Уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээний үйлчилгээ
Альфа Лайфтек нь мөн хэрэглэгчдийн туршилтын хэрэгцээг хангахын тулд уургийн шинжилгээ, уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээ, уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээ (CO-IP, Western Blot, Хроматины дархлаа тунадасжилтын шинжилгээ) болон уургийн үйл ажиллагааны шинжилгээг хэрэглэгчдэд үзүүлэх боломжтой.
ХОЛБОО БАРИХ01
Уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээний үйлчилгээ
Альфа Лайфтек нь олон жилийн турш уургийн шинжилгээнд гүнзгий оролцож, уургийн функциональ шинжилгээний найдвартай платформыг бий болгож, уургийн харилцан үйлчлэлийг баталгаажуулах олон төрлийн техникийн хэрэгслийг эзэмшсэн нь шинжлэх ухааны судалгаа эсвэл төслийн судалгааны цагийг хэмнэж, тогтвортой үр дүнд хүрэх боломжийг олгодог.
Альфа Лайфтек нь мөн хэрэглэгчдийн туршилтын хэрэгцээг хангахын тулд уургийн шинжилгээ, уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээ, уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээ (CO-IP, Western Blot, Хроматины дархлаа тунадасжилтын шинжилгээ) болон уургийн үйл ажиллагааны шинжилгээг хэрэглэгчдэд үзүүлэх боломжтой.
Уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээний танилцуулга
Уургууд нь генетикийн материалд хадгалагдсан зааврыг дагаж мөрддөг амьдралын аливаа хэлбэрийн хамгийн чухал гүйцэтгэх молекулууд юм. Илүү олон удаа уургууд нь бусад уургуудтай харилцан үйлчилдэг үүрэг гүйцэтгэгчээр ажиллаж, үүргээ гүйцэтгэдэг бөгөөд энэ нь уургийн үйл ажиллагааг эсийн бодит нөхцөлд судлахад илүү тодорхой болдог. Уургийн хоорондох харилцан үйлчлэлийг тодорхойлох нь тухайн уургийн биохимийн судалгаанд маш чухал юм. Нийтлэг төрлүүдийн уургийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээг дараах байдлаар хийнэ.
Хамтын дархлааны тунадасжилтын шинжилгээ
Хамтын дархлаа тунадасжуулалтын аргын зарчим нь инкубацийн зорилгоор зорилтот уураг, өвөрмөц эсрэгбие болон уургийн A/G соронзон бөмбөлгүүдийг хольж, холбоогүй уургийн дээд давхаргыг соронзон тавиур дээрх соронзон бөмбөлгүүдийн адсорбциар дамжуулан хаяж, тусгайлан холбоогүй бол уураг болон бусад хольцыг зайлуулахын тулд соронзон бөмбөлгүүдийг угааж цэвэрлэнэ.
Зураг 1. Co-IP шинжилгээний бүдүүвч диаграмм.(Лавлагаа эх сурвалж: Коиммун тунадасжилтын шинжилгээ - PubMed (nih.gov))
Доош татах шинжилгээ
Татах шинжилгээ нь мэдэгдэж буй уургийг соронзон бөмбөлөг дээр бэхлээд илрүүлэх бодисыг нэмэх явдал юм. Элюентийг харилцан үйлчлэлцэж буй уургуудын адсорбцид илрүүлдэг.
1988 онд Смит нар GST нэгдлийн уургийг цэвэршүүлсэн бөгөөд үүнийг доош татах шинжилгээнд ашигласан бөгөөд үүнийг Gst доош татах шинжилгээ гэж нэрлэдэг бөгөөд энэ нь зорилтот уурагт GST шошго нэмж, GSH-ээр дамжуулан харилцан үйлчилж буй уургийг барьж, холболтыг нь ялгаж, WB шинжилгээгээр баталгаажуулдаг.
Зураг 2. GST-ийн доош татах шинжилгээний бүдүүвч диаграмм.(Лавлагаа эх сурвалж: PIF4 холболтыг in vitro-д судлах GST Pull-Down шинжилгээ - PubMed (nih.gov) )
Түүний татах арга нь никель эсвэл кобальт зэрэг металл ионуудыг орчин болгон ашиглах, уургийг аффинит хроматографиар цэвэршүүлэх, мөн WB туршилтаар холболтыг тодруулж баталгаажуулах явдал юм.
Үүнээс гадна, ДНХ-ийн таталт-доош (уургийн днх-ийн холболтын шинжилгээ), РНХ-ийн таталт-доош (уургийн рНХ-ийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээ) болон жижиг молекулын таталт-доош шинжилгээнүүд байдаг.
ДНХ-ийн таталт-доош (Уургийн ДНХ-ийн холболтын шинжилгээ) нь уургийн ДНХ-ийн холболтыг тодорхойлох in vitro арга юм. Тодорхой уургууд нь бай ДНХ-тэй холбогддог эсэхийг WB шинжилгээгээр илрүүлсэн; Уурагтай холбогдсон ДНХ-ийн тодорхойгүй хэлтэрхий, эдгээр ДНХ-ийн хэлтэрхий нь MS илрүүлэлтээр мэдэгддэг.
РНХ-ийн таталт-доош (Уургийн РНХ-ийн харилцан үйлчлэлийн шинжилгээ) нь уургуудтай РНХ-ийн холболтыг тодорхойлох in vitro арга юм. Тодорхой уургууд нь зорилтот РНХ-тэй холбогддог эсэхийг WB шинжилгээгээр илрүүлсэн; Уурагтай холбогдсон тодорхойгүй РНХ-ийн хэлтэрхий, эдгээр РНХ-ийн хэлтэрхий нь MS илрүүлэлтээр мэдэгддэг.
SM pull-down (жижиг молекулын татах шинжилгээ) нь жижиг молекулуудтай тусгайлан холбогддог зорилтот уургуудыг олж чаддаг бөгөөд MS-тэй хослуулан жижиг молекулын зорилтот уургуудыг нарийн шалгаж болох бөгөөд үүнийг in vitro шошголох арга болон биологийн ортогональ арга гэж хувааж болно.
WB туршилт
WB туршилт (Western Blot туршилт эсвэл Western blot гэж нэрлэдэг) нь мөн чанар нь эсрэгтөрөгч ба эсрэгбиеийн тодорхой урвалд ордог бөгөөд үндсэн зарчим нь денатурацид орсон уургуудыг SDS полиакриламидын гель электрофорезоор салгаж, мембраны дамжуулалтаар (нойтон эсвэл хагас хуурай эргэлт) хатуу фазын тээвэрлэгч (PVDF мембран, NC мембран гэх мэт) шилжүүлэх явдал юм. Блоклосны дараа (BSA, цөцгийн тос гэх мэтийг ашиглан) анхдагч эсрэгбиеийг уурагтай тусгайлан холбоход хэрэглэж, хальсыг угаасны дараа флуоресцеинээр тэмдэглэгдсэн хоёрдогч эсрэгбие нэмнэ. Хоёр дахь эсрэгбиеийг анхдагч эсрэгбиетэй холбосноор зорилтот уургийг субстратын өнгөний хөгжил ба химилюминесценцээр ажиглаж болно. Үүнийг ерөнхийдөө тодорхой уураг дээжинд илэрхийлэгдэж байгаа эсэхийг тодорхойлох, түүний илэрхийллийн түвшинг ойролцоогоор шинжлэхэд ашигладаг.
Уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийн аргын харьцуулалт
Уургийн таталтын шинжилгээ нь Co-IP шинжилгээтэй төстэй бөгөөд хоёулаа уургийн харилцан үйлчлэлийн туршилтыг илрүүлэхэд хамаарна. Хоёр аргын хоорондох ялгаа нь Co-IP шинжилгээ нь мэдэгдэж буй уургуудын харилцан үйлчлэлцэх уургуудыг олж авдаг бөгөөд энэ нь тодорхой үнэн зөв боловч харилцан үйлчлэлцэх уургууд шууд эсвэл шууд бусаар харилцан үйлчилж байгаа эсэхийг баталгаажуулж чадахгүй. Таталтын шинжилгээ нь мэдэгдэж буй уурагтай харилцан үйлчилж буй үл мэдэгдэх уургийг олох явдал юм. Энэ нь мэдэгдэж буй уураг нь илэрсэн уурагтай харилцан үйлчилж байгаа эсэхийг шууд баталгаажуулж чаддаг боловч in vivo холболтын нөхцөл байдлыг мэдэж чадахгүй.
Хамтын дархлааны тунадасжуулалтын технологийг дархлааны тунадасжуулалтын туршилтад үндэслэн хоёр ба түүнээс дээш уургийн хооронд харилцан үйлчлэл байгаа эсэхийг шинжлэхэд ашигладаг. Туршилтын бусад аргуудтай (GST Pull-down, Western Blot, Chromatin immunoprecipitation analysis гэх мэт) харьцуулахад Co-IP технологи нь илүү өндөр өвөрмөц чанар, мэдрэмж, өндөр давтагдах чадвартай тул өвөрмөц бус холболтын хөндлөнгийн оролцооноос зайлсхийж, уургийн байгалийн төлөв байдлын харилцан үйлчлэлийг тусгадаг.
| НӨАТ-ыг доош татах | Хамтын IP | Дэлхийн банк | |
|---|---|---|---|
| Давуу тал | *Ажиллуулахад хялбар *Төрөл бүрийн уургийг цэвэршүүлэхэд тохиромжтой | *In vivo харилцан үйлчлэлийн шинжилгээнд зориулагдсан *Үүнийг доод урсгалын уурагтай тодорхойлж болно | *Хүчтэй өвөрмөц чанар *Чанарын болон тоон үзүүлэлт in vitro |
| Хязгаарлалт | *Магадгүй өвөрмөц бус холболт *Харилцаа холбоог цаашид баталгаажуулах шаардлагатай | *Эсрэгбиеэс хүчтэй хамааралтай байх *Өвөрмөц бус холболт үүсч болно | *Цаг хугацаа шаардсан *Том хэмжээний уургийн шинжилгээнд ашиглахад хэцүү |
| Хэрэглээний жишээ | *Харилцан үйлчлэлийг тодорхойлох *Цэвэршүүлсэн уургийн цогцолбор | *Дохионы дамжуулалтыг судлах *Өвчний механизм | Уураг-уураг, уураг-ДНХ, уураг-РНХ-ийн харилцан үйлчлэлийн дараагийн шинжилгээ |
Захиалгат
Үйлчилгээгээ хэрэгцээндээ нийцүүлэн тохируулах
Туршлага
Уураг үйлдвэрлэх олон жилийн туршлагатай
Технологи
Өндөр чанартай хүргэлтийн үр дүн
Туршилтын үйл явц
Чанарын удирдлагын хатуу үйл явц
BLI/SPR шинжилгээний үйлчилгээ
Дэлгэрэнгүй мэдээлэл авах
Хамтарсан дархлаажуулалтын (ХХТ) үйлчилгээ
Дэлгэрэнгүй мэдээлэл авах
Уургийн хөндлөн холбоос үйлчилгээ
Дэлгэрэнгүй мэдээлэл авах
НӨАТ-ын доош татах үйлчилгээ
Дэлгэрэнгүй мэдээлэл авах
Хоёр эрлийз мөөгөнцрийн үйлчилгээ
Дэлгэрэнгүй мэдээлэл авах
Хэрэв танд асуулт байвал бидэнтэй хэзээ ч холбогдоно уу.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102