Хоёр өвөрмөц эсрэгбие хөгжүүлэх платформ

Альфа Lifetech нь үйлчлүүлэгчдэд чанарын баталгаатай эсрэгбие илрүүлэх, рекомбинант уургийн бүтээгдэхүүн, үйлчилгээгээр хангах боломжтой.

БИДЭНД ХОЛБОО БАРИХ

Хоёр өвөрмөц эсрэгбие хөгжүүлэх платформ

Альфа Lifetech нь үйлчлүүлэгчдэд чанарын баталгаатай эсрэгбие илрүүлэх, рекомбинант уургийн бүтээгдэхүүн, үйлчилгээгээр хангах боломжтой. Бид өндөр үр дүнтэй, хүчтэй өвөрмөц чанар, сайн тогтвортой байдал бүхий эсрэгбие бэлтгэж чадна. Alpha Lifetech нь туулай, хонь, тахиа, хулгана зэрэг янз бүрийн эх үүсвэрээс эсрэгбие цэвэршүүлэх үйлчилгээ үзүүлэх, мөн Protein A/G-тэй холбоотой цэвэршүүлэх үйлчилгээ, эсрэгбие ялгах, цэвэршүүлэх үйлчилгээ үзүүлэх олон төрлийн эсрэгбие цэвэршүүлэх хэрэгсэл, төхөөрөмжтэй. Эсрэгбие илрүүлэх платформ, уургийн платформ гэх мэт иж бүрэн платформын системд тулгуурлан бид эсрэгбие үйлдвэрлэх дээд ба доод урсгалын үйлчилгээг хамарч, эсрэгбие бэлтгэх, хоёр өвөрмөц эсрэгбие цэвэрлэх болон эсрэгбие ялгах, цэвэршүүлэх, эсрэгбиеийн дараалал тогтоох, эсрэгбие баталгаажуулах гэх мэт техникийн үйлчилгээг үзүүлж болно.

Моноклональ эсрэгбие нь эсрэгтөрөгч эсвэл эпитопын өвөрмөц шинж чанартай нэг В эсээс үүсдэг иммуноглобулиныг хэлдэг. Моноклональ эсрэгбиеийн үйлдвэрлэлийг анх гибридома технологийг ашиглан хулганы эсрэгбие үйлдвэрлэхэд бэлтгэсэн. Тодруулбал, дархлаажуулсан хулганын дэлүү эсийг хүн эсвэл хулганаас авсан миелома эсүүдтэй нийлүүлснээр тусгай эсрэгбие ялгаруулдаг эрлийз эсүүд үүсдэг. Хулганы үүсгэсэн моноклональ эсрэгбиемүүдийг голчлон амьтны судалгаа, цэвэршүүлэх үйлчилгээний дараа өвчнийг оношлоход ашигладаг. Гэсэн хэдий ч хүний бие нь харийн хулганы уургийн эсрэг дархлааны хариу урвал үүсгэдэг тул хулганын моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх эмнэлзүйн хэрэглээнд ихээхэн хязгаарлалт байдаг. Хожим нь хүмүүс хулганаас моноклональ эсрэгбие бэлтгэхийн тулд "хүмүүнчлэл"-ийг ашиглаж, генийн инженерчлэлийн технологийг ашиглан хулганын эсрэгбиемийг хүний иммуноглобулины тогтмол бүс нутагтай болгож, дархлаа үүсгэх чадварыг бууруулдаг. Энэ төрлийн эсрэгбиемийг хүнжүүлсэн моноклональ эсрэгбие гэж бас нэрлэдэг. Нэмж дурдахад хүний эсийг ашиглан моноклон эсрэгбие үүсгэхийг бүхэлд нь хүний моноклон эсрэгбиеийн бэлдмэл гэж нэрлэдэг. Моноклональ эсрэгбие нь биоанагаах ухаан, эмнэлзүйн хэрэглээнд өргөн хэрэглэгддэг. Анагаах ухааны судалгаанд моноклональ эсрэгбиеийг дархлаа тогтворжуулагч, эмчилгээний моноклональ эсрэгбиемийг хорт хавдрын хими эмчилгээ, вирусийн халдварын эмчилгээнд ашиглаж болох ба моноклональ эсрэгбиеийн коньюгатуудыг хөгжүүлэх нь хорт хавдрын эмчилгээнд голчлон ашиглагддаг.

Хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн танилцуулга

1960 онд хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн тухай ойлголтыг санал болгосон. Хоёр өвөрмөц эсрэгбие нь генийн инженерчлэлийн технологийг ашиглан зохиомлоор нийлэгжүүлсэн эсрэгбие юм. Зохион бүтээгдсэн хиймэл эсрэгбиеийн хувьд хоёр өвөрмөц эсрэгбие нь ихэвчлэн IgG дэд ангилалд багтдаг бөгөөд CD3 дэд нэгжийг чиглүүлдэг эсрэгтөрөгчтэй холбох фрагментийг агуулдаг. Хоёр өвөрмөц эсрэгбие нь хоёр өөр эсрэгтөрөгчийг нэгэн зэрэг холбож, таних чадвартай хоёр өвөрмөц эсрэгтөрөгчийг холбох газартай байдаг, эсвэл эсрэгтөрөгчийн хоёр өөр эпитоп. Моноклональ эсрэгбиетэй харьцуулахад хоёр өвөрмөц эсрэгбие нь нэмэлт тусгай эсрэгтөрөгчийг холбох газартай тул илүү хүчтэй өвөрмөц чанар, зорилтот чадвартай байдаг бөгөөд энэ нь хавдрын эсийг илүү нарийвчлалтай онилж, зорилтот хордлогыг бууруулдаг. Хоёр өвөрмөц эсрэгбие нь дархлааны эсийг элсүүлэх, дохионы замыг хаах, хавдрын эсийг шууд устгах зэрэг олон биологийн функцийг нэгэн зэрэг гүйцэтгэдэг. Эхний хоёр өвөрмөц эсрэгбие нь химийн нэгдэл эсвэл эсийн нэгдлээс болж бэлтгэгдсэн боловч санамсаргүй хослол, зорилтот хослолыг тусгаарлахад хүндрэлтэй байсан тул энэ арга нь удаан хөгжсөн байж магадгүй юм. Генийн инженерийн технологи тасралтгүй хөгжихийн хэрээр knots in holes (KIH), CrossMab, DVD Ig гэх мэт олон шинэ технологийн платформууд бий болсон. Эдгээр платформууд нь хүнд гинж, хөнгөн гинжний таарахгүй байдал зэрэг асуудлыг үр дүнтэй шийдэж, хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн жигд байдал, гарцыг сайжруулдаг.

Зураг 1 Хавдар судлалын эмнэлзүйн туршилтанд хоёр өвөрмөц эсрэгбие (bsAbs) -ын санал болгож буй үйл ажиллагааны механизмын хялбаршуулсан бүдүүвч тойм.(Зургийн эх сурвалж: Хавдар судлал, эмнэлзүйн сорилтууд дахь хоёр өвөрмөц эсрэгбие ба эсрэгбиеийн бүтцийн тойм - ScienceDirect)

Хоёр өвөрмөц эсрэгбие үйлдвэрлэх технологи

Хоёр өвөрмөц эсрэгбие үйлдвэрлэх үндсэн аргууд нь химийн нэгдэл, дөрвөн эхийн эрлийз, генийн инженерийн эсрэгбие бэлтгэх арга юм. Тэдгээрийн дотроос химийн холбох арга нь фталимид, дитиоацилбензойны хүчил зэрэг химийн холбох бодисуудыг ашиглан хоёр бүрэн бүтэн IgG эсвэл хоёр F (ab ') 2 эсрэгбиеийн хэсгүүдийг хоёр өвөрмөц эсрэгбие болгон холбодог. Энэ арга нь энгийн бөгөөд ажиллахад хялбар боловч эсрэгтөрөгчийг холбох газрыг гэмтээж, эсрэгбиеийн үйл ажиллагааг бууруулж, холбох бодис нь өөрөө тодорхой хэмжээний хорт хавдар үүсгэдэг. Дөрвөн эхийн гибридомын арга нь харгалзах хулганы IgG-ийг илэрхийлэхийн тулд хоёр өөр эрлийз эсийн шугамаас соматик эсийг нэгтгэхэд суурилдаг. Генийн инженерчлэлийн технологийн тусламжтайгаар эсрэгбиемүүдийг генетикийн хувьд өөрчилж, хоёр өвөрмөц эсрэгбие үүсгэдэг. Хоёр өөр моноклональ эсрэгбие бүтээж, хоёр эсрэгбиемийн Fab хэлтэрхий буюу хүнд гинж ба хөнгөн гинжин хувьсах хэсгүүдийг тус тусад нь салгасан. Хөндлөн холбох урвал эсвэл гинжин хэлхээний рекомбинацын технологийн тусламжтайгаар хоёр фрагментийг нэгтгэж, хоёр өвөрмөц эсрэгбие үүсгэсэн. Хэдийгээр генийн инженерчлэлийн технологийн нарийн төвөгтэй байдал нь харьцангуй өндөр боловч одоогоор энэ нь эсрэгбиеийн бүтэц, үйл ажиллагааг тохируулахын тулд хоёр өвөрмөц эсрэгбие үйлдвэрлэхэд хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг арга юм. Хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн загварыг хийхдээ эсрэгбиеийн хөндлөн урвалын зарчмыг ашиглаж болох боловч эсрэгбиеийн хөндлөн реактив нь өвөрмөц бус урвал үүсгэж болзошгүй тул хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн эмчилгээ гэх мэт хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн дизайныг практикт хэрэглэхэд анхааралтай авч үзэх болно.

Хоёр өвөрмөц эсрэгбиемүүдийг цэвэрлэх

Хоёр өвөрмөц эсрэгбие цэвэршүүлэх нь өндөр цэвэршилттэй зорилтот эсрэгбиемүүдийг тусгаарлах, цэвэршүүлэх үйл явц юм. Зарим уусдаг хольцыг зайлуулахын тулд центрифуг болон гүн шүүлтүүр гэсэн хоёр аргыг ашигладаг. Зорилтот хоёр өвөрмөц эсрэгбиемийг эхлээд ойрын хроматографаар олж авдаг. IgG шиг хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн хувьд А уургийн ойрын хроматографийг ашигладаг бол IgG шиг өвөрмөц бус эсрэгбиемүүдийн хувьд хөнгөн гинжин хэлхээнд суурилсан ойрын хроматографийг ашиглаж болно. Дараа нь эсрэгбие нь тодорхой хугацаанд бага рН-ийн нөхцөлд өсгөвөрлөж, вирусын бүрхүүлийн гадаргуу дээрх уургийн бүтэц эвдэрч, улмаар эсийг халдварлах чадвараа алддаг. Хоорондын эсийн уураг (HCP) зэрэг бохирдлыг арилгахын тулд завсрын гүн шүүлтүүрийг гүйцэтгэдэг. Эсрэгбиеийн цэвэр байдлыг ион солилцооны хроматографи гэх мэт аргуудаар сайжруулж, үлдэгдэл вирусыг нано шүүлтүүр эсвэл хэт шүүлтүүрийн аргаар устгадаг. Эцэст нь дээжийг баяжуулж, тохирох найрлагатай буферээр солино.

Хоёр өвөрмөц эсрэгбие үйлдвэрлэх үйлчилгээний ажлын урсгал

Алхам	Үйлчилгээний агуулга	Он цагийн хэлхээс
Генийн синтез	3 хүртэлх өөр загварын дарааллын схемийг бий болгох, рекомбинант эсрэгбиеийн ДНХ плазмидуудыг шинээр бий болгох	2-3 долоо хоног
Жижиг хэмжээний тест	Хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн уургийн үйлдвэрлэл → Хөхтөн амьтдын эсийн шугам дахь жижиг хэмжээний илэрхийлэл → SDS-PAGE-ээр баталгаажуулах → ELISA-аар рекомбинант уургийн эсрэгтөрөгчтэй холбох шинжилгээ → Эцэг эхийн эсрэгбиемтэй клоныг харьцуулах	5-6 долоо хоног
Тодорхойлох	Эхний хоёр бүрэн хэмжээний хоёр өвөрмөц эсрэгбиеийн илэрхийлэл → ELISA аргаар холбох шинжилгээ → хулганы эсрэг эсрэгбиемээр хүлээн зөвшөөрөгдсөн эсрэгбиеийн ELISA үнэлгээ	1 долоо хоног
Эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл	Том хэмжээний эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл	3-4 долоо хоног

Бидний давуу тал

Бид эсрэгбие үйлдвэрлэх дээд ба доод урсгалын үйлчилгээг хамардаг бөгөөд эсрэгбие бэлтгэх, хоёр өвөрмөц эсрэгбие цэвэрлэх, эсрэгбие ялгах, цэвэршүүлэх, эсрэгбиеийн дараалал тогтоох, эсрэгбие баталгаажуулах гэх мэт техникийн үйлчилгээг үзүүлж болно.

Өндөр илэрхийлэл

CHO эсүүд дэх уургийн өндөр илэрхийлэл.
Тогтвортой хадгалалт

Сийвэн дэх 37 ° C температурт >2 долоо хоног.
Уусах чадварын асуудал байхгүй

>30 мг/мл
Тогтвортой эсүүд

Хавдрын эсрэгтөрөгч бүхий олон тогтвортой эсийн шугамыг олон төрлийн хоёр өвөрмөц эсрэгбиемүүдийг баталгаажуулах зорилгоор боловсруулсан.