Servizz ta' Skoperta ta' Antikorpi scFv

Alpha Lifetech Inc.hija kburija li toffri servizzi komprensivi ta' kostruzzjoni ta' libreriji scFv biex tissodisfa l-bżonnijiet diversi tax-xjenzati globali. L-għan tagħna huwa li nifhmu u nilħqu t-talbiet ta' klijenti differenti u li ngħinu bi kwalunkwe problema li ġejja u emerġenti fix-xogħol ta' riċerka.

X'inhu scFv- Antikorp b'Framment Varjabbli ta' Katina Unika?

Antikorp b'katina waħda jikkonsisti minn framment ħafif varjabbli ta' antikorp (VL) u framment tqil (VH) magħqud permezz ta' linker peptidiku flessibbli, li jista' jiġi espress faċilment f'forma funzjonali fuq il-wiċċ tal-faġ u għalhekk huwa magħruf komunement bħala framment varjabbli b'katina waħda (scFv). Il-framment scFv huwa l-iżgħar unità ta' molekula ta' immunoglobulina (ħlief in-nanobodies) b'funzjoni f'attivitajiet ta' rbit mal-antiġen u jippermetti li l-inġinerija tal-proteini ttejjeb il-proprjetajiet ta' scFv (framment varjabbli ta' katina waħda) bħaż-żieda fl-affinità u l-alterazzjoni tal-ispeċifiċità. F'Alpha Lifetech Inc., l-antikorpi scFv inbnew prinċipalment minn ibridoma, ċelluli tal-milsa minn ġrieden immunizzati, u limfoċiti B minn bnedmin. L-RNA totali jew l-mRNA jiġi iżolat l-ewwel mill-ibridoma, il-milsa, iċ-ċelluli tal-limfa, u ċ-ċelluli tal-mudullun segwit minn traskrizzjoni inversa f'cDNA biex iservi bħala mudell għall-amplifikazzjoni tal-ġeni tal-antikorpi (PCR).

Żvilupp ta' Antikorpi scFv - Teknoloġija tal-Wiri tal-Fagi

Id-diversità ta' librerija hija determinata min-numru ta' kloni indipendenti. Biex tipproduċi librerija ta' antikorpi scFv ta' daqs kbir, ix-xjentisti tagħna se jużaw l-istrateġija proprjetarja tagħna f'żewġ stadji għall-ġenerazzjoni tal-librerija. Fl-ewwel pass tal-proċedura deskritta, ir-repertorji primarji huma ppreparati minn prodotti PCR li jikkodifikaw id-dominji VH, Vκ, u Vλ, li jipproduċu libreriji tipiċi ta' daqs medju (1 - 100 miljun klonu). Fit-tieni pass, il-frammenti VH (jew VL) huma iżolati permezz tad-diġestjoni tad-DNA tal-plażmid purifikat mir-repertorji primarji u kklonati fil-vettur faġemid aċċettur li fih ir-repertorji VL (jew VH). Din l-innovazzjoni żżid id-daqs tal-libreriji b'mod drammatiku (10¹⁰-10¹²kloni).

Skrining fuq skala kbira u b'rendiment għoli ta' antikorpi scFv

Għal preparazzjoni fuq skala kbira ta' scFv, huwa evidenti li l-għażla tal-ospitant tal-espressjoni se jkollha impatt sinifikanti fuq id-disinn tal-proċess, l-istrateġiji tal-ipproċessar downstream, u l-ispiża tal-proċess. L-għażla tar-rotta tal-manifattura se tiddependi mir-rilevanza tal-modifika post-traduzzjoni u l-iskeda ta' żmien għall-iżvilupp kliniku u l-ekonomija, li huma wkoll essenzjalment dipendenti mis-'sistema ospitanti'. M'hemm l-ebda sistema ta' espressjoni universali li tiżgura livelli għoljin ta' espressjoni tal-prodott għal firxa wiesgħa ta' antikorpi differenti jew saħansitra proteini.