Leave Your Message
слайд1

Моноклональ эсрэгбие хөгжүүлэх үйлчилгээ

Alpha Lifetech нь эпитопын таамаглал, пептидийн нийлэгжилт, уургийн экспресс, поликлональ эсвэл моноклональ эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл, мөн эсийн өсгөвөр, асцитын шингэн эсвэл бүхэл ийлдсээс эсрэгбие цэвэршүүлэх үйлчилгээ үзүүлдэг.

ХОЛБОО БАРИХ
01

Моноклональ эсрэгбие хөгжүүлэх үйлчилгээ

Альфа Лайфтек ХХКэпитопын таамаглал, пептидийн нийлэгжилт, уургийн экспресс, поликлональ эсвэл моноклональ эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл, мөн эсийн өсгөвөр, асцитын шингэн эсвэл бүхэл ийлдсээс эсрэгбие цэвэршүүлэх үйлчилгээ үзүүлж чадна.

Альфа Лайфтек ХХКБид эрлийз эс, геномын засварлах эсийн шугам, нокаут эсийн шугам, хэт экспресслэгдсэн эсийн шугам зэрэг төрөл бүрийн тогтвортой эсийн шугамын үйлчилгээг үйлчлүүлэгчдэд үзүүлэх туршлагатай. Бид үйлчлүүлэгч бүрт дэвшилтэт захиалгат эсийн шугамын үйлчилгээг санал болгохыг хичээдэг бөгөөд бидний үйлчилгээ батлагдсан, итгэл хүлээсэн.

Эсрэгбиеийн хөгжлийн стратеги

2Эсрэгбие хөгжүүлэх стратеги9wg

1. Антигенийн дизайн ба бэлтгэл
Эдгээр антигенүүд нь уураг, пептид эсвэл бусад молекулууд байж болно. Дархлаа үүсгэгчийг зохион бүтээхэд антигений бүтэц, дархлаа судлал, хүргэх системийн талаарх мэдлэгийг нэгтгэсэн цогц арга барил шаардлагатай. Alpha Lifetech нь хэрэгцээтэй хэрэглэгчдэд зориулсан дархлаа үүсгэгчийг зохион бүтээх боломжтой антиген дизайны технологитой.
Альфа Лайфтек нь үйлчлүүлэгчдэдээ сонголт хийх боломжтой рекомбинант уургийн бүтээгдэхүүнийг санал болгодог. Бид судалгаанд шаардлагатай рекомбинант уургийг үйлдвэрлэхийн тулд E. coli экспрессийн систем, мөөгөнцрийн экспрессийн систем, бакуловирус-шавьж экспрессийн систем, хөхтөн амьтдын экспрессийн систем гэх мэт олон төрлийн уургийн экспрессийн системтэй.

2. Амьтны дархлаажуулалт
Альфа Лайфтек нь үйлчлүүлэгчдэд дархлаа үүсгэгч бодис нийлүүлэх боломжтой бөгөөд хулгана, туулай, хонь, альпака, далайн гахай, шишүүхэй гэх мэт дархлаа сайтай амьтдыг та сонгох боломжтой.

3. Моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх аргууд

Hybridoma технологиор Mabs үйлдвэрлэл
Гибридома нь хулганы миелома эсийн шугам болон плазмын эсүүд (лимфоцит В) гэсэн хоёр төрлийн эсийн нэгдэлээр үүсдэг эрлийз эс бөгөөд гетерозигот эс нь in vitro-д сонирхсон антигенийн эсрэг тасралтгүй эсрэгбие үүсгэж чаддаг. Гибридома эсийн шугамын үйлдвэрлэл нь гурван хэсгээс бүрдэнэ: антигенийн дизайн (гаптен, жижиг молекулууд ба пептидүүд), амьтны дархлаажуулалт, эсийн нэгдэл, эерэг клон скрининг. Өвөрмөц дархлаажуулалтын арга зүйг ашиглан бид эсийн нэгдлийн онцгой өндөр үр ашиг (мянган В эс тутамд 1-10 гибридома) болон өндөр эсрэгбиеийн титрийг олж авдаг бөгөөд энэ нь биохимийн скрининг, in-vitro эсэд суурилсан шинжилгээ, амьтны судалгаа зэрэг дараагийн аналитик туршилтуудад амжилтын түвшинг хамгийн их байлгадаг.

Фаг дэлгэцийн технологиор Mabs үйлдвэрлэл
Фагийн дэлгэц нь моноклональ эсрэгбие үүсгэх өөр нэг аргыг санал болгодог. В-лимфоцитуудыг амьтны цуснаас ялгаж, тэдгээрийн мРНХ-г гаргаж авдаг. ПГУ-аар дамжуулан энэхүү мРНХ-г кДНХ болгон хувиргадаг бөгөөд энэ нь бүх VH болон VL сегментүүдийг олшруулдаг. Дараа нь эдгээр сегментүүдийг бактериофагийн PIII уургийн хамт ихэвчлэн нэг гинжин хувьсах хэлтэрхий (scFv) болгон вектор болгон клончилдог. Үүний дараа энэхүү бүтцийг E. coli-г халдварлуулахад ашигладаг бөгөөд үүний үр дүнд туслагч фагаар тарьж ойролцоогоор 10^10 эс агуулсан номын сан үүсдэг. Дараа нь E. coli нь VH болон VL сегментүүдийг бүрхүүлийнхээ нэг хэсэг болгон хадгалсан бактериофагийг ялгаруулах чадвартай. Үүний дараа сонирхлын эсрэгтөрөгчийг чиглүүлсэн тодорхой VH болон VL сегментүүдийг сонгож, E. coli-г бактериофагтай дахин нэгтгэхэд ашиглаж болно. Дараа нь плазмид агуулсан эсүүдийг ялгаж, дарааллыг тогтоодог.

4. Хайлуулах скрининг

Эсийн нэгдэл ба сонголт
Дараа нь цуглуулсан В эсүүдийг өсгөвөрт хязгааргүй хугацаанд үржиж чаддаг хорт хавдрын эсүүд болох миелома эсүүдтэй нэгтгэдэг. Нэгдлийг ихэвчлэн полиэтилен гликол (PEG) нэгдэл гэх мэт аргыг ашиглан хийдэг.
Нийлүүлсний дараа эрлийз эсүүдийг зөвхөн эрлийз эсүүд амьд үлдэх боломжийг олгодог сонгомол орчинд өсгөвөрлөнө. Энэ орчин нь ихэвчлэн аминоптерин агуулдаг бөгөөд энэ нь нийлэгдээгүй миелом эсийн өсөлтийг саатуулдаг.

Скрининг ба Клонг
Үүссэн эрлийзд эсүүдийг зорилтот эсрэгтөрөгчтэй холбоотой өвөрмөц эсрэгбие үйлдвэрлэх эсэхийг шалгадаг. Үүнийг ихэвчлэн фермент холбоот иммуносорбент шинжилгээ (ELISA), вестерн блот, иммунопресипитация, урсгалын цитометр зэрэг аргуудыг ашиглан хийдэг.

Эсрэгбие үүсгэдэг эрлийз эсүүдийг тодорхойлсны дараа тэдгээрийг ижил эсийн популяцийг үүсгэхийн тулд клончилдог. Энэ нь эрлийз эс бүрийн үүсгэсэн эсрэгбие ижил байхыг баталгаажуулдаг.

5. Эсрэгбиеийн үйл ажиллагааны баталгаажуулалт
Альфа Лайфтек нь моноклональ эсрэгбиеийг тодорхойлж, эсрэгбиеийн өвөрмөц чанар, хамаарал, үйл ажиллагааг баталгаажуулахын тулд Вестерн блоттинг, иммуногистохими эсвэл функциональ шинжилгээ зэрэг эсрэгбиеийн функциональ баталгаажуулалтыг хийдэг.

6. Эсрэгбиеийн оновчлол
А уураг эсвэл G уургийн хамаарлын хроматографи зэрэг аргуудыг ашиглан өсгөврийн дээд давхаргаас эсрэгбиеийг цэвэршүүлэх, мөн Alpha Lifetech нь эсрэгбиеийн хамаарлыг сайжруулахын тулд эсрэгбиеийн өөрчлөлтийн аргуудыг санал болгож чадна.

7. Эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл
Alpha Lifetech нь өндөр хүчин чадалтай скрининг болон томоохон хэмжээний үйлдвэрлэлд ашиглахад тохиромжтой эсрэгбиеийг үнэлэх боломжтой.

байнга асуудаг асуултуудбайнга асуудаг асуултууд

Моноклональ эсрэгбиеийн хөгжлийн талаар байнга асуудаг асуултууд

  • 1

    Зөв хайбридомыг хэрхэн сонгох вэ?

    Нийлүүлэлтийн явцад 10-15 ширхэг 96 нүхтэй микротитр бүхий хавтангуудыг хайлуулсан эрлийз хольцоор үржүүлдэг. Хавтан бүрийг HAT-IMDM сонголтын орчинд тэжээж, 37 хэмийн нүүрстөрөгчийн давхар ислийн инкубаторт хадгалдаг. Нийлүүлэлтийн дараа 9-14 хоногийн дараа эрлийз давхаргын дээд давхаргыг сонирхсон өвөрмөц эсрэгбие байгаа эсэхийг шалгадаг.

  • 2

    Сонголтын үр ашгийг хэрхэн сайжруулах вэ?

    Плазмын эсүүдийг миелома эсүүдтэй нэгтгэх нь 100% үр дүнтэй биш юм. Хамгийн оновчтой нөхцөлд болон хамгийн үр дүнтэй өдөөлтөд ч гэсэн эсийн нэгдэл нь салгах шаардлагатай нийлмэл болон нийлмэл эсүүдийн холимог үүсгэдэг. Сонголтын үйл явцын үр ашгийг дээшлүүлэхийн тулд нэгтгэхэд ашигладаг миелома эсүүдэд нуклеотидын аврах замын гол фермент болох HGPRT дутагддаг. Дараа нь хольцыг HAT орчинд өсгөвөрлөсөн бөгөөд зөвхөн HGPRT ферменттэй эсүүд болох плазмын эсээс HGPRT-ийг өвлөн авсан эрлийзд эсүүд амьдрах чадвартай байв.

  • 3

    Гибридом эсийн шугамыг эсрэгбиеийн идэвхжилд хэрхэн шинжлэх вэ?

    Эрлийз сортуудын үнэлгээ нь чухал алхам юм. Ихэвчлэн эрлийз, клон болон дэд клоны дээд давхаргын скринингийг фермент холбоот иммуносорбент шинжилгээ (ELISA), вестерн блот шинжилгээ, флуоресценцийн идэвхжүүлсэн эсийн ялгалт (FACS)-аар хийдэг. Бид дээд давхаргын бүх скринингийг өөрийн лабораторид хийхээр сонгоно.

  • 4

    Эсрэгбиеийн идэвхжилийн шинжилгээг хэрхэн хийх талаар дэлгэрэнгүй зааварчилгаа өгнө үү?

    Шинжилгээнд хамрагдах гибридомагийн супернатууд 500-1440 дээжийн хооронд хэлбэлзэж болох бөгөөд 9-14 дэх өдөр гэхэд шинжилгээнд бэлэн болно. Бид гурваас таван хоногийн хугацаанд гарч ирэх эсвэл бүгд нэг өдөр бэлэн болж болох тул үйлчлүүлэгчийн лаборатори хэдэн долоо хоногийн өмнөөс сонгож болох хоёрдогч скрининг шинжилгээнд бэлтгэх нь чухал юм.

  • 5

    Эерэг гибридома яагаад дэд клончлолд орох шаардлагатай вэ?

    Анхны ELISA скрининг процедурын үеэр эерэг Хуйлс илэрсний дараа эрлийдомыг дэд клонжуулалтын процедурт бэлтгэхийн тулд илүү том хэмжээтэй, өөрөөр хэлбэл 24 нүхтэй хавтан руу шилжүүлсэн. Эрлийдомыг дэд клонжуулалтыг ихэвчлэн тогтвортой моноклоныг ялгахын тулд хязгаарлагдмал шингэрүүлэлтийн аргаар гүйцэтгэдэг. Энэ арга нь эрлийдомын өсгөврийг шингэлж, моноклонал байдлыг хангахын тулд 96 нүхтэй хавтан болгон тараах (нух бүрт нэг эс) орно. Холимог эрлийдомын популяци үүсэх эрсдлийг бууруулахын тулд дор хаяж хоёр хязгаарлагдмал шингэрүүлэлт хийх хэрэгтэй.

  • 6

    Гибридома технологийг эсрэгбие илрүүлэхэд ашиглахын ашиг тус юу вэ?

    Эрлийз эсийн шугамууд нь өндөр хамааралтай, тогтвортой, өвөрмөц чанартай эсрэгбиеийг хамгийн зардал багатай аргаар үйлдвэрлэх чадвараараа сайшаагдсан.

Моноклональ эсрэгбие хөгжүүлэх үйлчилгээ

Альфа Лайфтех нь пептидийн нийлэгжилт, уургийн экспресс болон моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх үйлчилгээ үзүүлж чадна

хулганы mab-Alpha Lifetech

Хулганы моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх үйлчилгээ

Альфа Лайфтек нь дэлхийн өнцөг булан бүрээс ирсэн эрдэмтдэд хулганы эрлийдомын бүх үйлчилгээг үзүүлэх боломжтой. Эдгээр үйлчилгээнд антигенийн дизайн/нийлэгжилт, хулганы дархлаажуулалт, эсийн нэгдэл, эрлийдомын сонголт/шинж чанар багтдаг бөгөөд бид эдгээр үйлчилгээнүүдээр төсөл бүрт мэргэшсэн.

ДЭЛГЭРЭНГҮЙ УНШИХ
туулайн маб-Альфа Лайфтех

Туулайн моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх үйлчилгээ

Альфа Лайфтек нь эсрэгбиеийн чиглэлээр олон жилийн туршлагатай бөгөөд туулайн моноклональ эсрэгбие хөгжүүлэх цогц платформыг бүтээжээ.

ДЭЛГЭРЭНГҮЙ УНШИХ

Хэрэв танд асуулт байвал бидэнтэй хэзээ ч холбогдоно уу.

Leave Your Message

Онцлох үйлчилгээ