Pjattaforma ta' Żvilupp ta' Aptamer

L-aptameri huma oligonukleotidi b'fergħa waħda (DNA, RNA jew XNA) bil-proprjetà ta' affinità għolja u speċifiċità għolja li jorbtu speċifikament ma' molekuli fil-mira bħal antikorpi, u jintużaw b'mod estensiv għall-iżvilupp ta' bijosensuri, dijanjosi u terapiji.

Il-pjattaforma tal-aptamer ipprovduta minn Alpha Lifetech tinkludi żewġ kategoriji: pjattaforma tas-sintesi tal-aptamer, li tinvolvi prinċipalment is-servizz tas-sintesi tal-librerija tal-aptamer SELEX u s-servizz tal-iżvilupp tal-aptamer (DNA, RNA jew XNA), u pjattaforma ta' skrinjar tal-aptamer inklużi servizzi ta' skrinjar ibbażati fuq it-teknoloġija SELEX għal proteini, peptidi, ċelloli, molekuli żgħar, joni tal-metall u molekuli oħra fil-mira, kif ukoll servizzi downstream ta' ottimizzazzjoni u analiżi tal-identifikazzjoni tal-aptamer.

Pjattaforma tas-Sinteżi tal-Aptamer

Servizz ta' sinteżi tal-librerija tal-aptamer SELEX

Is-servizz tas-sintesi tal-librerija tal-aptameri SELEX jinvolvi prinċipalment il-kostruzzjoni ta' librerija li fiha numru kbir ta' sekwenzi każwali ta' oligonukleotidi b'fergħa waħda permezz ta' sinteżi kimika in vitro skont il-molekuli fil-mira. Il-kostruzzjoni tal-librerija hija l-punt tat-tluq tat-teknoloġija SELEX, li tipprovdi sekwenzi kandidati abbundanti għall-proċess sussegwenti ta' skrinjar billi tibni libreriji każwali enormi u żżid il-possibbiltà ta' skrinjar ta' aptameri b'affinità għolja.

Is-sintesi tal-librerija hija prinċipalment maqsuma fil-passi li ġejjin:

Passi	Dettalji tat-Teknoloġija
Identifika l-Molekuli fil-Mira	Identifika l-molekuli fil-mira li jeħtieġ li jiġu skrinjati għall-aptameri, li jistgħu jkunu proteini, aċidi nuklejċi, molekulari żgħar, joni tal-metall, eċċ.
Disinn ta' Sekwenza każwali	It-tul tas-sekwenza każwali, il-kompożizzjoni tal-bażijiet u parametri oħra ġew iddisinjati skont il-karatteristiċi tal-molekuli fil-mira u r-rekwiżiti tal-iskrinjar. Tipikament, is-sekwenzi każwali huma bejn għexieren u mijiet ta' bażijiet fit-tul.
Sintesi ta' Sekwenzi Fissi	Frammenti ta' oligonukleotidi b'sekwenzi fissi (bħal sekwenzi ta' primers tal-PCR) fiż-żewġt itruf huma ddisinjati u sintetizzati, li se jintużaw fil-proċess sussegwenti ta' amplifikazzjoni u skrining.

Il-librerija sintetizzata għad trid tiġi pproċessata aktar għall-kontroll tal-kwalità. Il-konċentrazzjoni tal-librerija ġiet determinata biex tiġi żgurata l-applikabbiltà tagħha fil-proċess sussegwenti ta' skrinjar. Id-diversità u l-eżattezza tas-sekwenzi każwali fil-librerija ġew verifikati permezz ta' sekwenzar u metodi oħra biex jiġi żgurat li l-kwalità tal-librerija ssodisfat ir-rekwiżiti tal-iskrinjar.

Permezz tal-passi ta' hawn fuq, tista' tiġi sintetizzata librerija ta' aptameri SELEX ta' kwalità għolja u diversa ħafna, li tista' tipprovdi sekwenzi kandidati abbundanti għall-proċess ta' skrinjar sussegwenti.

Servizzi ta' żvilupp ta' aptameri (DNA, RNA jew XNA)

Aptameri ġeneralment jirreferu għal aptameri tal-aċidu nuklejku. L-aptameri tal-aċidu nuklejku jinkludu aptameri tad-DNA, aptameri tal-RNA, u aptameri XNA li huma aptameri tal-aċidu nuklejku modifikati kimikament. It-teknika SELEX tintuża ħafna għall-iżvilupp ta' aptameri. Il-fluss tax-xogħol bażiku tas-servizzi tal-iżvilupp tal-aptameri jinkludi l-kostruzzjoni tal-librerija, l-irbit tal-mira, l-iżolament u l-purifikazzjoni, l-amplifikazzjoni, rawnds multipli ta' skrinjar, u l-identifikazzjoni tas-sekwenza. Għal ħafna snin, iffukajna fuq il-kostruzzjoni tal-librerija u esperjenza rikka fl-iżvilupp tal-aptameri. Aħna impenjati li nipprovdu lill-klijenti servizzi aħjar.

Proċess tat-Teknoloġija SELEX

Il-proċess SELEX jikkonsisti f'diversi rawnds, li kull wieħed minnhom jikkonsisti fil-passi ewlenin li ġejjin:

Irbit tal-Librerija u l-Mira

Il-librerija tal-aċidu nuklejku mibnija titħallat ma' molekuli fil-mira speċifiċi (bħal proteini, komposti ta' molekuli żgħar, eċċ.), sabiex is-sekwenzi tal-aċidu nuklejku fil-librerija jkollhom l-opportunità li jingħaqdu mal-molekuli fil-mira.

Iżolament ta' Molekuli Mhux Marbuta

Sekwenzi ta' aċidu nuklejku li mhumiex marbuta mal-molekula fil-mira huma separati mit-taħlita b'metodi speċifiċi bħal kromatografija ta' affinità, separazzjoni ta' żibeġ manjetiċi, eċċ.

Amplifikazzjoni ta' Molekuli li Jorbtu

Is-sekwenza tal-aċidu nuklejku marbuta ma' molekula fil-mira tiġi amplifikata, ġeneralment bl-użu tat-teknoloġija tar-reazzjoni katina tal-polimerażi (PCR). Għall-fażi sussegwenti tal-iskrinjar, is-sekwenzi amplifikati se jintużaw bħala l-librerija tal-bidu.

Figura 1: Il-proċess ta' skrinjar SELEX

Pjattaforma tal-Iskrinjar tal-Aptamer

Servizz ta' skrinjar tal-aptamer

Alpha Lifetech toffri firxa diversa ta’ servizzi speċjalizzati ta’ skrinjar tal-aptameri li japplikaw diversi metodoloġiji SELEX għal tipi differenti tal-molekuli tiegħek:

Tipi ta' Miri	Dettalji Tekniċi
Skrining tal-Aptamer tal-Proteina minn SELEX	L-iskop ewlieni tal-iskrinjar tal-aptameri tal-proteini huwa li jiġu skrinjati l-aptameri li jistgħu jingħaqdu speċifikament ma' molekuli tal-proteini fil-mira. Dawn l-aptameri huma aktar sempliċi biex jiġu sintetizzati, aktar stabbli u inqas suxxettibbli għal fatturi ambjentali.
Skrining tal-Aptamer tal-Peptidi minn SELEX	L-aptameri peptidiċi huma klassi ta' sekwenzi qosra ta' peptidi b'speċifiċità u affinità għolja, li jistgħu jorbtu speċifikament ma' sustanzi fil-mira u juru firxa wiesgħa ta' potenzjal ta' applikazzjoni fil-qasam bijomediku. Permezz ta' proċess speċifiku ta' skrinjar, l-aptameri peptidiċi li jistgħu jorbtu speċifikament ma' molekuli fil-mira jiġu skrinjati minn numru kbir ta' libreriji ta' sekwenzi ta' peptidi każwali.
Skrining tal-Aptamer Speċifiku għaċ-Ċellula (Cell-SELEX)	Ċelloli fil-mira jew molekuli speċifiċi fuq il-wiċċ taċ-ċellula huma ppreparati bħala miri. Il-miri jistgħu jkunu ċelloli sħaħ, riċetturi fuq il-membrana taċ-ċellula, proteini, jew molekuli żgħar oħra.
Skrinjar ta' Aptamer ta' Molekula Żgħira permezz ta' Capture SELEX	Capture SELEX hija teknika ta' skrinjar in vitro għall-iskrinjar ta' aptameri ta' molekuli żgħar, li hija varjant ta' SELEX. Capture SELEX hija partikolarment adattata għall-iskrinjar tal-aptameri ta' miri ta' molekuli żgħar, li tipikament ikollhom inqas gruppi funzjonali u huma diffiċli biex jiġu immobilizzati direttament fuq appoġġi ta' fażi solida.
Servizzi SELEX ibbażati fuq annimali ħajjin	Servizz ta' skrinjar ibbażat fuq annimali ħajjin huwa teknika sperimentali użata ħafna fl-oqsma tax-xjenza bijoloġika, il-mediċina u l-bijoteknoloġija, li tuża annimali ħajjin bħala mudelli sperimentali biex tiskrinja u tevalwa molekuli speċifiċi, mediċina, terapiji jew proċessi bijoloġiċi. Is-servizzi huma mfassla biex jissimulaw l-ambjent fiżjoloġiku fil-ġisem tal-bniedem biex ibassru u jevalwaw b'mod aktar preċiż l-effikaċja u s-sigurtà tar-riżultati sperimentali fil-ġisem tal-bniedem.

Servizz ta' ottimizzazzjoni tal-Aptamer

L-idrofiliċità, it-telf għoli ta' affinità waqt il-produzzjoni, u l-eskrezzjoni rapida tal-aptameri jillimitaw l-applikazzjoni tagħhom. Fil-preżent, ġew esplorati varjetà ta' metodi ta' ottimizzazzjoni biex titjieb il-prestazzjoni tal-aptameri.

Għandna wkoll varjetà ta' modi kif nottimizzaw l-aptamer li jikkonsistu minn truncazzjoni, modifiki, konjugazzjoni mal-grupp xieraq (thiol, carboxy, amine, fluorophore, eċċ.).

Servizz ta' analiżi tal-karatterizzazzjoni tal-aptamer

Is-servizz tal-analiżi tal-karatterizzazzjoni tal-aptamer jirreferi għas-servizz professjonali ta' evalwazzjoni tal-prestazzjoni, riżoluzzjoni tal-istruttura u verifika funzjonali tal-aptamer miksub biex jiġi żgurat li l-aptamer jissodisfa l-abbiltà speċifika ta' rbit, rekwiżiti ta' stabbiltà u speċifiċità. Dan jinkludi prinċipalment analiżi tal-affinità u l-ispeċifiċità, evalwazzjoni tal-istabbiltà u verifika tal-funzjoni bijoloġika.