Биспецифик эсрэгбиеийн хөгжлийн платформ

Альфа Лайфтек нь үйлчлүүлэгчдэдээ чанартай баталгаатай эсрэгбие илрүүлэх болон рекомбинант уургийн бүтээгдэхүүн, үйлчилгээг үзүүлэх боломжтой.

ХОЛБОО БАРИХ

Биспецифик эсрэгбиеийн хөгжлийн платформ

Альфа Лайфтек нь үйлчлүүлэгчдэд чанартай баталгаатай эсрэгбие илрүүлэх, рекомбинант уургийн бүтээгдэхүүн, үйлчилгээг үзүүлэх боломжтой. Бид өндөр үр ашигтай, хүчтэй өвөрмөц чанар, сайн тогтвортой байдалтай эсрэгбие бэлдэж чадна. Альфа Лайфтек нь туулай, хонь, тахиа, хулганы моноклональ эсрэгбие зэрэг янз бүрийн эх үүсвэрээс эсрэгбие цэвэршүүлэх үйлчилгээ, мөн Уураг A/G-ийн хамаарлыг цэвэршүүлэх үйлчилгээ, эсрэгбие ялгах, цэвэршүүлэх үйлчилгээг үзүүлэх боломжтой олон төрлийн эсрэгбие цэвэршүүлэх багаж хэрэгсэл, тоног төхөөрөмжтэй. Эсрэгбие илрүүлэх платформ, уургийн платформ гэх мэт цогц платформ системийн бүтцэд үндэслэн бид эсрэгбие үйлдвэрлэх дээд болон доод шатны үйлчилгээг хамарч, эсрэгбие бэлтгэх, биспецифик эсрэгбие цэвэршүүлэх, эсрэгбие ялгах, цэвэршүүлэх, эсрэгбиеийн дараалал тогтоох, эсрэгбие баталгаажуулах гэх мэт техникийн үйлчилгээг биспецифик эсрэгбиеийн эмчилгээнд ашиглаж болно.

Моноклональ эсрэгбие гэдэг нь антиген буюу эпитопын өндөр өвөрмөц чанартай ганц В эсийн үүсгэсэн иммуноглобулиныг хэлнэ. Моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэхийг анх хулганы эсрэгбие үйлдвэрлэхийн тулд гибридома технологийг ашиглан бэлтгэсэн. Тодруулбал, дархлаажуулсан хулгануудын дэлүүний эсийг хүн эсвэл хулганы миелома эсүүдтэй нэгтгэснээр тодорхой эсрэгбие ялгаруулдаг гибридома эсүүд үүсдэг. Үүссэн хулганы моноклональ эсрэгбиеийг голчлон амьтны судалгаа, цэвэршүүлэх үйлчилгээний дараа өвчний оношлогоонд ашигладаг. Гэсэн хэдий ч хүний бие гадны хулганы уургуудад дархлааны хариу урвал үүсгэдэг тул хулганы моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх клиник хэрэглээнд мэдэгдэхүйц хязгаарлалтууд байдаг. Хожим нь хүмүүс хулганаас моноклональ эсрэгбие бэлтгэхийн тулд "хүнжүүлэх" аргыг ашиглаж, дархлааны үүслийг бууруулахын тулд хулганы эсрэгбиеийг хүний иммуноглобулины тогтмол бүстэй болгохын тулд генийн инженерчлэлийн технологийг ашигласан. Энэ төрлийн эсрэгбиеийг мөн хүнжүүлсэн моноклональ эсрэгбие гэж нэрлэдэг. Үүнээс гадна, хүний эсийг ашиглан моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэхийг хүний бүхэл бүтэн моноклональ эсрэгбие бэлтгэх гэж нэрлэдэг. Моноклональ эсрэгбиеийг биоанагаахын болон клиник хэрэглээнд өргөн ашигладаг. Анагаах ухааны судалгаанд моноклональ эсрэгбиеийг дархлаа зохицуулагч болгон ашиглаж болох бөгөөд эмчилгээний моноклональ эсрэгбиеийг хорт хавдрын хими эмчилгээ, вирусын халдварыг эмчлэхэд ашиглаж болох бөгөөд моноклональ эсрэгбиеийн коньюгатуудыг боловсруулах ажлыг голчлон хорт хавдрын эмчилгээнд ашигладаг.

Хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн танилцуулга

1960 онд биспецифик эсрэгбиеийн тухай ойлголтыг санал болгосон. Биспецифик эсрэгбие буюу биспецифик моноклональ эсрэгбие нь генийн инженерчлэлийн технологийг ашиглан зохиомлоор нийлэгжүүлсэн эсрэгбие юм. Инженерчлэгдсэн хиймэл эсрэгбиеийн хувьд биспецифик эсрэгбие нь ихэвчлэн IgG дэд ангилалд багтдаг бөгөөд CD3 дэд нэгжийг чиглүүлсэн антиген холбох фрагмент агуулдаг. Биспецифик эсрэгбие нь хоёр өөр антиген эсвэл антигений хоёр өөр эпитопыг нэгэн зэрэг холбож, таньж чаддаг хоёр өвөрмөц антиген холбох цэгтэй байдаг. Моноклональ эсрэгбиетэй харьцуулахад биспецифик эсрэгбие нь нэмэлт өвөрмөц антиген холбох цэгтэй байдаг тул илүү хүчтэй өвөрмөц чанар, чиглүүлэх чадвартай бөгөөд энэ нь хавдрын эсийг илүү нарийвчлалтай чиглүүлж, зорилтот бус хоруу чанарыг бууруулдаг. Биспецифик эсрэгбие нь дархлааны эсийг элсүүлэх, дохиоллын замыг хаах, хавдрын эсийг шууд устгах зэрэг олон биологийн үүргийг нэгэн зэрэг гүйцэтгэж чаддаг. Эрт үеийн биспецифик эсрэгбиеийг голчлон химийн нэгдэл эсвэл эсийн нэгдэлээр бэлтгэсэн боловч санамсаргүй нэгдэл болон зорилтот нэгдлийг тусгаарлахад бэрхшээлтэй байдгаас болж энэ арга нь удаан ахицтай байж болох юм. Генийн инженерчлэлийн технологийн тасралтгүй хөгжлөөр knotts in hole (KIH), CrossMab, DVD Ig гэх мэт олон шинэ технологийн платформууд хөгжсөн. Эдгээр платформууд нь хүнд гинжин хэлхээний зөрүү зэрэг асуудлыг үр дүнтэй шийдэж, хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн жигд байдал, гарцыг сайжруулдаг.

Зураг 1 Хавдар судлалын клиник туршилтуудад биспецифик эсрэгбие (bsAbs)-ийн санал болгож буй үйлчлэх механизмын хялбаршуулсан схемийн тойм.(Зургийн эх сурвалж: Хавдар судлал болон клиник сорилтуудад биспецифик эсрэгбие ба эсрэгбиеийн бүтцийн тойм - ScienceDirect)

Хоёр өвөрмөц эсрэгбие үйлдвэрлэх технологи

Хоёр өвөрмөц эсрэгбие үйлдвэрлэх гол аргуудад химийн холболт, дөрвөн эх үүсвэртэй эрлийз, генийн инженерчлэлийн эсрэгбие бэлтгэх орно. Тэдгээрийн дотор химийн холболтын арга нь хоёр бүтэн IgG эсвэл хоёр F (ab ') 2 эсрэгбиеийн хэлтэрхийг фталимид, дитиоацилбензойны хүчил зэрэг химийн холболтын бодис ашиглан хоёр өвөрмөц эсрэгбие болгон холбодог. Энэ арга нь энгийн бөгөөд ажиллуулахад хялбар боловч антиген холбох цэгийг гэмтээж, эсрэгбиеийн идэвхийг бууруулж болзошгүй бөгөөд холболтын бодис нь өөрөө тодорхой хэмжээний хорт хавдар үүсгэх чадвартай байдаг. Дөрвөн эх үүсвэртэй эрлийз арга нь хоёр өөр эрлийз эсийн шугамаас соматик эсүүдийг нэгтгэж, харгалзах хулганы IgG-ийг илэрхийлэхэд суурилдаг. Генийн инженерчлэлийн технологийн тусламжтайгаар эсрэгбиеийг генетикийн хувьд өөрчилж, хоёр өвөрмөц эсрэгбие үүсгэж болно. Хоёр өөр моноклональ эсрэгбие байгуулж, хоёр эсрэгбиеийн Fab хэлтэрхий буюу хүнд гинжин ба хөнгөн гинжин хувьсах бүсийг тусад нь салгасан. Хөндлөн холболтын урвал эсвэл гинжин рекомбинацийн технологийн тусламжтайгаар хоёр хэлтэрхийг нэгтгэж хоёр өвөрмөц эсрэгбие үүсгэсэн. Генийн инженерчлэлийн технологийн нарийн төвөгтэй байдал харьцангуй өндөр боловч энэ нь одоогоор эсрэгбиеийн бүтэц, үйл ажиллагааг тохируулахын тулд биспецифик эсрэгбие үйлдвэрлэхэд хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг арга юм. Биспецифик эсрэгбиеийн загварыг хийхдээ эсрэгбиеийн хөндлөн урвалын зарчмыг ашиглаж болох боловч эсрэгбиеийн хөндлөн урвал нь өвөрмөц бус урвал үүсгэж болзошгүй тул биспецифик эсрэгбиеийн эмчилгээ гэх мэт биспецифик эсрэгбиеийн загварыг практикт хэрэглэхэд үүнийг сайтар авч үзэх болно.

Хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн цэвэршүүлэлт

Биспецифик эсрэгбиеийн цэвэршүүлэлт нь өндөр цэвэршилттэй зорилтот эсрэгбиеийг ялгаж, цэвэршүүлэх үйл явц юм. Зарим уусдаг хольцыг арилгахын тулд центрифуглэх болон гүн шүүлтүүр гэсэн хоёр аргыг ашигладаг. Зорилтот биспецифик эсрэгбиеийг эхлээд аффинит хроматографиар барьдаг. IgG-тэй төстэй биспецифик эсрэгбиеийн хувьд уургийн А аффинит хроматографийг ашигладаг бол IgG-тэй төстэй бус биспецифик эсрэгбиеийн хувьд хөнгөн гинжин хэлхээнд суурилсан аффинит хроматографийг ашиглаж болно. Үүний дараа эсрэгбиеийг тодорхой хугацаанд бага рН нөхцөлд инкубацилж, вирусын бүрхүүлийн гадаргуу дээрх уургийн бүтэц алдагдаж, улмаар эсийг халдварлуулах чадвараа алддаг. Хост эсийн уураг (HCP) зэрэг хольцыг цаашид арилгахын тулд завсрын гүн шүүлтүүрийг хийдэг. Эсрэгбиеийн цэвэршилтийг ион солилцооны хроматографи зэрэг аргуудаар сайжруулж, үлдэгдэл вирусыг нано шүүлтүүр эсвэл хэт шүүлтүүрийн аргаар зайлуулдаг. Эцэст нь дээжийг төвлөрүүлж, тохиромжтой найрлагын буферээр сольдог.

Биспецифик эсрэгбие үйлдвэрлэх үйлчилгээний ажлын урсгал

Алхамууд	Үйлчилгээний контент	Цаг хугацааны шугам
Генийн синтез	Рекомбинант эсрэгбиеийн ДНХ плазмидуудыг шинээр үүсгэх, дарааллын 3 хүртэлх өөр дизайны схемийг бий болгох	2-3 долоо хоног
Жижиг хэмжээний туршилт	Биспецифик эсрэгбиеийн уургуудын үйлдвэрлэл → Хөхтөн амьтдын эсийн шугамд бага хэмжээний экспресс → SDS-PAGE-ээр баталгаажуулах → ELISA-аар рекомбинант уургийн антигентэй холбох шинжилгээ → Клоныг эцэг эхийн эсрэгбиетэй харьцуулах	5-6 долоо хоног
Тодорхойлох	Эхний хоёр бүрэн урттай биспецифик эсрэгбиеийн илэрхийлэл → ELISA-аар холбох шинжилгээ → Хулганы эсрэгбиеээр танигдсан эсрэгбиеийн ELISA үнэлгээ	1 долоо хоног
Эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл	Том хэмжээний эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл	3-4 долоо хоног

Бидний давуу талууд

Бид эсрэгбие үйлдвэрлэх дээд болон доод шатны үйлчилгээг хамардаг бөгөөд эсрэгбие бэлтгэх, биспецифик эсрэгбие цэвэршүүлэх, эсрэгбие ялгах, цэвэршүүлэх, эсрэгбиеийн дараалал тогтоох, эсрэгбие баталгаажуулах гэх мэт техникийн үйлчилгээг биспецифик эсрэгбиеийн эмчилгээнд ашиглаж болно.

Өндөр илэрхийлэл

CHO эсүүд дэх уургийн өндөр экспресс.
Тогтвортой агуулах

37°C температурт ийлдсэнд 2 долоо хоногоос дээш хугацаагаар байлгана.
Уусалтын асуудал байхгүй

>30 мг/мл
Тогтвортой эсийн шугамууд

Олон тооны биспецифик эсрэгбиеийг баталгаажуулахын тулд хавдрын эсрэгтөрөгчтэй олон тогтвортой эсийн шугамыг боловсруулсан.