Аптамер судалгааны үйлчилгээ
Үйлчлүүлэгчдийн янз бүрийн шинжилгээний хэрэгцээний дагуу Alpha Lifetech нь үйлчлүүлэгчдэд сонгох боломжтой олон төрлийн аптамер шинжилгээний стратегитай.
ХОЛБОО БАРИХ01
Аптамер судалгааны үйлчилгээ
Аптамерын танилцуулга
Аптамерууд нь нэг судалтай нуклеотидын хүчил (жишээлбэл, ДНХ эсвэл РНХ) молекулууд бөгөөд SELEX скрининг гэж нэрлэгддэг процессоор санамсаргүй байдлаар хуваарилагдсан дарааллаар синтетик олигонуклеотидын сангаас in vitro нөхцөлд шүүгддэг бөгөөд энэ нь давталтын сонголтын олон үе шатыг хамардаг. Alpha Lifetech-ийн эзэмшдэг аппамер хөгжүүлэх үйлчилгээний гол бүрэлдэхүүн хэсгүүдэд аптамерын сангийн бүтэц, аптамер SELEX скрининг, аптамер SELEX дараалал тогтоох, аптамерын дарааллын шинжилгээ болон бусад аптамерын шинжилгээ орно.
SELEX дараалал нь аптамер SELEX скрининг болон өндөр хүчин чадалтай дарааллыг хослуулдаг. Аптамер SELEX дарааллаар дамжуулан зорилтот хэсэгт холбогдсон аптамерын тодорхой дарааллыг үр дүнтэй тодорхойлж, дараа нь аптамерын дарааллын шинжилгээ болон хэрэглээнд зориулсан үндсэн өгөгдлийг өгөх боломжтой.
Аптамеруудыг шинжлэх ухааны судалгаа, өвчний эмчилгээ, биосенсорын бүтэц, анагаах ухааны нээлт, хүрээлэн буй орчны хяналт шинжилгээнд өргөн ашиглаж ирсэн. Гэсэн хэдий ч in vitro шинжилгээнд хамрагдсан олигонуклеотидын аптамерууд in vivo амархан задарч, тэр ч байтугай хоруу чанар үзүүлсэн. Тиймээс шинжилгээнд хамрагдсан аптамеруудыг оновчтой болгосны дараа аптамерын хөгжлийн амжилтыг үнэлэхийн тулд in vitro шинжилгээ хийх шаардлагатай. Үйлчлүүлэгчдийн өөр өөр шинжилгээний хэрэгцээнд нийцүүлэн Alpha Lifetech нь үйлчлүүлэгчдэд сонгох боломжтой олон төрлийн аптамер шинжилгээний стратегитай.
Зураг 1. Аптамерын шинжилгээний диаграмм. Лавлах эх сурвалж:Тевендран Р, Цитартан М. 2022. Аптамеруудын холбох хамаарлыг тооцоолох шинжилгээнүүд..
Аптамер судалгааны үйлчилгээний танилцуулга
Аптамерын тогтвортой байдлын шинжилгээ
Нуклеазын задралын туршилт
Аптамерыг тодорхой нөхцөлд янз бүрийн төрлийн нуклеаза (жишээлбэл, DNase, RNase гэх мэт)-тай инкубацлах замаар түүний задралын эсрэг чадварыг үнэлэхийн тулд түүний задралыг ажигладаг. Энэ нь практик хэрэглээнд аппамерын тогтвортой байдал, бат бөх чанарыг тодорхойлоход ашигтай юм.
Флуоресцент шошголох арга
Аптамерын тогтвортой байдлыг аппамер дээрх флуорофоруудыг тэмдэглэж, байтай холбогдохоос өмнө болон дараа флуоресценцийн дохионы өөрчлөлтийг ажиглах замаар шууд бусаар үнэлдэг. Жишээлбэл, аптамер байтай холбогдох үед түүний хэлбэр өөрчлөгдөж, флуоресценцийн дохио сайжирч эсвэл буурч болно.
Дулааны тогтвортой байдлын шинжилгээ
Аптамерын дулааны тогтвортой байдлыг түүний хайлах температурын өөрчлөлтийг (Tm утга) өөр өөр температурт хэмжих замаар үнэлдэг. Аптамерын хайлах температур өндөр байх тусам түүний дулааны тогтвортой байдал сайн байдаг.
Динамик тогтвортой байдлын шинжилгээ
Гадаргуугийн плазмон резонанс (SPR) болон бусад технологийг ашиглан аптамер болон байны хоорондох холболт болон салгах үйл явцыг бодит цаг хугацаанд хянах, динамик параметрүүдийг (холбох хурдны тогтмол, диссоциацийн хурдны тогтмол гэх мэт) олж авах, аптамер болон байны хоорондох харилцан үйлчлэлийн механизмыг цаашид ойлгох, түүний динамик тогтвортой байдлыг үнэлэхэд ашигласан.
Бүтцийн тогтвортой байдлын шинжилгээ
Аптамерын гурван хэмжээст бүтэц болон түүний бүтцийн тогтвортой байдлыг шинжлэхэд рентген талстографи, цөмийн соронзон резонанс (NMR) болон бусад бүтцийн биологийн аргуудыг ашигласан.
Аптамерын өвөрмөц шинжилгээ
Аптамер холбох шинжилгээ
Аффинитийг аппамер ба зорилтот молекулын хоорондох холболтын тогтмолыг, тухайлбал диссоциацийн тогтмол Kd-г хэмжихийн тулд аптамер холбох шинжилгээг ашиглан үнэлдэг. Kd утга бага байх нь илүү өндөр хамааралтай болохыг илтгэнэ. Аптамер холбох шинжилгээ нь өндөр холбох чадвартай эмийн нэр дэвшигчдийг тодруулж, дараа нь фармакодинамик болон фармакокинетикийн судалгааг хийж чадна.
Урвуу скрининг туршилт
Урвуу скрининг шинжилгээ нь олон тооны нэр дэвшигч молекулуудаас зорилтот бус молекулуудыг хурдан хасах скрининг арга юм. Урвуу скрининг нь энэ шинж чанар эсвэл функцгүй молекулуудыг хасах зорилготой юм. Урвуу скрининг хийх гол түлхүүр нь скрининг хийх явцад зорилтот бус молекулуудыг тодорхойлж, арилгах боломжийг олгодог зохих урвуу скрининг тэмдэглэгээ эсвэл нөхцлийг сонгох явдал юм. Энэхүү туршилтанд зорилтот бус молекулуудыг сонгох нь маш чухал юм. Сонгосон зорилтот бус молекулууд нь аппамер скрининг хийхэд саад учруулж болзошгүй бодисуудыг төлөөлж байгаа бөгөөд саад учруулж болзошгүй хүчин зүйлсийг аль болох бүрэн хамруулсан эсэхийг баталгаажуулах хэрэгтэй.
Өрсөлдөөнт дарангуйлах туршилт
Аптамер болон бай молекулын холболтын системд хэт их өрсөлдөгч (жишээлбэл, бай молекултай төстэй бүтэцтэй молекулууд) нэмснээр аптамер болон бай молекулын холболтын чадварын өөрчлөлт ажиглагддаг. Хэрэв аппамерын бай молекултай холбогдох чадвар мэдэгдэхүйц буурсан бол энэ нь аппамер өндөр өвөрмөц чанартай болохыг харуулж байна.
Зарим тохиолдолд өрсөлдөөнт дарангуйлах туршилтыг урвуу скрининг туршилтын нэг хэсэг эсвэл нэмэлт болгон ашиглаж болно. Жишээлбэл, эмийн скрининг процесст эмийн молекулын зорилтот уурагтай холбогдох чадварыг өрсөлдөөнт дарангуйлах туршилтаар үнэлж, дараа нь хэвийн эс эсвэл эд эсэд хэт хүчтэй холбогдсон нэгдлүүдийг зайлуулахын тулд урвуу скрининг туршилтыг ашиглаж болно.
Аптамерын цитотоксик чанарын шинжилгээ
Аптамерын цитотоксик чанарыг шинжлэх олон төрлийн туршилтын аргууд байдаг бөгөөд эдгээр нь эсийн амьдрах чадвар, тархалт эсвэл үйл ажиллагаанд аптамерын нөлөөг үнэлэх зорилготой юм.
| Арга зүй | Дэлгэрэнгүй танилцуулга | Давуу тал | Сул тал |
|---|---|---|---|
| MTT илрүүлэх арга | MTT шинжилгээ нь амьд эсийн митохондри дахь ферментийн идэвхжилд суурилсан арга юм. Амьд эсийн митохондри дахь сукцинатдегидрогеназа нь экзоген MTT-г усанд уусдаггүй хөх-нил ягаан өнгийн Формазаны талст болгон бууруулж, эсэд хадгалдаг бол үхсэн эсүүд ийм үүрэггүй. Эдгээр талстуудыг диметил сульфоксид (DMSO)-оор уусгаж, ферментийн тодорхой долгионы уртад (490 нм эсвэл 570 нм гэх мэт) шингээлтийг илрүүлэх нь амьд эсийн тоог шууд бусаар тусгаж, улмаар аптамерын цитотоксик чанарыг үнэлэх боломжтой. | Өндөр мэдрэмж, хэмнэлт ба тохь тух | Ажлын ачаалал ихтэй, органик уусгагч нь эсэд гэмтэл учруулж болзошгүй; Зөвхөн эцсийн туршилтын үр дүнг авах боломжтой бөгөөд цитотоксик чанарыг бүрэн харах боломжгүй. |
| CCK-8 илрүүлэх арга | Эсийн тооллогын хэрэгсэл-8 (CCK-8) нь өндөр мэдрэмжтэй, цацраг идэвхт бус колориметрийн илрүүлэх арга юм. CCK-8 нь амьд эсийн митохондрид дегидрогеназагаар багасгаж, усанд маш сайн уусдаг жүржийн метилзан түлш үүсгэдэг WST-8 агуулдаг. Үүссэн мезан будагч бодисын хэмжээ нь амьд эсийн тоотой шугаман хамааралтай бөгөөд амтамерын цитотоксик чанарыг үнэлэхийн тулд 450 нм долгионы уртад Мезан будагч бодисын гэрлийн шингээлтийн утгыг хэмжих замаар амьд эсийн тоог шууд бусаар тусгаж болно. | Энгийн ажиллагаа, эсийг угаах шаардлагагүй, хурдан илрүүлэлт, өргөн шугаман илрүүлэлтийн хүрээ, өндөр мэдрэмж, сайн давтагдах чадвар, бага цитотоксик нөлөөтэй | Урвалжны өндөр үнэ; Шингээлт буурсан нь амьд эсийн тоо буурсантай холбоотой юу эсвэл эсийн дегидрогеназын идэвхжил буурсантай холбоотой юу гэдгийг хэлэхэд заримдаа хэцүү байдаг. |
| LDH илрүүлэх арга | LDH (лактатдегидрогеназа) нь эсийн цитоплазмд тогтвортой байдаг фермент бөгөөд эсийн мембран гэмтсэн үед LDH эсийн гадуур ялгардаг. LDH нь сүүн хүчлийг катализжуулж пируват үүсгэж, INT (тетразолийн давс)-тай урвалд орж нил ягаан талст бодис үүсгэдэг. Тодорхой долгионы уртад (жишээлбэл, 490 нм) шингээлтийг хэмжсэнээр эсийн гэмтлийн зэргийг тусгаж, дараа нь аптамерын цитотоксик чанарыг үнэлж болно. | Энэ нь эсийн үхлийн түвшинг шууд тусгадаг бөгөөд эсэд бага гэмтэл учруулдаг бөгөөд цацраг идэвхт изотопын бохирдолгүй байдаг. | Инкубатороос эсийг байнга гаргах шаардлагатай тул үйл ажиллагаа нь илүү төвөгтэй байдаг; Зөвхөн эцсийн туршилтын үр дүнг авах боломжтой бөгөөд цитотоксик чанарыг бүрэн харах боломжгүй. |
| Бодит цагийн амьд эсийн дүрслэлийн шинжилгээ | Бодит цагийн амьд эсийн дүрслэлийн анализатор ашиглан багажийг инкубаторт байрлуулж, эсийн өсөлтийн мөчлөгийн бүх үйл явцыг бодит цаг хугацаанд ажиглаж, бүртгэсэн. Аптамеруудын цитотоксик чанарыг эсийн морфологийн өөрчлөлт болон өсөлтийн муруйг шинжилж үнэлж болно. Энэ арга нь эсийн өсөлтийн орчныг тогтвортой байлгахын зэрэгцээ цитотоксик үйл явцын видео болон тоон үр дүнг өгөх боломжтой. | Энэ нь цитотоксик процессыг бодит цаг хугацаанд хянах, устгахгүй дүрслэл хийх, эсийн хөндлөнгийн оролцоо болон гэмтлийг бууруулах боломжтой; Видео болон тоон үр дүнгүүд хоёулаа гүнзгий дүн шинжилгээ хийхэд бэлэн байна. | Тоног төхөөрөмжийн өртөг өндөр бөгөөд мэргэжлийн үйл ажиллагааны ур чадвар, өгөгдөл шинжлэх чадвар шаарддаг |
КАЧИ
Аптамер судалгааны үйлчилгээний давуу тал
Чанарын бүрэн хяналт
Илүү өндөр тогтвортой байдалтай оновчтой Аптамерууд
Эдийн засгийн хэмнэлттэй, үр ашигтай. Илүү өрсөлдөхүйц үнэ, илүү сайн үйлчилгээ
Цогц судалгааны газрууд болон олон судалгааны аргууд
Борлуулалтын өмнөх мэргэжлийн зөвлөгөө болон борлуулалтын дараах дэмжлэг үзүүлэх үйлчилгээ
Аптамер шинжилгээний арвин туршлагатай
Өндөр түвшний судалгаа, хөгжүүлэлтийн баг
Аптамертай холбоотой захиалгат үйлчилгээ
Хэрэв танд асуулт байвал бидэнтэй хэзээ ч холбогдоно уу.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102