гүйцсэн эсрэгбиеийг хүмүүнжүүлэх платформтой бөгөөд хүнжүүлсэн эсрэгбиемүүдийн хувьд 98%-иас дээш амжилттай байна. Бид таны туршилтын хэрэгцээнд нийцүүлэн сонгох боломжтой CDR залгаас, SDR залгаас, гинжин хэлхээ, фагийн дэлгэц гэх мэт олон хүнжүүлэх стратегиудтай. Бид зөвхөн хулгана, туулай, альпака, тэмээ гэх мэт олон зүйлийн эсрэгбиемүүдийг хүнжүүлэхээс гадна scFv, Fab, nanobodies гэх мэт янз бүрийн хэлбэрийн эсрэгбиемүүдийг хүнжүүлэх боломжтой. Бидэнд хулганы моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх, химерийн эсрэгбие үйлдвэрлэх, эсрэгбиеийг хүнээр илэрхийлэх, цэвэршүүлэх, хүнжүүлсэн эсрэгбиеийн шинж чанар, шинжилгээ зэрэг эсрэгбие үйлдвэрлэх, цэвэршүүлэх, баталгаажуулах үйлчилгээ үзүүлэх мэргэжлийн техникийн ажилтнууд бий. Амжилтын өндөр хувьтай, өндөр цэвэршилттэй, дархлаа багатай тул бид хүнжүүлсэн эсрэгбие үйлдвэрлэхийг баталгаажуулдаг.

Эсрэг биетийг хүмүүнжүүлэх тухай танилцуулга

Моноклональ эсрэгбиеийн эмчилгээг аутоиммун өвчин, хорт хавдар болон бусад өвчнийг эмчлэхэд ашиглаж болно. Моноклональ эсрэгбие нь хулгана эсвэл бусад амьтдыг дархлаажуулах замаар үүсдэг. Моноклональ эсрэгбие үүсэх хожуу үе шатанд өвчнийг эмчлэхэд хэрэглэхэд хүний бус эсрэгбиемүүдийн иммуноген чанарыг үл тоомсорлож болохгүй. Хүнжүүлэх гол зарчим нь хүний бус тогтолцооны үлдэгдэл, тухайлбал, хэт хувьсагч нэмэлтийг тодорхойлох бүсүүд (CDRs)-ийг хүний тогтолцоонд нэгтгэж, дархлаа үүсгэхээс сэргийлж анхны эсрэгбиеийн шинж чанарыг хадгалах дарааллыг бий болгох явдал юм. Хулганы дархлаажуулалт, дараа нь хулганын дарааллыг хүнжүүлэх нь эмчилгээний эсрэгбиемийг илрүүлэх үндсэн хоёр арга зам хэвээр байгаа бөгөөд эдгээр нь хулганы эсрэгбие үүсэх, моноклональ эсрэгбиеийн химеризаци, химер хулганын хүний моноклональ эсрэгбие, бүрэн хүнжүүлсэн моноклональ эсрэгбиемийг хөгжүүлэх үйл явц зэрэг хэд хэдэн үе шатыг дамждаг. Одоогийн байдлаар судалгаанд голчлон трансген хулганууд (хүний В эсийн генийг хулганад шилжүүлэх), мөөгөнцрийн эсвэл фагийн дэлгэцийн технологи ашиглан өндөр үр дүнтэй скрининг, CDR залгаас (эцэг эхийн CDR-ийг хүний дараалалд оруулах), шилжүүлэн суулгах тусгай үлдэгдэл (SDR), хүрээ холих болон бусад аргууд багтдаг.

эсрэгбиеийг хүмүүн болгох - Alpha Lifetech

Зураг 1: Хулганы эсрэгбиемээс (ногоон домэйн) хүний бүрэн эсрэгбием хүртэлх эсрэгбиеийг хүнжүүлэх схемийн тойм.

Эсрэгбиеийг хүнжүүлэх стратеги

CDR залгаас

CDR залгаас нь рекомбинант ДНХ технологид суурилсан хөхтөн амьтдын экспрессийн системээр дамждаг бөгөөд үндсэн үе шатууд нь:

(1) Хулганад (эсвэл хүний бус эх сурвалжид) харгалзах эсрэгбиемүүдийг боловсруулж, ДНХ-ийн кодлогч эсрэгбиемүүдийг тусгаарлаж, дараалалд оруулах вектор болгон хувилах (эсвэл нэг эсийн дарааллыг шууд гүйцэтгэх).

(2) Эсрэгбиеийн CDR-д тохирох ДНХ-ийн дарааллыг тодорхойлох, зорилтот холболтын өвөрмөц байдлыг тодорхойлох;

(3) Хүний бус CDR-ийг шилжүүлэн суулгах хүний хүрээний бүсийг (FR) сонгож, шинэ эсрэгбие генийг бүтээх.

(4) Гүйлгээг тогтворжуулах, эцсийн хүмүүнжсэн эсрэгбиеийн бүтцийн нэгдмэл байдал, ойр дотно байдал алдагдахаас сэргийлэхийн тулд сэргээх мутаци үүсгэхийн тулд хүний бус CDR болон хүний FR хоорондын зөрчилдөөнд гурван хэмжээст дүн шинжилгээ хийнэ.

Зураг 2: Нэмэлт байдлыг тодорхойлох бүсийг (CDR) залгах схемийн тойм.

Хүрээг холих

Хүрээг холих нь фагийн дэлгэцийн технологи болон фагийн номын сангийн скрининг технологид тулгуурлан өндөр хамааралтай эсрэгбиемүүдийг олж авдаг. Хүний эсрэгбиеийн хүнд гинжин хэлхээг кодлодог олигонуклеотидуудыг загвар болгон ашигладаг, CDR бүсүүдийг праймер болгон кодлодог ба ПГУ-ын олшруулалтыг хийж, нэг судалтай ДНХ олж авахын тулд ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг денатурат болгодог. Стрептавидинаар цэвэршүүлсэн VL ба VH генийн нэг судалтай ДНХ-ийг T4 ДНХ-ийн лигаза болон хязгаарлалтын фермент ашиглан векторууд дээр сэргээж, бактериофагуудад өсгөвөрлөж, бактериофагуудаар олшруулж, фагийн дэлгэцийн номын сан байгуулна. Харгалзах эсрэгтөрөгч бүхий гурван удаагийн скрининг хийж, эерэг клоныг ELISA болон бусад аргуудыг ашиглан эцэст нь баталгаажуулдаг.

Зураг 3: Нэмэлт байдлыг тодорхойлох бүс (CDR) залгаас ба хүрээний (FR) холих хүмүүнлэгжүүлэх стратегийн бүдүүвч зураглал. (A) CDR залгах үндсэн журам. (B) FR холих үндсэн үйл явц. (Лавлах эх сурвалж: Ван Ёнмэй нар, PD-1 хулганы эсрэгбиемийг хүнжүүлэхэд "хүрээ холих" ба "CDR залгах" хоёрын харьцуулалт.)

Фагийн дэлгэц

Хүмүүнжүүлсэн эсрэгбие үйлдвэрлэх нь бактериофагийн гадаргуу дээр тусгай эсрэгбиемүүдийг харуулах аргад суурилдаг бөгөөд гол төлөв хүний эсрэгбиеийн фагийн сангуудаар бүтээгдсэн байдаг. Номын сангийн эх үүсвэр нь хүний захын цуснаас тусгаарлагдсан ТТБМС бөгөөд тэдгээрээс холбогдох дарааллыг шалгадаг. Энэ дараалал нь хүний бүрэн дараалалтай боловч үүссэн эсрэгбие нь scFv, Fab, nanobody зэрэг эсрэгбиеийн хэсгүүд юм.

Эсрэгбиеийг хүмүүнжүүлэх үйлчилгээний ажлын урсгал

Үйлчилгээний алхамууд	QC стандарт	Он цагийн хэлхээс
Эсрэгбие тусгаарлах	Цэвэр байдал >95%	1-2 долоо хоног
Дарааллын шинжилгээ	Хүний бус дарааллыг нарийн тодорхойлох	1 долоо хоног
CDR Grafting and Framework Grafting	Амжилттай нэгтгэх, илэрхийлэх	2-3 долоо хоног
Илэрхийлэл ба цэвэршүүлэх	Өндөр ургац, цэвэр байдал	2-3 долоо хоног
Функциональ баталгаажуулалт	Ойр дотно байдал ба өвөрмөц байдлын үнэлгээ	1 долоо хоног