फेज डिस्प्ले लायब्ररी बांधकाम सेवा

अल्फा लाइफटेककडे अँटीबॉडी लायब्ररीची उभारणी आणि उत्पादन सुनिश्चित करण्यासाठी एक सर्वसमावेशक M13/T7 फेज डिस्प्ले प्लॅटफॉर्म आहे. आम्ही तुमच्या गरजा पूर्ण करण्यासाठी अँटीबॉडी scFv उत्पादनासारख्या सानुकूलित सेवा देखील देऊ शकतो.

आमच्याशी संपर्क साधा

०१

फेज डिस्प्ले लायब्ररी बांधकाम सेवा

अल्फा लाइफटेक अनेक वर्षांपासून फेज डिस्प्ले तंत्रज्ञानामध्ये खोलवर गुंतलेली आहे. कंपनीने एक परिपूर्ण आणि स्थिर फेज डिस्प्ले तंत्रज्ञान प्लॅटफॉर्म तयार केला आहे, जो वैज्ञानिक संशोधन किंवा प्रकल्प संशोधनासाठी लागणारा वेळ वाचवतो आणि त्यानंतरच्या उत्पादनास सुलभ करतो. अल्फा लाइफटेक ग्राहकांना व्हीएचएच अँटीबॉडी उत्पादन, एससीएफव्ही अँटीबॉडी उत्पादन, फॅब अँटीबॉडी उत्पादन यांसारख्या सेवा देखील प्रदान करू शकते.

अल्फा लाइफटेककडे अँटीबॉडी लायब्ररीची उभारणी आणि उत्पादन सुनिश्चित करण्यासाठी एक सर्वसमावेशक M13/T7 फेज डिस्प्ले प्लॅटफॉर्म आहे. तुमच्या गरजा पूर्ण करण्यासाठी आम्ही अँटीबॉडी scFv उत्पादन आणि हाय-थ्रूपुट अँटीबॉडी स्क्रीनिंग यांसारख्या सानुकूलित सेवा देखील देऊ शकतो.

फेज डिस्प्लेची ओळख

फेज डिस्प्ले तंत्रज्ञान हे एक असे तंत्र आहे, ज्यात विशिष्ट प्रथिने किंवा पेप्टाइड्सच्या कार्यात्मक बंधनकारक रेणूंचा शोध घेण्यासाठी फेज (जीवाणूंना संक्रमित करणारा विषाणू) वापरला जातो. फेज अँटीबॉडी लायब्ररी निर्मिती तंत्रांमध्ये फॅब अँटीबॉडी लायब्ररी निर्मिती, अँटीबॉडी scFv लायब्ररी निर्मिती, नॅनोबॉडी लायब्ररी निर्मिती इत्यादींचा समावेश होतो. बॅक्टेरिओफेजच्या प्रकारानुसार, त्यांची M13, T7, T4, λ आणि इतर प्रणालींमध्ये विभागणी केली जाऊ शकते. लायब्ररीच्या प्रकारानुसार, तिची रँडम पेप्टाइड लायब्ररी, cDNA लायब्ररी, अँटीबॉडी लायब्ररी आणि प्रोटीन लायब्ररीमध्ये विभागणी केली जाऊ शकते. फेज डिस्प्ले तंत्रज्ञान चालवायला सोपे आणि वापरायला स्वस्त आहे. तथापि, हे तंत्र लायब्ररीमधील आण्विक अनुवांशिकतेच्या विविधतेवर मर्यादा घालते, कारण ते खूप लांब अनुक्रम व्यक्त करू शकत नाही.

सध्या, फेज डिस्प्ले तंत्रज्ञान मोठ्या प्रमाणावर वापरले जाते. त्यामध्ये, नवीन लसींचे संशोधन आणि विकास (कमी किमतीच्या आणि कार्यक्षम कृत्रिम लसी), अँटीबॉडी औषधांचा विकास (एन्झाइम इनहिबिटरची चाचणी), सेल सिग्नल ट्रान्सडक्शन (सिम्युलेटेड एपिटोपची चाचणी), आणि अँटीजेन एपिटोपचे संशोधन (मोनोक्लोनल अँटीबॉडीजची तयारी) यांमध्ये महत्त्वपूर्ण यश मिळाले आहे.

टी७ बॅक्टेरिओफेजचा परिचय

टी७ बॅक्टेरिओफेज हा दुहेरी-पदरी डीएनए असतो, या डीएनएची लांबी ४० केबी असते आणि तो ६० एनएम व्यासाच्या कॅप्सिडमध्ये गुंडाळलेला असतो. डोके आणि शेपटी यांना जोडणारा भाग हा जीपी८ च्या अनेक प्रतींनी बनलेली एक वलयाकार रचना आहे. टी७ बॅक्टेरिओफेजचे डोके आणि गाभा मिळून एक दंडगोलाकार रचना तयार करतात, जी जीपी८ ला बांधून ठेवते आणि डोके व शेपटीला जोडू शकते.

आकृती १. टी७ बॅक्टेरिओफेजचे योजनाबद्ध सादरीकरण.(संदर्भ: टी7 फेज डिस्प्ले सिस्टीममधील प्रगती (पुनरावलोकन))

एम१३ बॅक्टेरिओफेजचा परिचय

बॅक्टेरिओफेज M13 हा तंतुमय फेजेसच्या एका गटाशी संबंधित आहे, ज्यांना एकत्रितपणे Ff फेजेस म्हटले जाते. त्याची लांबी ९०० nm आणि रुंदी ६.५ nm आहे. त्यात ६४०७ bp लांबीचे एक-पदरी डीएनए (ssDNA) चे जीनोम असते, ज्यात ११ वेगवेगळ्या प्रथिनांना सांकेतिक रूप देणारे नऊ जनुके असतात. त्यांपैकी, पाच प्रथिने आवरण प्रथिने (coat proteins) आहेत, आणि सहा प्रथिने फेजच्या प्रतिकृतीकरण (replication) आणि जुळणीमध्ये (assembly) सहभागी असतात. आवरण प्रथिनांची सर्वाधिक घनता कॅप्सिड प्रथिन G8P मध्ये असते, जे सुमारे २,७०० प्रथिन एककांनी बनलेले असते आणि गुणसूत्राभोवती एक आवरण तयार करते.

आकृती २ बॅक्टेरिओफेज M13 चे योजनाबद्ध सादरीकरण.(संदर्भ: अँटीबॉडी फेज डिस्प्ले तंत्रज्ञानाची मूलभूत माहिती)

फेज डिस्प्ले अँटीबॉडी लायब्ररीचा परिचय

आधुनिक वैद्यकशास्त्रात अँटीबॉडींचा शोध अधिकाधिक महत्त्वाचा झाला आहे. अँटीबॉडी शोधण्याच्या विविध पद्धती अस्तित्वात आहेत, परंतु वैद्यकीय शास्त्रात फेज डिस्प्ले अँटीबॉडी लायब्ररीचा अधिक वापर केला जातो.

१९९० पासून, फेज लायब्ररी तयार करण्यासाठी VHs, VHHs, scFvs, डायबॉडीज आणि फॅब अँटीबॉडीज यांसारख्या विविध अँटीबॉडी फॉरमॅट्सचा वापर केला गेला आहे. VH आणि VL स्ट्रक्चरल डोमेन्सपासून बनलेले scFv हे सिंगल-चेन अँटीबॉडीज आहेत, जे अँटीबॉडी scFv लायब्ररी तयार करण्यासाठी वापरले जातात. scFv हे कमी अर्धायुष्य आणि कमी इम्युनोजेनिसिटीसाठी ओळखले जाते. फॅब अँटीबॉडी लायब्ररीमध्ये VH, VL, CL आणि CH1 यांचा समावेश असतो, जे उच्च आत्मीयता असलेल्या आदर्श अँटीबॉडीज जलदगतीने शोधू शकतात. लक्ष्य अँटीजेनला बांधू शकणारे सर्वात लहान एकक - VHH - सध्या नॅनोबॉडी लायब्ररी बनवते. VHH मध्ये साधी रचना, लहान आकारमान, उच्च विद्राव्यता, चांगली स्थिरता आणि सोपी तयारी व अभिव्यक्ती हे फायदे आहेत. स्थिर, उच्च-आत्मीयता असलेल्या कृत्रिम नॅनोबॉडीसाठी, कृत्रिम नॅनोबॉडी (Nb) लायब्ररी प्राण्यांच्या लसीकरणासाठी एक आकर्षक पर्याय म्हणून उदयास येत आहेत. सामान्यतः, हे अँटीबॉडी फ्रॅगमेंट M13 फेजच्या G3P शी जोडले जातात आणि अँटीबॉडी फ्रॅगमेंटसाठी कोड करणाऱ्या मोठ्या संख्येने जनुकांचे क्लोनिंग करून, मोठ्या फेज डिस्प्ले अँटीबॉडी लायब्ररी तयार केल्या जाऊ शकतात, ज्यामधून अनेक विविध अँटीबॉडीज निवडल्या जाऊ शकतात.

फेज लायब्ररी बांधकाम प्रक्रिया

फेज लायब्ररी तयार करण्याची प्रक्रिया खालीलप्रमाणे आहे: पीसीआर ॲम्प्लिफिकेशनसाठी विशिष्ट प्रायमर्स तयार केले जातात, ज्यातून उत्पादने मिळतात. ही उत्पादने T7/M13 फेज व्हेक्टरसोबत एन्झाइम-लायगेट केली जातात आणि रिकॉम्बिनंट फेज प्लास्मिड यशस्वीरित्या तयार केले जाते. रिकॉम्बिनंट फेज प्लास्मिड TG1 रिसेप्टर पेशींमध्ये ट्रान्सफॉर्म केले जाते, त्यानंतर योग्य प्रतिजैविके असलेल्या माध्यमावर लेप दिला जातो आणि ट्रान्सफॉर्मर्सची तपासणी केल्यानंतर विस्तारित कल्चर केले जाते. कल्चरच्या अनेक फेऱ्यांनंतर, फेज जीवाणूंमध्ये अनेक वेळा प्रतिकृती तयार करतो आणि लक्ष्य प्रथिन किंवा पॉलिपेप्टाइड यशस्वीरित्या व्यक्त करतो. त्यानंतर काही अशुद्धी आणि न जोडलेले फेज काढून टाकण्यासाठी फेज लायब्ररी शुद्ध केली जाते.

परिवर्तनीय क्षेत्रे (VH आणि VL) प्रतिपिंड विविधतेशी संबंधित होती, आणि PIII या फेज प्रथिनाची निर्मिती करणाऱ्या अनुक्रमासह VH आणि VL हे फेज व्हेक्टरमध्ये समाविष्ट करण्यात आले. जुळणीनंतर, फेज कणाला उघड करून मायनर कोट प्रथिन III च्या N-टर्मिनलशी जोडले जाते, ज्यामुळे एक कार्यात्मक प्रतिपिंड खंड तयार होतो आणि प्रतिपिंड DNA अनुक्रम असलेली लायब्ररी मिळते.

लसीकरण संपल्यानंतर, टायटर तपासण्यात आला आणि टायटर योग्य ठरल्यावर प्राण्याचे रक्त घेण्यात आले. रक्तामधून लिम्फोसाइट्स वेगळे केले जातात, आरएनए (RNA) काढला जातो, आरटी-पीसीआर (RT-PCR) द्वारे लक्ष्यित तुकड्याचे प्रवर्धन केले जाते आणि व्ही-रिजन जीनचा तुकडा मिळवला जातो. एका विशिष्ट प्राइमरचा वापर करून व्ही-जीनचे प्रवर्धन केले जाते.

तयार केलेल्या नैसर्गिक लायब्ररीमध्ये प्राण्यांमधील कमी रोगप्रतिकारक प्रतिपिंडे समाविष्ट असतात, जी कोणत्याही लक्ष्याला लक्ष्य करू शकतात. प्रतिजनाला स्थिर करणाऱ्या किंवा लेबल लावणाऱ्या स्क्रीनिंग तंत्रांचा वापर करून, प्रतिजनाशी विशिष्टपणे जोडली जाणारी फेज प्रतिपिंडे गोळा केली जाऊ शकतात.

लक्ष्य प्रतिजन (टार्गेट अँटीजेन) मायक्रोप्लेटच्या छिद्रासारख्या घन वाहकावर स्थिर केले जाते किंवा चुंबकीय मण्याला जोडले जाते. त्यानंतर, त्याला प्रतिजनाशी बांधण्यासाठी फेज अँटीबॉडी लायब्ररी त्यात टाकली जाते. अनेक वेळा विद्रावण (इल्यूशन) केल्यानंतर, कमी आसक्ती असलेले किंवा अविशिष्ट फेज धुवून टाकले जातात आणि विशिष्ट अँटीबॉडीज दर्शवणारे फेज टिकवून ठेवले जातात.

फेज डिस्प्लेचा वापर

आधुनिक वैद्यकशास्त्रात अँटीबॉडीचा शोध अधिकाधिक महत्त्वाचा झाला आहे. अँटीबॉडी शोधण्याच्या विविध पद्धती अस्तित्वात आहेत, परंतु वैद्यकीय शास्त्रात फेज डिस्प्ले तंत्रज्ञानाचा अधिक वापर केला जातो. १९९० पासून, फेज लायब्ररी तयार करण्यासाठी VHs, VHHs, scFvs, डायबॉडीज आणि Fab अँटीबॉडीज यांसारख्या विविध अँटीबॉडी फॉरमॅट्सचा वापर केला गेला आहे.
फेज पेप्टाइड लायब्ररींमुळे प्रथिन एपिटोप्सचा क्रम वेगाने निश्चित करता येतो आणि एपिटोप्स व अँटीजेन रिसेप्टर्स यांच्यातील आंतरक्रियेचा अभ्यास करण्यासाठी त्या एक शक्तिशाली साधन बनल्या आहेत.
अँटीबॉडीचे तुकडे M13 फेजच्या G3P ला जोडले जातात आणि अँटीबॉडीच्या तुकड्यासाठी कोड करणाऱ्या मोठ्या संख्येने जनुकांचे क्लोनिंग करून, मोठ्या फेज डिस्प्ले अँटीबॉडी लायब्ररी तयार केल्या जाऊ शकतात, ज्यामधून अनेक विविध अँटीबॉडीज निवडल्या जाऊ शकतात.
टी7 फेज डिस्प्ले सिस्टीममध्ये साधेपणा, उच्च सुरक्षितता, स्थिरता, सुलभ साठवणूक आणि वाहतूक यांसारखे अनेक फायदे आहेत, त्यामुळे ही प्रणाली प्रतिबंधात्मक आणि उपचारात्मक लसीकरणामध्ये वापरली जाते.
टी7 फेज डिस्प्ले सिस्टीम विविध अँटीजेन्स शोधू शकते, जसे की रोगजनक सूक्ष्मजीवांचे पृष्ठभागावरील अँटीजेन्स आणि कर्करोगाचे अँटीजेन्स.

फेज