Эсрэгбиеийн хүнлэгжүүлэлтийг хөгжүүлэх платформ

Хүнжүүлсэн эсрэгбие нь хүний дархлааны системээс хамгийн бага эсвэл огт хариу үйлдэл үзүүлдэггүй. Танин мэдэхүйн зах зээлийн судалгааны мэдээлснээр дэлхийн эсрэгбиеийн хүнжүүлэлтийн зах зээлийн хэмжээ 2024 онд 92.5 сая ам.доллар бөгөөд 2024 оноос 2031 он хүртэл жилийн нийлмэл өсөлтийн хурд (CAGR)-аар 13.00%-иар өсөх болно. Alpha Lifetech нь хүнжүүлсэн эсрэгбиеийн 98%-иас дээш амжилтын түвшинтэй боловсорсон эсрэгбиеийн хүнжүүлэлтийн платформтой. Бид таны туршилтын хэрэгцээнд нийцүүлэн сонгож болох CDR залгаас, SDR залгаас, гинжин хэлхээний холимог, фагийн дэлгэц гэх мэт олон хүнжүүлэлтийн стратегитай. Бид хулгана, туулай, альпака, тэмээ гэх мэт олон зүйлийн эсрэгбиеийг хүнжүүлээд зогсохгүй scFv, Fab, нанобие зэрэг янз бүрийн хэлбэрээр эсрэгбиеийг хүнжүүлж чадна. Бид хулганы моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх, химер эсрэгбие үйлдвэрлэх, хүнжүүлсэн эсрэгбие илэрхийлэх, цэвэршүүлэх, хүнжүүлсэн эсрэгбиеийн шинж чанар, шинжилгээ зэрэг эсрэгбие үйлдвэрлэх, цэвэршүүлэх, баталгаажуулах үйлчилгээ үзүүлэх мэргэжлийн техникийн ажилтнуудтай. Өндөр амжилтын түвшин, өндөр цэвэршилт, дархлааны бага чадвараараа бид хүнжүүлсэн эсрэгбие үйлдвэрлэхийг баталгаажуулдаг.

Эсрэгбиеийн хүнлэгжүүлэлтийн танилцуулга

Моноклональ эсрэгбиеийн эмчилгээг аутоиммун өвчин, хорт хавдар болон бусад өвчнийг эмчлэхэд ашиглаж болно. Моноклональ эсрэгбиеийг хулгана эсвэл бусад амьтдыг дархлаажуулах замаар үүсгэдэг. Моноклональ эсрэгбиеийн үйлдвэрлэлийн сүүлийн үе шатанд байгаа өвчнийг эмчлэхэд хүний бус эсрэгбиеийн дархлааны шинж чанарыг үл тоомсорлож болохгүй. Хүнжүүлэх гол зарчим бол хүний бус хүрээний үлдэгдэл, тухайлбал хэт хувьсах комплементарийг тодорхойлох бүс нутаг (CDRs)-ийг хүний хүрээнд нэгтгэх явдал бөгөөд дархлааны шинж чанарыг урьдчилан сэргийлэхийн зэрэгцээ анхны эсрэгбиеийн шинж чанарыг хадгалсан дарааллыг бий болгох явдал юм. Хулганы дархлаажуулалт болон дараагийн хулганы дарааллын хүнжүүлэх нь эмчилгээний эсрэгбиеийг илрүүлэх хоёр үндсэн зам хэвээр байгаа бөгөөд эдгээр нь голчлон хэд хэдэн үе шаттайгаар дамждаг: хулганы эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл, моноклональ эсрэгбиеийн химержилт, химер хулганы хүний моноклональ эсрэгбие, бүрэн хүнжүүлсэн моноклональ эсрэгбиеийн хөгжлийн үйл явц. Одоогийн байдлаар судалгаанд голчлон трансген хулганууд (хулганад хүний В эсийн генийг шилжүүлэх), мөөгөнцрийн эсвэл фагийн дэлгэцийн технологи ашиглан өндөр хүчин чадалтай скрининг хийх, CDR залгаас (эцэг эхийн CDR-ийг хүний дараалалд оруулах), шилжүүлэн суулгах өвөрмөц тодорхойлох үлдэгдэл (SDR), хүрээ солих болон бусад аргууд багтаж байна.

Зураг 1: Хулганы эсрэгбие (ногоон домэйн)-ээс бүрэн хүний эсрэгбие хүртэлх эсрэгбиеийн хүнчлэлийн схемийн тойм.

Эсрэг биетийг хүнжүүлэх стратеги

CDR залгаас

CDR залгаасыг рекомбинант ДНХ-ийн технологид суурилсан хөхтөн амьтдын экспрессийн системээр дамжуулан хийдэг бөгөөд түүний үндсэн үе шатууд нь:

(1) Хулганад (эсвэл хүний бус эх үүсвэрээс) харгалзах эсрэгбие боловсруулж, эсрэгбие кодчилдог ДНХ-г ялгаж аваад дарааллыг тогтоох (эсвэл нэг эсийн дарааллыг шууд гүйцэтгэх) вектор болгон клончилно.

(2) Эсрэгбиеийн CDR-тэй тохирох ДНХ-ийн дарааллыг тодорхойлох болон байны холболтын өвөрмөц байдлыг тодорхойлох;

(3) Хүний бус CDR-ийг шилжүүлэн суулгах хүний хүрээний бүсийг (FR) сонгож, шинэ эсрэгбиеийн генийг бүтээнэ үү.

(4) Хүний бус CDR болон хүний FR-ийн хоорондох зөрчлийн гурван хэмжээст шинжилгээг хийж, гогцоог тогтворжуулж, эцсийн хүнжүүлсэн эсрэгбиеийн хамаарал эсвэл бүтцийн бүрэн бүтэн байдал алдагдахаас урьдчилан сэргийлэх зорилгоор нөхөн сэргээх мутацийг бий болгоно.

Зураг 2: Нөхөн нөхөлтийг тодорхойлох бүс (CDR) залгалтын схемийн тойм.

Хүрээг солих

Хүрээ холих нь өндөр хамааралтай эсрэгбие авахын тулд фагийн дэлгэцийн технологи болон фагийн номын сангийн скрининг технологид суурилдаг. Хүний эсрэгбиеийн хүнд гинжин хүрээг кодчилдог олигонуклеотидуудыг загвар болгон ашиглаж, CDR бүсүүдийг праймер болгон кодчилдог бөгөөд нэг судалтай ДНХ авахын тулд ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг денатурацид оруулахын тулд ПГУ-ын олшруулалтыг хийдэг. Стрептавидинаар цэвэршүүлсэн VL ба VH генийн нэг судалтай ДНХ-ийг T4 ДНХ-ийн лигаза болон рестрикция ферментийг ашиглан векторууд дээр сэргээн босгож, бактериофагаар инкубацлаж, бактериофагаар олшруулж, фагийн дэлгэцийн номын санг байгуулдаг. Харгалзах эсрэгтөрөгчтэй гурван удаагийн скрининг хийж, эерэг клонуудыг эцэст нь ELISA болон бусад аргуудыг ашиглан баталгаажуулдаг.

Зураг 3: Нөхөн нөхөх чадварыг тодорхойлох бүс нутаг (CDR) залгаас болон хүрээ (FR) холих хүншүүлэх стратегийн бүдүүвч зураг. (A) CDR залгаасны үндсэн журам. (B) FR холих үндсэн үйл явц. (Лавлах эх сурвалж: Ван Ёнмэй нар, PD-1 хулганы эсрэгбиеийг хүнжүүлэхэд "хүрээг холих" болон "CDR залгаас"-ын харьцуулалт.)

Фагийн дэлгэц

Хүнжүүлсэн эсрэгбие үйлдвэрлэх нь бактериофагуудын гадаргуу дээр тодорхой эсрэгбие харуулах аргад суурилдаг бөгөөд голчлон хүний эсрэгбиеийн фагийн сангуудаар бүтээгдсэн байдаг. Сангийн эх үүсвэр нь хүний захын цуснаас тусгаарлагдсан фагийн сангууд бөгөөд тэдгээрээс харгалзах дарааллыг шалгадаг. Энэ дараалал нь хүний бүрэн дараалалтай боловч үүссэн эсрэгбие нь scFv, Fab, нанободи зэрэг эсрэгбиеийн хэлтэрхий юм.

Эсрэгбиеийн хүнжүүлэх үйлчилгээний ажлын урсгал

Үйлчилгээний алхамууд	Чанарын хяналтын стандарт	Цаг хугацааны шугам
Эсрэгбиеийн тусгаарлалт	Цэвэршилт >95%	1-2 долоо хоног
Дарааллын шинжилгээ	Хүнээс бусад дарааллыг нарийн тодорхойлох	1 долоо хоног
CDR залгаас болон хүрээ залгаас	Амжилттай интеграци ба илэрхийлэл	2-3 долоо хоног
Илэрхийлэл ба цэвэршилт	Өндөр ургац ба цэвэршилт	2-3 долоо хоног
Функциональ баталгаажуулалт	Хамаарал ба өвөрмөц байдлын үнэлгээ	1 долоо хоног