Pengenalan kepada Perpustakaan Antibodi Disintesis

Pustaka antibodi tersintesis, juga dikenali sebagai perpustakaan De novo, ialah kaedah sintetik yang menggunakan teknik seperti sintesis DNA atau paparan faj untuk mereka bentuk dan mensintesis kawasan pembolehubah antibodi lengkap, termasuk kawasan rangka kerja dan CDR, tanpa bergantung pada perpustakaan antibodi naif.

Perpustakaan antibodi separa sintetik dicipta dengan menggabungkan perpustakaan antibodi yang wujud secara semula jadi dengan kepelbagaian sintetik. Ia biasanya melibatkan sintesis DNA oligonukleotida untuk menghasilkan satu set kawasan penentu pelengkap (CDR) yang berbeza, yang kemudiannya digabungkan dengan rangka kerja antibodi berterusan yang diperoleh daripada sumber semula jadi seperti sel B manusia atau haiwan. CDR yang disintesis memperkenalkan kepelbagaian ke dalam perpustakaan, menghasilkan antibodi yang menyasarkan pelbagai epitop. Perpustakaan antibodi separa sintetik menyediakan kompromi antara kepelbagaian semula jadi sistem imun dan kepelbagaian terkawal yang dicapai melalui kaedah sintetik.

Perbezaan antara perpustakaan antibodi naif dan sintetik bergantung pada sumber gen imunoglobulin. Sementara itu, perbezaan antara perpustakaan antibodi separa disintesis dan disintesis terletak pada yang bekas terdiri daripada sebahagian daripada segmen antibodi naif, seperti rantai ringan atau rantai berat, dan hanya satu daripadanya disintesis secara in vitro; manakala yang disintesis sepenuhnya diperoleh daripada sintesis buatan oleh PCR secara in vitro.

Alpha Lifetech boleh Menyediakan

Alpha Lifetech Inc.boleh menawarkan perpustakaan antibodi separuh disintesis/ disintesis daripada haiwan dan manusia berdasarkan platform penemuan antibodi profesional kami. Dengan pengalaman bertahun-tahun dalam pengubahsuaian genetik dan pembinaan perpustakaan, perpustakaan tersintesis boleh dibina yang mampu menghasilkan antibodi sintetik dengan pertalian dan kekhususan melebihi kapasiti antibodi semula jadi.Alpha Lifetech'spakar dengan bangganya mengumumkan bahawa kami boleh menjamin kadar kejayaan yang tinggi dalam pembinaan perpustakaan antibodi yang mengandungi klon bebas 10^8 – 10^10.

Alpha Lifetech Inc.berbangga menawarkan perkhidmatan pembinaan perpustakaan antibodi yang komprehensif untuk memenuhi pelbagai keperluan penyelidik global, termasuk scFv, Fab, antibodi VHH dan perpustakaan tersuai. Matlamat kami adalah untuk memahami dan memenuhi permintaan pelanggan yang berbeza dan untuk membantu sebarang masalah yang akan datang dan timbul dalam kerja penyelidikan.

Proses Perkhidmatan Pembinaan Perpustakaan Antibodi Disintesis

Reka bentuk
Fasa reka bentuk melibatkan pemilihan rangka kerja antibodi dan kawasan penentu komplementari (CDR) berdasarkan jujukan antibodi atau data struktur sedia ada. Antibodi CDR sintetik juga boleh direka bentuk untuk memperkenalkan fungsi tertentu atau meningkatkan sifat pengikatan.

Sintesis
Pengekodan DNA sintetik urutan antibodi yang direka, termasuk kedua-dua kawasan rangka kerja dan CDR, disintesis menggunakan kaedah kimia atau enzim.

Perhimpunan
Serpihan DNA yang disintesis dipasang ke dalam vektor ekspresi antibodi menggunakan teknik seperti PCR, ligation, atau pemasangan Gibson. Vektor ini kemudiannya boleh diperkenalkan ke dalam sistem ekspresi seperti bakteria, yis, atau sel mamalia untuk penghasilan antibodi.

Saringan dan Pemilihan
Perpustakaan antibodi yang dibina disaring dan dipilih untuk antibodi dengan sifat yang diingini menggunakan kaedah penapisan tinggi. Ini mungkin melibatkan teknik seperti paparan faj, paparan yis atau paparan ribosom, bergantung pada format dan aplikasi perpustakaan.

Perkhidmatan Pembinaan Perpustakaan Antibodi Tersintesis

Alpha Lifetech Inc.menyediakan pelanggan dengan reka bentuk sehenti dan perkhidmatan pustaka antibodi yang disintesis dengan mengikat repertoir gen V rantaian berat dan ringan menjadi vektor phage menggunakan sistem penggabungan semula khusus tapak Cre-lox untuk mencipta himpunan Fabs yang dipaparkan pada phage yang terdiri daripada klon 6.5 × 10^10. Perpustakaan menghasilkan Abs terhadap banyak antigen, beberapa dengan pertalian nanomolar. Penjanaan perpustakaan antibodi manusia adalah berdasarkan teknologi paparan phage M13 (ditunjukkan dalam rajah di bawah).