Моноклональ эсрэгбие хөгжүүлэх үйлчилгээ
Alpha Lifetech Inc.эпитопын таамаглал, пептидийн синтез, уургийн илэрхийлэл, поликлон эсвэл моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх, эсийн өсгөвөр, асцитын шингэн эсвэл бүхэл ийлдэсээс эсрэгбие цэвэрлэх боломжтой.
Alpha Lifetech Inc.нь эрлийз эс, геном засварлах эсийн шугам, устгалын эсийн шугам, хэт их экспрессийн эсийн шугам зэрэг төрөл бүрийн тогтвортой эсийн шугамын үйлчилгээг хэрэглэгчдэд үзүүлэх туршлагатай. Бид үйлчлүүлэгч бүрт дээд зэргийн захиалгат үүрэн холбооны үйлчилгээг санал болгохыг хичээдэг бөгөөд бидний үйлчилгээ нь батлагдсан бөгөөд найдвартай байдаг.
Эсрэгбие хөгжүүлэх стратеги

1.Антигенийн дизайн, бэлтгэл
Эдгээр эсрэгтөрөгч нь уураг, пептид эсвэл бусад молекулууд байж болно. Иммуногенийг зохион бүтээх нь эсрэгтөрөгчийн бүтэц, дархлаа судлал, дамжуулах системийн талаарх мэдлэгийг нэгтгэсэн цогц арга барилыг шаарддаг. Alpha Lifetech нь хэрэгцээтэй үйлчлүүлэгчдэд зориулсан иммуногенийг зохион бүтээх антиген дизайны технологитой.
Alpha Lifetech нь үйлчлүүлэгчдэдээ сонгох боломжтой рекомбинант уургийн бүтээгдэхүүнээр хангадаг. Судалгаанд шаардлагатай рекомбинант уургийг гаргаж авахын тулд бид E. coli экспрессийн систем, мөөгөнцрийн экспрессийн систем, бакуловирүс-шавжны экспрессионал систем, хөхтөн амьтдын экспрессионал систем гэх мэт олон төрлийн уураг илэрхийлэх системтэй.
2. Малын дархлаажуулалт
Alpha Lifetech нь үйлчлүүлэгчдэд дархлаа үүсгэгч бодисоор хангах боломжтой бөгөөд хулгана, туулай, хонь, альпака, далайн гахай, шишүүхэй гэх мэт дархлаатай амьтдыг сонгох боломжтой.
3.Моноклональ эсрэгбие үүсгэх аргууд
●Hybridoma технологиор Mabs үйлдвэрлэл
Гибридома нь хулганын миелома эсийн шугам ба плазмын эсүүд (лимфоцит В) гэсэн хоёр төрлийн эсийн нэгдлээс үүссэн эрлийз эс бөгөөд гетерозигот эс нь сонирхлын эсрэгтөрөгчийн эсрэг тасралтгүй эсрэгбие үүсгэдэг. Гибридомын эсийн үйлдвэрлэл нь эсрэгтөрөгчийн загвар (гаптен, жижиг молекул ба пептид), амьтны дархлаажуулалт, эсийн нэгдэл, эерэг клон скрининг гэсэн гурван хэсгээс бүрдэнэ. Дархлаажуулалтын өвөрмөц аргуудыг ашигласнаар бид эсийг нэгтгэх онцгой өндөр үр ашигтай (мянган В эс тутамд 1-10 гибридома) ба эсрэгбиеийн өндөр титрийг олж авснаар биохимийн скрининг, in-vitro эсэд суурилсан шинжилгээ, амьтны судалгаа зэрэг дараагийн аналитик туршилтуудын амжилтын хувь хэмжээг нэмэгдүүлэх болно.
●Фагийн дэлгэцийн технологиор Mabs үйлдвэрлэл
Фагийн дэлгэц нь моноклональ эсрэгбие үүсгэх өөр аргыг санал болгодог. В-лимфоцитуудыг амьтны цуснаас тусгаарлаж, мРНХ-ийг нь гаргаж авдаг. ПГУ-аар дамжуулан энэ мРНХ нь бүх VH ба VL сегментийг олшруулдаг cDNA болж хувирдаг. Дараа нь эдгээр сегментүүдийг бактериофагийн PIII уургийн хамт нэг гинжин хувьсах фрагмент (scFv) хэлбэрээр вектор болгон хуваадаг. Дараа нь энэ бүтцийг E. coli-г халдварлахад ашигладаг бөгөөд үүний үр дүнд туслах фагаар тарих замаар ойролцоогоор 10^10 эс агуулсан номын санг бий болгодог. Дараа нь E. coli нь бүрхүүлийнхээ нэг хэсэг болох VH ба VL сегментүүдийг агуулсан бактериофаг ялгаруулж чаддаг. Үүний дараа сонирхож буй эсрэгтөрөгчийг чиглүүлсэн тодорхой VH ба VL сегментүүдийг сонгож, E. coli-г бактериофагтай дахин тарихад ашиглаж болно. Дараа нь плазмид агуулсан эсүүдийг тусгаарлаж, дараалуулна.
4.Fusion скрининг
●Эсийн нэгдэл ба сонголт
Дараа нь цуглуулсан В эсүүд нь миелома эсүүдтэй нийлдэг бөгөөд эдгээр нь өсгөвөрлөхөд хязгааргүй үржиж болох хорт хавдрын эсүүд юм. Холимог хайлалтыг ихэвчлэн полиэтилен гликол (PEG) хайлуулах гэх мэт аргыг ашиглан хийдэг.
Эрлийз эсийг нэгтгэсний дараа зөвхөн эрлийз эсийг амьд үлдэх боломжийг олгодог сонгомол орчинд өсгөвөрлөнө. Энэ бодис нь ихэвчлэн аминоптерин агуулдаг бөгөөд энэ нь уусаагүй миелома эсийн өсөлтөөс сэргийлдэг.
●Скрининг ба бөглөрөл
Үүссэн эрлийз эсүүд нь зорилтот эсрэгтөрөгчийн өвөрмөц эсрэгбие үүсэх эсэхийг шалгадаг. Энэ нь ихэвчлэн ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ (ELISA), Western blot, иммунопреципитаци, урсгалын цитометр зэрэг аргуудыг ашиглан хийгддэг.
Эсрэгбие үүсгэдэг эрлийз эсийг тодорхойлсны дараа тэдгээрийг ижил эсийн популяци үүсгэхийн тулд клондуулдаг. Энэ нь эрлийз эс бүрээр үүсгэгдсэн эсрэгбие нь ижил байхыг баталгаажуулдаг.
5. Эсрэгбиеийн үйл ажиллагааны баталгаажуулалт
Альфа Lifetech нь моноклон эсрэгбиемүүдийг тодорхойлох, эсрэгбиеийн өвөрмөц байдал, ойр дотно байдал, үйл ажиллагааг баталгаажуулахын тулд Western blotting, immunohistochemistry эсвэл функциональ шинжилгээ зэрэг эсрэгбиеийн функциональ баталгаажуулалтыг хийдэг.
6. Эсрэг биетийг оновчтой болгох
А уураг эсвэл уургийн G-тэй харьцах хроматографи, Альфа Lifetech зэрэг арга техникийг ашиглан өсгөвөрийн супернатантаас эсрэгбиемийг цэвэршүүлэх нь эсрэгбиеийн ойртоцыг сайжруулахын тулд эсрэгбиемийг өөрчлөх аргуудаар хангадаг.
7. Эсрэгбиеийн үйлдвэрлэл
Alpha Lifetech нь өндөр үр дүнтэй скрининг хийх програмууд болон томоохон хэмжээний үйлдвэрлэлд нэр дэвшигчийн эсрэгбиемүүдийг үнэлэх боломжтой.
- 1
Хэрхэн зөв хайлуулах гибридомыг сонгох вэ?
Хайлуулах процессын явцад 96 худагтай 10-15 микротитр хавтанг хайбрид холимогоор үржүүлдэг. Хавтас бүрийг HAT-IMDM сонгох тэжээлээр тэжээж, нүүрстөрөгчийн давхар ислийн инкубаторт 37 хэмийн температурт хадгална. Ууссанаас хойш 9-14 хоногийн дараа эрлийз супернатантыг сонирхож буй өвөрмөц эсрэгбие байгаа эсэхийг шалгана.
- 2
Сонгон шалгаруулалтын үр ашгийг хэрхэн сайжруулах вэ?
Цусны сийвэнгийн эсийг миеломатай хамт нэгтгэх нь 100% үр дүнтэй байдаггүй. Хамгийн оновчтой нөхцөл, хамгийн үр дүнтэй өдөөлттэй байсан ч эсийн нэгдэл нь салгах шаардлагатай холилдсон болон нийлсэн эсүүдийн хольцыг үүсгэдэг. Сонгох үйл явцын үр ашгийг дээшлүүлэхийн тулд уусгахад ашигладаг миелома эсүүдэд нуклеотидын аврах замын гол фермент болох HGPRT дутагдаж байна. Дараа нь хольцыг HAT орчинд өсгөвөрлөхөд зөвхөн HGPRT ферменттэй эсүүд буюу сийвэнгийн эсээс HGPRT-ийг өвлөн авсан эрлийзүүд амьдрах чадвартай байв.
- 3
Гибридома эсийн шугамыг эсрэгбиеийн үйл ажиллагааг хэрхэн шалгах вэ?
Эрлийз сортуудыг үнэлэх нь маш чухал алхам юм. Ихэвчлэн эрлийз, клон болон дэд клоны супернатантын скринингийг ферменттэй холбоотой иммуносорбентын шинжилгээ (ELISA), Western blot шинжилгээ, флюресцент идэвхжсэн эс ангилах (FACS) ашиглан хийдэг. Бид дээд давхаргын бүх скринингийг өөрийн лабораторид хийхээр сонгоно.
- 4
Эсрэгбиеийн идэвхжилийн шинжилгээг хэрхэн хийх талаар дэлгэрэнгүй зааварчилгаа өгнө үү?
Шинжилгээнд хамрагдах эрлийз дээд эсүүд нь 500-1440 дээжийн хооронд хэлбэлзэж, 9-14 хоногийн дотор шинжилгээнд ороход бэлэн болно. Бид гурваас тав хоногийн дотор гарч ирэх эсвэл бүгд нэг өдөр бэлэн байж болзошгүй тул үйлчлүүлэгчийн лабораторид хоёрдогч скринингийн тусгай шинжилгээг сонгон ажиллахын тулд долоо хоногийн өмнө бэлдэх нь чухал юм.
- 5
Эерэг гибридомуудыг яагаад дэд клонжуулах шаардлагатай байдаг вэ?
ELISA скринингийн эхний процедурын явцад эерэг Wells илэрсэний дараа гибридомуудыг дэд хуваах процедурт бэлтгэхийн тулд илүү том хэмжээтэй, өөрөөр хэлбэл 24 цооногийн хавтан руу шилжүүлсэн. Гибридомын дэд клонжуулалтыг ихэвчлэн тогтвортой моноклоныг тусгаарлахын тулд хязгаарлагдмал шингэлэх аргаар гүйцэтгэдэг. Энэхүү техник нь гибридомын өсгөвөрийг шингэлж, 96 цооногийн ялтсуудад тарааж, моноклональ байдалд (худаг бүрт нэг эс) хүрэхэд оршино. Холимог гибридомын популяци үүсэх эрсдлийг бууруулахын тулд дор хаяж хоёр хязгаарлагдмал шингэрүүлэлт хийх шаардлагатай.
- 6
Эсрэгбие илрүүлэхэд гибридома технологийг ашиглах нь ямар давуу талтай вэ?
Гибрид эсийн шугамууд нь өндөр наалдамхай, тогтвортой байдал, өвөрмөц чанар бүхий эсрэгбие үүсгэх чадварыг хамгийн хэмнэлттэй байдлаар магтдаг.

Хулганы моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх үйлчилгээ
Alpha Lifetech нь дэлхийн эрдэмтдэд хулганын эрлийз өвчний бүх үйлчилгээг үзүүлж чадна. Эдгээр үйлчилгээнүүд нь эсрэгтөрөгчийн дизайн/нийлэгжилт, хулганыг дархлаажуулах, эсийг нэгтгэх, эрлийзийг сонгох/шинж чанар зэргийг багтаасан бөгөөд бид төсөл тус бүрээр мэргэших боломжтой.
Дэлгэрэнгүй уншина уу
Туулайн моноклональ эсрэгбие үйлдвэрлэх үйлчилгээ
Alpha Lifetech нь эсрэгбиеийн чиглэлээр олон жилийн туршлагатай бөгөөд туулайн моноклональ эсрэгбие хөгжүүлэх цогц платформыг бүтээсэн.
Дэлгэрэнгүй уншина уу


2018-07-16 

