Аптамерын шинж чанарын шинжилгээний үйлчилгээ

Alpha Lifetech нь олон жилийн турш адаптертай холбоотой үйлчилгээг үзүүлж, адаптер боловсруулах, дүн шинжилгээ хийх цогц үйлчилгээг санал болгож байна.

БИДЭНД ХОЛБОО БАРИХ

Аптамерын шинж чанарын шинжилгээний үйлчилгээ

Alpha Lifetech нь аптамертай холбоотой үйлчилгээг олон жилийн турш үзүүлж ирсэн бөгөөд одоогоор аптамерын синтез, SELEX скрининг, өндөр бүтээмжийн дараалал, аптамерын оновчлол, шинж чанар зэрэг аптамер хөгжүүлэх цогц схемүүдийг хангаж чадна. Аптамерыг илрүүлэх SELEX аргын давуу тал дээр үндэслэн Alpha Lifetech нь aptamer-ийг илрүүлэх илүү олон аргыг өргөжүүлсэн.

Аптамерын шинж чанарын шинжилгээний танилцуулга

Ойролцоох байдлын баталгаажуулалт

Аптамерын хамгийн оновчтой хамаарлыг аптамерыг холбох шинжилгээний холбогдох техникээр баталгаажуулсан. Жишээ нь: изотермийн титрлэлтийн калориметр (ITC), урсгалын цитометр (FCM) болон гадаргуугийн плазмын резонанс (SPR), бичил шингэн гэх мэт. Аптамерын хамаарлыг ихэвчлэн диссоциацийн тогтмол (KD) -аар илэрхийлдэг бөгөөд энэ нь буцах урвалын молекулын диссоциацийн түвшинг тодорхойлоход хэрэглэгддэг физик хэмжигдэхүүн юм. KD-ийн утга бага байх тусам цогцолбор илүү тогтвортой, өөрөөр хэлбэл ойр дотно байдал илүү хүчтэй болно; Үүний эсрэгээр, KD-ийн утга их байх тусам цогцолбор нь тогтворгүй, ойр дотно байдал нь сул болно. Энэ алхам нь аптамерын гүйцэтгэлийг тодорхойлох, аптамерын ойр дотно төлөвшилтийг хангах гол түлхүүр бөгөөд практик хэрэглээнд өндөр хамааралтай, сонгомол молекултай холбогдож чаддаг.

Зураг.1 Аптамерын ойрын төлөвшилтийн процесс. Лавлах эх сурвалж:Kinghorn AB, Fraser LA, 2017.

Функцийн баталгаажуулалт

Ойролцоох байдлыг шалгахаас гадна aptamer-ийн функцийг шалгах шаардлагатай. Үүнд аптамерын тогтвортой байдал, өвөрмөц байдал, тодорхой орчин дахь бусад молекулуудтай харилцан үйлчлэлийг шалгах зэрэг орно. Функциональ баталгаажуулалтын үр дүн нь шинжлэх ухааны судалгаа, үйлдвэрлэлийн хэрэглээнд aptamer-ийн үнэ цэнэд шууд нөлөөлнө.

Тусгай баталгаажуулалт

Өрсөлдөөнт туршилт: Аптамерын тодорхой зорилтод холбогдох чадварыг бусад ижил төстэй зорилтууд байгаа тохиолдолд үнэлдэг. Хэрэв аптамер нь бусад молекулуудын хөндлөнгийн оролцоогүйгээр зорилтот молекултай тусгайлан холбогдож чадвал энэ нь өндөр өвөрмөц шинж чанартай болохыг харуулж байна.

Хөндлөн урвалын туршилт: Аптамер нь зөвхөн тодорхой зорилтод холбогдож байгаа эсэхийг шалгахын тулд хэд хэдэн холбоотой эсвэл хамааралгүй зорилтуудтай холбогдож, түүний өвөрмөц байдлыг баталгаажуулдаг.

Тогтвортой байдлын баталгаажуулалт

Нуклеазын задралын туршилт: Аптамерууд нуклеазын янз бүрийн концентрацид өртөж, тэдгээрийн задрал ажиглагдсан. Янз бүрийн цаг хугацааны доройтлын зэргийг харьцуулах замаар аптамерын нуклеазын задралын эсрэг чадварыг үнэлж болно.

Температур ба цаг хугацааны тогтвортой байдлын туршилт: Аптамерын бүтцийн болон үйл ажиллагааны тогтвортой байдлыг ажиглахын тулд өөр өөр температур, цаг хугацааны нөхцөлд байрлуулсан. Энэ нь aptamer-ийн оновчтой хадгалах, ашиглах нөхцлийг тодорхойлоход тусална.

Биологийн идэвхийг тодорхойлох

Тохиромжтой аргыг ихэвчлэн нуклейн хүчлийн аптамерын тодорхой хэрэглээний зорилгын дагуу сонгодог.

(1) Молекулын түвшний туршилт: Аптамер нь зорилтот молекултай нийлсний дараа үүссэн цогцолборыг илрүүлэх, эсвэл аптамераас үүдэлтэй зорилтот молекулын илэрхийллийн түвшний өөрчлөлтийг илрүүлэхийн тулд гель электрофорез, Western blot гэх мэт молекул биологийн аргуудыг ашиглана.

(2) Эсийн түвшний шинжилгээ: Эсийн өсгөвөрлөх технологийг ашиглан аптамеруудыг зорилтот эсүүдтэй хамт өсгөвөрлөж, эсийн морфологи, пролифераци, апоптоз зэрэг биологийн өөрчлөлтийг ажиглаж, аптамеруудын биологийн идэвхийг үнэлдэг.

(3) Амьтны загварын туршилт: Амьтны тохиромжтой загварт нуклейн хүчлийн аптамерыг тарилга эсвэл эмийн аргаар тарьж, физиологийн үзүүлэлтүүд болон амьтдын эмгэг өөрчлөлтийг ажиглаж, aptamers-ийн биологийн идэвх, аюулгүй байдлыг in vivo байдлаар үнэлдэг.