Platform Pembangunan Aptamer

Aptamers ialah oligonukleotida bertali tunggal (DNA, RNA atau XNA) dengan sifat pertalian tinggi dan kekhususan tinggi yang secara khusus mengikat molekul sasaran seperti antibodi, dan ia digunakan secara meluas untuk pembangunan biosensor, diagnosis dan terapeutik.

Platform aptamer yang disediakan oleh Alpha Lifetech termasuk dua kategori: platform sintesis aptamer, yang kebanyakannya melibatkan perkhidmatan sintesis perpustakaan aptamer SELEX dan perkhidmatan pembangunan aptamer (DNA, RNA atau XNA), dan platform saringan aptamer termasuk perkhidmatan saringan berdasarkan teknologi SELEX untuk protein, peptida, sel, molekul kecil, ion logam dan pengoptimuman analisis molekul hiliran lain. perkhidmatan.

Platform Sintesis Aptamer

Perkhidmatan sintesis perpustakaan aptamer SELEX

Perkhidmatan sintesis perpustakaan aptamer SELEX terutamanya melibatkan pembinaan perpustakaan yang mengandungi sejumlah besar urutan oligonukleotida untai tunggal rawak oleh sintesis kimia in vitro mengikut molekul sasaran. Pembinaan perpustakaan ialah titik permulaan teknologi SELEX, yang menyediakan jujukan calon yang banyak untuk proses saringan seterusnya dengan membina perpustakaan rawak yang besar dan meningkatkan kemungkinan menapis aptamer pertalian tinggi.

Sintesis perpustakaan terutamanya dibahagikan kepada langkah-langkah berikut:

Langkah	Butiran Teknologi
Kenal pasti Molekul Sasaran	Kenal pasti molekul sasaran yang perlu disaring untuk aptamer, yang boleh menjadi protein, asid nukleik, molekul kecil, ion logam, dll.
Reka Bentuk Urutan Rawak	Panjang jujukan rawak, komposisi asas dan parameter lain telah direka mengikut ciri-ciri molekul sasaran dan keperluan saringan. Lazimnya, urutan rawak adalah antara puluhan dan ratusan tapak panjangnya.
Sintesis Urutan Tetap	Serpihan oligonukleotida dengan jujukan tetap (seperti jujukan primer PCR) pada kedua-dua hujungnya direka bentuk dan disintesis, yang akan digunakan dalam proses penguatan dan saringan seterusnya.

Perpustakaan yang disintesis masih perlu diproses selanjutnya untuk kawalan kualiti. Kepekatan perpustakaan ditentukan untuk memastikan kebolehgunaannya dalam proses saringan seterusnya. Kepelbagaian dan ketepatan jujukan rawak di perpustakaan telah disahkan dengan penjujukan dan kaedah lain untuk memastikan kualiti perpustakaan memenuhi keperluan saringan.

Melalui langkah-langkah di atas, perpustakaan aptamer SELEX yang berkualiti tinggi dan sangat pelbagai boleh disintesis, yang boleh menyediakan jujukan calon yang banyak untuk proses saringan seterusnya.

Perkhidmatan pembangunan Aptamer (DNA, RNA atau XNA)

Aptamer biasanya merujuk kepada aptamer asid nukleik. Aptamer asid nukleik merangkumi aptamer DNA, aptamer RNA, dan aptamer XNA yang merupakan aptamer asid nukleik yang diubah suai secara kimia. Teknik SELEX digunakan secara meluas untuk pembangunan aptamers. Aliran kerja asas perkhidmatan pembangunan aptamer termasuk pembinaan perpustakaan, pengikatan sasaran, pengasingan dan penulenan, penguatan, berbilang pusingan saringan dan pengenalpastian jujukan. Selama bertahun-tahun, kami telah memberi tumpuan kepada pembinaan perpustakaan dan pengalaman yang kaya dalam pembangunan aptamer. Kami komited untuk menyediakan pelanggan dengan perkhidmatan yang lebih baik.

Proses Teknologi SELEX

Proses SELEX terdiri daripada berbilang pusingan, setiap satu daripadanya terdiri daripada langkah utama berikut:

Perpustakaan dan Pengikatan Sasaran

Pustaka asid nukleik yang dibina dicampur dengan molekul sasaran tertentu (seperti protein, sebatian molekul kecil, dll.), supaya jujukan asid nukleik dalam perpustakaan mempunyai peluang untuk mengikat molekul sasaran.

Pengasingan Molekul Tidak Terikat

Urutan asid nukleik yang tidak terikat pada molekul sasaran diasingkan daripada campuran dengan kaedah tertentu seperti kromatografi pertalian, pemisahan manik magnetik, dsb.

Penguatan Molekul Pengikat

Urutan asid nukleik yang terikat pada molekul sasaran dikuatkan, biasanya menggunakan teknologi tindak balas rantai polimerase (PCR). Untuk fasa saringan seterusnya, jujukan yang dikuatkan akan digunakan sebagai perpustakaan permulaan.

Rajah 1: Proses saringan ELEX

Platform Tayangan Aptamer

Perkhidmatan saringan Aptamer

Alpha Lifetech menawarkan pelbagai perkhidmatan saringan aptamer khusus yang menggunakan pelbagai metodologi SELEX untuk pelbagai jenis molekul anda:

Jenis Sasaran	Butiran Teknikal
Pemeriksaan Aptamer Protein oleh SELEX	Tujuan utama pemeriksaan aptamer protein adalah untuk menyaring aptamer yang secara khusus boleh mengikat molekul protein sasaran. Aptamer ini lebih mudah untuk disintesis, lebih stabil dan kurang terdedah kepada faktor persekitaran.
Pemeriksaan Peptide Aptamer oleh SELEX	Aptamer peptida ialah kelas jujukan peptida pendek dengan kekhususan dan pertalian tinggi, yang secara khusus boleh mengikat bahan sasaran dan menunjukkan pelbagai potensi aplikasi dalam bidang bioperubatan. Melalui proses penyaringan tertentu, aptamer peptida yang secara khusus boleh mengikat molekul sasaran disaring daripada sejumlah besar perpustakaan jujukan peptida rawak.
Pemeriksaan Aptamer khusus sel (Sel-SELEX)	Sel sasaran atau molekul tertentu pada permukaan sel disediakan sebagai sasaran. Sasaran boleh menjadi sel keseluruhan, reseptor pada membran sel, protein, atau molekul kecil lain.
Saringan Aptamer Molekul Kecil oleh Tangkapan SELEX	Tangkap SELEX ialah teknik saringan in vitro untuk saringan aptamer molekul kecil, yang merupakan varian SELEX. Tangkapan SELEX amat sesuai untuk penyaringan aptamer bagi sasaran molekul kecil, yang biasanya mempunyai kumpulan berfungsi yang lebih sedikit dan sukar untuk diimobilisasi secara langsung pada sokongan fasa pepejal.
Perkhidmatan SELEX berasaskan Haiwan secara langsung	Perkhidmatan saringan berasaskan haiwan secara langsung ialah teknik eksperimen yang digunakan secara meluas dalam bidang biosains, perubatan dan bioteknologi, yang menggunakan haiwan hidup sebagai model eksperimen untuk menyaring dan menilai molekul, pakar perubatan, terapeutik atau proses biologi tertentu. Perkhidmatan ini direka bentuk untuk mensimulasikan persekitaran fisiologi dalam tubuh manusia untuk meramal dan menilai dengan lebih tepat dan menilai keberkesanan dan keselamatan keputusan eksperimen dalam tubuh manusia.

Perkhidmatan pengoptimuman Aptamer

Hidrofilisiti, kehilangan pertalian tinggi semasa pengeluaran, dan perkumuhan pantas aptamer mengehadkan penggunaannya. Pada masa ini, pelbagai kaedah pengoptimuman telah diterokai untuk meningkatkan prestasi aptamer.

Kami juga mempunyai pelbagai cara untuk mengoptimumkan aptamer yang terdiri daripada pemotongan, pengubahsuaian, konjugasi kepada kumpulan yang sesuai (tiol, karboksi, amina, fluorophore, dll.).

Perkhidmatan analisis pencirian Aptamer

Perkhidmatan analisis pencirian Aptamer merujuk kepada perkhidmatan profesional resolusi struktur penilaian prestasi dan pengesahan fungsi aptamer yang diperolehi untuk memastikan aptamer memenuhi keperluan keupayaan mengikat, kestabilan dan kekhususan tertentu. Ia terutamanya termasuk analisis pertalian dan kekhususan, penilaian kestabilan dan pengesahan fungsi biologi.