Pengenalan kepada Perpustakaan Antibodi Sintesis

Pustaka antibodi yang disintesis, juga dikenali sebagai pustaka De novo, ialah kaedah sintetik yang menggunakan teknik seperti sintesis DNA atau paparan faj untuk mereka bentuk dan mensintesis kawasan pembolehubah antibodi yang lengkap, termasuk kawasan rangka kerja dan CDR, tanpa bergantung pada pustaka antibodi naif.

Pustaka antibodi separa sintetik dicipta dengan menggabungkan pustaka antibodi yang berlaku secara semula jadi dengan kepelbagaian sintetik. Ia biasanya melibatkan sintesis oligonukleotida DNA untuk menghasilkan satu set kawasan penentu pelengkap (CDR) yang berbeza, yang kemudiannya digabungkan dengan rangka kerja antibodi malar yang diperoleh daripada sumber semula jadi seperti sel B manusia atau haiwan. CDR yang disintesis memperkenalkan kepelbagaian ke dalam pustaka, menghasilkan antibodi yang menyasarkan pelbagai epitop. Pustaka antibodi separa sintetik menyediakan kompromi antara kepelbagaian semula jadi sistem imun dan kepelbagaian terkawal yang dicapai melalui kaedah sintetik.

Perbezaan antara perpustakaan antibodi naif dan sintetik bergantung pada sumber gen imunoglobulin. Sementara itu, perbezaan antara perpustakaan antibodi separa sintesis dan sintesis terletak pada perpustakaan antibodi separa sintesis yang terdiri daripada sebahagian segmen antibodi naif, seperti rantai ringan atau rantai berat, dan hanya satu daripadanya disintesis secara in vitro; manakala perpustakaan yang disintesis diperoleh sepenuhnya daripada sintesis buatan melalui PCR secara in vitro.

Alpha Lifetech boleh Menyediakan

Alpha Lifetech Inc.boleh menawarkan perpustakaan antibodi separa sintesis/sintesis daripada haiwan dan manusia berdasarkan platform penemuan antibodi profesional kami. Dengan pengalaman bertahun-tahun dalam pengubahsuaian genetik dan pembinaan perpustakaan, perpustakaan yang disintesis boleh dibina yang mampu menghasilkan antibodi sintetik dengan afiniti dan kekhususan melebihi kapasiti antibodi semula jadi.Alpha Lifetech'sPakar-pakar dengan bangganya mengumumkan bahawa kami dapat menjamin kadar kejayaan yang tinggi dalam pembinaan perpustakaan antibodi yang mengandungi 10^8 – 10^10 klon bebas.

Alpha Lifetech Inc.dengan bangganya menawarkan perkhidmatan pembinaan perpustakaan antibodi yang komprehensif untuk memenuhi pelbagai keperluan penyelidik global, termasuk scFv, Fab, antibodi VHH dan perpustakaan tersuai. Matlamat kami adalah untuk memahami dan memenuhi permintaan pelanggan yang berbeza dan untuk membantu sebarang masalah yang akan datang dan timbul dalam kerja penyelidikan.

Proses Perkhidmatan Pembinaan Perpustakaan Antibodi Tersintesis

Reka Bentuk
Fasa reka bentuk melibatkan pemilihan rangka kerja antibodi dan kawasan penentu komplementariti (CDR) berdasarkan jujukan antibodi atau data struktur sedia ada. Antibodi CDR sintetik juga boleh direka bentuk untuk memperkenalkan fungsi tertentu atau meningkatkan sifat pengikatan.

Sintesis
DNA sintetik yang mengekod jujukan antibodi yang direka bentuk, termasuk kedua-dua kawasan rangka kerja dan CDR, disintesis menggunakan kaedah kimia atau enzimatik.

Perhimpunan
Serpihan DNA yang disintesis dikumpulkan menjadi vektor ekspresi antibodi menggunakan teknik seperti PCR, ligasi atau pemasangan Gibson. Vektor ini kemudiannya boleh diperkenalkan ke dalam sistem ekspresi seperti sel bakteria, yis atau mamalia untuk penghasilan antibodi.

Saringan dan Pemilihan
Pustaka antibodi yang dibina ditapis dan dipilih untuk antibodi dengan sifat yang diingini menggunakan kaedah saringan daya pemprosesan tinggi. Ini mungkin melibatkan teknik seperti paparan fag, paparan yis atau paparan ribosom, bergantung pada format dan aplikasi perpustakaan.

Perkhidmatan Pembinaan Perpustakaan Antibodi Tersintesis

Alpha Lifetech Inc.menyediakan pelanggan dengan reka bentuk sehenti dan perkhidmatan sintesis perpustakaan antibodi dengan mengikat repertoir gen-V rantai berat dan ringan ke dalam vektor faj menggunakan sistem penggabungan semula khusus tapak Cre-lox untuk mencipta repertoir Fab yang dipaparkan pada faj yang terdiri daripada 6.5 × 10^10 klon. Perpustakaan tersebut menghasilkan Abs terhadap pelbagai antigen, ada yang mempunyai afiniti nanomolar. Penjanaan perpustakaan antibodi manusia adalah berdasarkan teknologi paparan faj M13 (ditunjukkan dalam rajah di bawah).