Servizz ta' Kostruzzjoni ta' Linji taċ-Ċelloli Stabbli

Alpha Lifetech ilha involuta profondament fil-qasam tal-iżvilupp tal-proċess tal-kostruzzjoni ta' linji ta' ċelluli stabbli għal ħafna snin. Bniet pjattaforma perfetta għall-proċess tal-kostruzzjoni ta' linji ta' ċelluli stabbli, b'aktar minn 300 tip ta' ċelluli tat-tumur u ċelluli primarji, li jistgħu jwasslu linji ta' ċelluli stabbli filwaqt li jiffrankaw il-ħin għar-riċerka xjentifika jew riċerka ta' proġetti, u jiffaċilitaw il-produzzjoni sussegwenti. Alpha Lifetech tista' wkoll tipprovdi lill-klijenti b'servizzi bħall-iżvilupp tal-proċess tar-razza, l-iskrinjar tar-razza, il-kostruzzjoni tar-razza, il-proteina rikombinanti, u l-produzzjoni ta' antikorpi, u tipprovdi bażi ta' riċerka għal drogi ġodda.

Alpha Lifetech għandha pjattaforma ta' ċelluli infettati bil-lentivirus, li tista' tippersonalizza l-proċess sperimentali għal tipi differenti ta' razez ta' transmutazzjoni stabbli taċ-ċelluli. Użajna t-teknoloġija tal-knockout tal-ġeni biex nibnu linji ta' ċelluli CRISPR/Cas9 knockout. Tekniki ta' espressjoni żejda tal-ġeni u silenzjar tal-ġeni ntużaw biex jistabbilizzaw ir-razez ta' transmutazzjoni. L-integrazzjoni speċifika għas-sit tal-ġeni tlesti s-servizzi ta' kostruzzjoni ta' linji ta' ċelluli ta' integrazzjoni tal-vertiċi.

Introduzzjoni għall-kostruzzjoni stabbli ta' linji ċellulari

Linja taċ-ċelluli stabbli tirreferi għal-linja taċ-ċelluli li tintegra ġeni barranin fil-ġenoma taċ-ċellula ospitanti sabiex ġeni barranin ikunu jistgħu jiġu espressi b'mod stabbli fiċ-ċellula ospitanti għal żmien twil. Il-prinċipju huwa li l-ġene barrani jitnaqqas għal vettur b'ċerta reżistenza, iċ-ċelloli ospitanti jiġu trasfettati, il-ġene barrani jiġi integrat fil-kromożoma ospitanti, u l-ġeni tar-reżistenza li jinsabu fil-vettur jiġu skrinjati biex jinkisbu linji taċ-ċelluli stabbli b'espressjoni għolja tal-proteina fil-mira jew silenzjar stabbli tal-ġene fil-mira li jissodisfaw ir-rekwiżiti tal-esperiment.

Alpha Lifetech għandha workshop tal-ħażna indipendenti, is-sistema perfetta għall-iffriżar u l-ġestjoni tal-ħażna taċ-ċelloli, u aktar minn 300 tip ta’ ċelloli tat-tumur u ċelloli primarji minn fejn tagħżel, iddedikati għar-riċerka xjentifika tiegħek.

Proċess stabbli ta' kostruzzjoni ta' linja ċellulari

linja ta' ċelluli stabbli-Alpha Lifetech

Metodu ta' kostruzzjoni ta' linja ta' ċelluli stabbli

Il-metodi stabbli ta' kostruzzjoni ta' linji ċellulari jinkludu skrinjar medjat minn lentivirus, medjat minn transposon, medjat minn CRISPR/Cas9, u plażmidi.

L-approċċ medjat mil-lentivirus huwa wieħed mill-aktar metodi użati komunement biex jinbnew linji ta' ċelluli stabbli. Dan l-approċċ għandu l-vantaġġ li jinfetta kważi t-tipi kollha ta' ċelluli u jintegra materjal ġenetiku fil-ġenoma taċ-ċellula ospitanti għal espressjoni stabbli fuq perjodu twil. Madankollu, din is-sistema għandha ċerti limitazzjonijiet, u l-lentivirus għandu kapaċità limitata ta' ppakkjar, għalhekk mhuwiex adattat għat-traskrizzjoni ta' ġeni b'reġjuni twal ta' traskrizzjoni.

Meta mqabbel ma' dak medjat minn lentivirus, dak medjat minn transposon m'għandu l-ebda restrizzjoni fuq id-daqs tal-ġene, u bl-ottimizzazzjoni kontinwa tat-teknoloġija, l-effiċjenza tal-inserzjoni tat-transposon tjiebet diversi drabi. L-iżvantaġġ huwa li ċerti restrizzjonijiet fuq iċ-ċelloli primarji u ċ-ċelloli huma diffiċli biex jiġu trasfettati.

CRISPR/Cas9-mediated fih crispr gene knockout u crispr gene knockin. Crispr gene knockout jirreferi għall-introduzzjoni ta' qtugħ ta' double-strand tad-DNA, li jirriżulta f'telf tal-funzjoni tal-ġene fil-mira. Crispr gene knockin jirreferi għall-frammenti tad-DNA barranin f'ġeni speċifiċi, li jistgħu jintużaw biex isewwu ġeni difettużi jew jintroduċu ġeni funzjonali ġodda.

L-iskrinjar tal-plażmidi huwa l-aktar skema primittiva ta' kostruzzjoni ta' linji taċ-ċelluli, li teħtieġ biss li tittrasfetta b'suċċess il-plażmid fil-mira fiċ-ċellula u tuża r-reżistenza korrispondenti fi skrining fit-tul. Imbagħad hemm ċerta probabbiltà li jinkisbu linji taċ-ċelluli stabbli.

Metodi ta' kostruzzjoni ta' linji ta' ċelluli stabbli differenti

Metodu ta' Medjazzjoni	Sistema Lentivirus	Sistema tat-Transposon	CRISP/Cas9-medjat	Skrining tal-Plażmidi
Kapaċità tat-Trasportatur	5 kb	10 kb	5 kb	10 kb
Effiċjenza Medjata	Għoli	Normali	Normali	Baxx
Kronoloġija	Ġimgħa jew tnejn	3-4 ġimgħat	3-4 ġimgħat	4-6 ġimgħat
Vantaġġ	Veloċi u effiċjenti	Sigurtà u stabbiltà	Integrazzjoni ta' punt fiss	Spiża aktar baxxa
Nuqqas	Riskju ta' bijosigurtà	Abbundanza ta' espressjoni normali	It-trasduzzjoni tas-CAS9 hija diffiċli u għalja	Effiċjenza baxxa u instabbiltà

Diffikultajiet tekniċi fil-kostruzzjoni ta' linji ta' ċelluli stabbli

Qabel ma jiżdied l-iskala tal-proċess, jintuża bijoreattur żgħir biex jiġu ddeterminati parametri bħall-gass, is-sistema tal-fluwidu tal-kultura, l-istress idrodinamiku minimu applikat għaċ-ċelloli, eċċ., biex tiġi żgurata kultura fuq skala trasversali. Madankollu, anke jekk jiġu ddeterminati l-parametri tal-proċess korrispondenti, l-ambjent ta' bijoreatturi kbar fil-produttur se jkun irregolari, u huwa faċli li tfalli. Alpha Lifetech għandha ħafna snin ta' esperjenza fil-kultura fuq skala ta' proċess, li tista' tevita żbalji sa ċertu punt, tnaqqas ir-riskji, u ttejjeb ħafna r-rata ta' suċċess. Fl-istess ħin, Alpha Lifetech tiżgura l-konsistenza tal-materja prima u l-lottijiet tal-midja użati, u b'hekk tnaqqas ir-rata ta' falliment tal-proċess ta' skala ta' kultura taċ-ċelloli.

Alpha Lifetech għandha pjattaforma komprensiva ta' żvilupp ta' proċess ta' linja taċ-ċelloli stabbli biex tiżgura l-istabbiltà tal-linji taċ-ċelloli matul il-produzzjoni. Nistgħu nipprovdulek ukoll servizzi personalizzati biex nilħqu l-bżonnijiet tiegħek.

Kontenut tas-Servizz ta' Kostruzzjoni ta' Linji ta' Ċelloli Stabbli

Kontenut	Kronoloġija
Kultura tal-linja taċ-ċelluli HEK293 ipprovduta mill-klijent.	3-5 xhur
Kostruzzjoni tal-plasmid sgRNA-Cas9 (bil-ġene tal-iskrinjar G418).
L-sgRNA-Cas9 u l-mudell tad-DNA tat-tiswija ġew trasferiti flimkien għal-linja taċ-ċelluli HEK293.
Skrining ta' linja ta' ċelluli monoklonali (ġene GFP klonu pożittiv knockin).
Kunsinna: Vettur, razza knock-in tal-ġene GFP, riżultati tas-sekwenzar, id-dejta mhux ipproċessata kollha, rapport tal-laboratorju

Iċ-ċelloli jistgħu jiġu traċċati

Iċ-ċelloli jinxtraw minn organizzazzjonijiet professjonali bħall-ATCC u jistgħu jipprovdu prova li tissodisfa r-rekwiżiti tar-reġistrazzjoni tiegħek.

Vantaġġ tal-produzzjoni

Alpha Lifetech għandha ħafna snin ta' esperjenza biex tissodisfa ħtiġijiet ta' żvilupp diversi; Għandna varjetà ta' ċelloli, workshop tal-ħażna indipendenti, iffriżar perfett taċ-ċelloli, u sistema ta' ġestjoni tal-ħażna.

Kontroll tal-Kwalità tal-proġett

Kull proġett jgħaddi minn proċessi stretti ta' kontroll tal-kwalità biex jiżgura l-kunsinna ta' linji taċ-ċelloli li jilħqu standards għoljin lill-klijenti.

Vantaġġ tekniku

Minbarra l-inġiniera b'esperjenza ċellulari estensiva, għandna algoritmi evoluzzjonarji ta' teknoloġija avvanzata biex intejbu l-kundizzjonijiet tar-reatturi u nimmodifikaw il-parametri tal-proċess.

Jekk għandek xi mistoqsijiet, jekk jogħġbok ikkuntattjana fi kwalunkwe ħin.

Leave Your Message

Servizz Dehru

0102