Fl-1960, ġie propost il-kunċett ta' antikorpi bispeċifiċi. L-antikorpi bispeċifiċi, magħrufa wkoll bħala antikorpi monoklonali bispeċifiċi, huma antikorpi sintetizzati artifiċjalment bl-użu tat-teknoloġija tal-inġinerija ġenetika. Bħala antikorp artifiċjali inġinerizzat, l-antikorpi bispeċifiċi ġeneralment jappartjenu għas-sottoklassi IgG u fihom framment ta' rbit tal-antiġen li jimmira lejn is-subunità CD3. L-antikorpi bispeċifiċi għandhom żewġ siti ta' rbit tal-antiġen speċifiċi li jistgħu jorbtu u jagħrfu simultanjament żewġ antiġeni differenti, jew żewġ epitopi differenti ta' antiġen. Meta mqabbla mal-antikorpi monoklonali, l-antikorpi bispeċifiċi għandhom sit ta' rbit tal-antiġen speċifiku addizzjonali, u b'hekk jippossjedu speċifiċità u kapaċità ta' mira aktar b'saħħithom, li jistgħu jimmiraw b'mod aktar preċiż lejn iċ-ċelloli tat-tumur u jnaqqsu t-tossiċità barra mill-mira. L-antikorpi bispeċifiċi jistgħu jwettqu simultanjament funzjonijiet bijoloġiċi multipli, bħar-reklutaġġ ta' ċelloli immuni, l-imblukkar ta' mogħdijiet ta' sinjalazzjoni, u l-qtil dirett taċ-ċelloli tat-tumur. L-antikorpi bispeċifiċi bikrija kienu prinċipalment ippreparati permezz ta' konjugazzjoni kimika jew fużjoni taċ-ċelloli, iżda dan il-metodu seta' mexa bil-mod minħabba l-kombinazzjoni każwali u d-diffikultà fl-iżolament tal-kombinazzjoni fil-mira. Bl-iżvilupp kontinwu tat-teknoloġija tal-inġinerija ġenetika, ġew żviluppati ħafna pjattaformi teknoloġiċi ġodda, bħal knots in holes (KIH), CrossMab, DVD Ig, eċċ. Dawn il-pjattaformi jsolvu b'mod effettiv problemi bħal nuqqas ta' qbil bejn il-katina tqila u l-katina ħafifa, u jtejbu l-uniformità u r-rendiment tal-antikorpi bispeċifiċi.

Il-metodi ewlenin għall-produzzjoni ta' antikorpi bispeċifiċi jinkludu akkoppjar kimiku, ibridomi b'erba' sorsi, u preparazzjoni ta' antikorpi ta' inġinerija ġenetika. Fost dawn, il-metodu ta' akkoppjar kimiku jgħaqqad żewġ frammenti ta' antikorpi IgG intatti jew żewġ frammenti ta' antikorpi F(ab')2 f'antikorpi bispeċifiċi bl-użu ta' aġenti ta' akkoppjar kimiku bħal ftalimide u aċidu ditijoaċilbenżojku. Dan il-metodu huwa sempliċi u faċli biex jitħaddem, iżda jista' jagħmel ħsara lis-sit ta' rbit tal-antiġen, inaqqas l-attività tal-antikorpi, u l-aġent ta' akkoppjar innifsu għandu wkoll ċertu grad ta' karċinoġeniċità. Il-metodu ta' ibridomi b'erba' sorsi huwa bbażat fuq il-fużjoni ta' ċelloli somatiċi minn żewġ linji ta' ċelloli ibridomi differenti biex jesprimu l-IgG tal-ġrieden korrispondenti. Permezz tat-teknoloġija tal-inġinerija ġenetika, l-antikorpi jistgħu jiġu modifikati ġenetikament biex jiffurmaw antikorpi bispeċifiċi. Żewġ antikorpi monoklonali differenti ġew mibnija, u l-frammenti Fab jew ir-reġjuni varjabbli tal-katina tqila u tal-katina ħafifa taż-żewġ antikorpi ġew maqsuma separatament. Permezz ta' reazzjoni ta' cross-linking jew teknoloġija ta' rikombinazzjoni tal-katina, iż-żewġ frammenti ġew ikkombinati biex jiffurmaw antikorp bispeċifiku. Għalkemm il-kumplessità tat-teknoloġija tal-inġinerija ġenetika hija relattivament għolja, bħalissa huwa l-aktar metodu użat komunement għall-produzzjoni ta' antikorpi bispeċifiċi biex taġġusta l-istruttura u l-funzjoni tal-antikorpi. Meta jitwettaq disinn ta' antikorpi bispeċifiċi, jista' jintuża l-prinċipju tar-reattività inkroċjata tal-antikorpi, iżda r-reattività inkroċjata tal-antikorpi tista' tikkawża reazzjonijiet mhux speċifiċi, għalhekk dan se jiġi kkunsidrat bir-reqqa fl-applikazzjoni prattika tad-disinn ta' antikorpi bispeċifiċi, bħat-terapija ta' antikorpi bispeċifiċi.

Il-purifikazzjoni tal-antikorpi bispeċifiċi hija l-proċess ta' iżolament u purifikazzjoni ta' antikorpi fil-mira ta' purità għolja. Żewġ metodi, ċentrifugazzjoni u filtrazzjoni profonda, jintużaw biex jitneħħew xi impuritajiet solubbli. L-antikorp bispeċifiku fil-mira inizjalment jinqabad permezz ta' kromatografija ta' affinità. Għal antikorpi bispeċifiċi simili għal IgG, tintuża kromatografija ta' affinità tal-proteina A, filwaqt li għal antikorpi bispeċifiċi mhux simili għal IgG, tista' tintuża kromatografija ta' affinità bbażata fuq katina ħafifa. Wara, l-antikorp jiġi inkubat taħt kundizzjonijiet ta' pH baxx għal ċertu perjodu ta' żmien, u dan jikkawża li l-istruttura tal-proteina fuq il-wiċċ tal-qoxra tal-virus tiġi mfixkla, u b'hekk titlef il-kapaċità li tinfetta ċ-ċelloli. Filtrazzjoni profonda intermedja titwettaq biex jitneħħew aktar impuritajiet bħal proteini taċ-ċelluli ospitanti (HCP). Il-purità tal-antikorpi titjieb permezz ta' metodi bħall-kromatografija tal-iskambju tal-joni, u kwalunkwe virus residwu jitneħħa permezz ta' tekniki ta' nanofiltrazzjoni jew ultrafiltrazzjoni. Fl-aħħarnett, il-kampjun jiġi kkonċentrat u mibdul b'buffer ta' formulazzjoni adattat.