Аптамерын шинж чанарын шинжилгээний үйлчилгээ

Alpha Lifetech нь олон жилийн турш адаптертай холбоотой үйлчилгээ үзүүлж, адаптер хөгжүүлэлт болон шинжилгээний цогц үйлчилгээг санал болгож байна

ХОЛБОО БАРИХ

Аптамерын шинж чанарын шинжилгээний үйлчилгээ

Alpha Lifetech нь олон жилийн турш аптамертай холбоотой үйлчилгээ үзүүлж ирсэн бөгөөд одоогоор аптамерын синтез, SELEX скрининг, өндөр хүчин чадлын дараалал тогтоох, аптамерын оновчлол, шинж чанар зэрэг цогц аптамерын хөгжлийн схемийг санал болгож байна. Аптамерын скрининг хийх SELEX аргын давуу талууд дээр үндэслэн Alpha Lifetech нь аптамерын скрининг хийх илүү олон аргыг өргөжүүлсэн.

Аптамерын шинж чанарын шинжилгээний танилцуулга

Хамаарлын баталгаажуулалт

Аптамерын оновчтой хамаарлыг аппамер холбох шинжилгээний холбогдох аргуудаар баталгаажуулсан. Жишээ нь: Изотермаль титрлэлтийн калориметр (ITC), Урсгалын цитометр (FCM), Гадаргуугийн плазмоны резонанс (SPR), Микрофлюидик гэх мэт. Аптамерын хамаарлыг ихэвчлэн диссоциацийн тогтмол (KD) -аар илэрхийлдэг бөгөөд энэ нь буцаах урвал дахь молекулын диссоциацийн түвшинг тоон үзүүлэлтээр илэрхийлдэг физик хэмжигдэхүүн юм. KD утга бага байх тусам цогцолбор нь тогтвортой, өөрөөр хэлбэл хамаарал нь хүчтэй байдаг; Үүний эсрэгээр, KD утга их байх тусам цогцолбор нь тогтворгүй, хамаарал нь сул байдаг. Энэ алхам нь аппамерын гүйцэтгэлийг тодорхойлох түлхүүр бөгөөд аппамерын хамаарлын боловсорч гүйцэхийг баталгаажуулж, практик хэрэглээнд өндөр хамаарал, сонгомол чанартайгаар зорилтот молекултай холбогдож чаддаг.

Зураг 1 Аптамерын хамаарлын боловсорч гүйцэх үйл явц. Лавлах эх сурвалж:Кингхорн AB, Фрейзер LA, 2017.

Функцийн баталгаажуулалт

Хамаарлын баталгаажуулалтаас гадна аптамерын үйл ажиллагааг баталгаажуулах шаардлагатай. Үүнд аптамерын тогтвортой байдал, өвөрмөц чанар, тодорхой орчинд бусад молекулуудтай харилцан үйлчлэлцэх байдлыг баталгаажуулах зэрэг орно. Функциональ баталгаажуулалтын үр дүн нь шинжлэх ухааны судалгаа, үйлдвэрлэлийн хэрэглээнд аптамерын үнэ цэнэд шууд нөлөөлнө.

Тодорхой баталгаажуулалт

Өрсөлдөөнт туршилт: Аптамерын тодорхой байтай холбогдох чадварыг бусад ижил төстэй байнуудын дэргэд үнэлдэг. Хэрэв аппамер нь бусад молекулуудын оролцоогүйгээр байн молекултай тусгайлан холбогдож чадвал энэ нь өндөр өвөрмөц чанартай болохыг илтгэнэ.

Хөндлөн урвалын туршилт: Аптамер нь зөвхөн тодорхой байтай холбогдож байгаа эсэхийг харахын тулд хэд хэдэн холбоотой эсвэл холбоогүй байтай холбогддог бөгөөд ингэснээр түүний өвөрмөц чанарыг баталгаажуулдаг.

Тогтвортой байдлын баталгаажуулалт

Нуклеазын задралын туршилт: Аптамеруудыг нуклеазын өөр өөр концентрацид өртүүлж, тэдгээрийн задралыг ажигласан. Өөр өөр цаг хугацааны цэгүүдэд задралын түвшинг харьцуулж үзвэл аптамерын нуклеазын задралын эсрэг чадварыг үнэлж болно.

Температур ба цаг хугацааны тогтвортой байдлын туршилт: Аптамерыг бүтцийн болон үйл ажиллагааны тогтвортой байдлыг ажиглахын тулд өөр өөр температур, цаг хугацааны нөхцөлд байрлуулсан. Энэ нь аппамерыг хадгалах, ашиглах оновчтой нөхцлийг тодорхойлоход тусалдаг.

Биологийн идэвхжилийн тодорхойлолт

Тохирох аргыг ихэвчлэн нуклейн хүчлийн аптамерын тодорхой хэрэглээний зорилгын дагуу сонгодог.

(1) Молекулын түвшний шинжилгээ: Аптамер нь бай молекултай нийлсний дараа үүссэн цогцолборыг илрүүлэх эсвэл аптамераас үүдэлтэй бай молекулын илэрхийлэлийн түвшний өөрчлөлтийг илрүүлэхийн тулд гель электрофорез, вестерн блот гэх мэт молекул биологийн аргуудыг ашиглана.

(2) Эсийн түвшний шинжилгээ: Эсийн өсгөврийн технологийг ашиглан аптамеруудыг зорилтот эсүүдтэй инкубацид оруулж, эсийн морфологи, тархалт, апоптоз зэрэг биологийн өөрчлөлтийг ажиглаж, аптамеруудын биологийн идэвхийг үнэлдэг.

(3) Амьтны загварын туршилт: Зохих амьтны загварт нуклейн хүчлийн аптамеруудыг тарилга эсвэл эмээр өгдөг бөгөөд амьтдын физиологийн үзүүлэлтүүд болон эмгэг өөрчлөлтийг ажиглаж, аптамеруудын биологийн идэвхжил болон аюулгүй байдлыг in vivo үнэлдэг.