Antibody Engineering ဆိုတာဘာလဲ။

ပဋိပစ္စည်းအင်ဂျင်နီယာ၏အကူအညီဖြင့်၊ ၎င်းသည် မော်လီကျူးအရွယ်အစား၊ ဆေးဝါးထုတ်လုပ်မှု၊ ခုခံအားထုတ်လုပ်နိုင်မှု၊ ဆက်စပ်မှုရှိမှု၊ တိကျမှုနှင့် ပဋိပစ္စည်း၏အကျိုးသက်ရောက်မှုတို့ကို မွမ်းမံပြင်ဆင်နိုင်မည်ဖြစ်သည်။ ပဋိပစ္စည်းကို ပေါင်းစပ်ပြီးနောက်၊ တိကျသော ပဋိပစ္စည်းများ ပေါင်းစပ်ခြင်းသည် ၎င်းတို့အား ဆေးခန်းရောဂါရှာဖွေခြင်းနှင့် ကုသခြင်းတွင် အလွန်တန်ဖိုးရှိစေသည်။ ပဋိပစ္စည်း အင်ဂျင်နီယာပညာအားဖြင့် ၎င်းတို့သည် ဆေးဝါးနှင့် ရောဂါရှာဖွေရေး အစောပိုင်းဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုဆိုင်ရာ လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည်။

ပဋိပစ္စည်း အင်ဂျင်နီယာ၏ ရည်ရွယ်ချက်မှာ သဘာဝ ပဋိပစ္စည်း မအောင်မြင်နိုင်သော အလွန်တိကျပြီး တည်ငြိမ်သော လုပ်ဆောင်ချက်များကို ဒီဇိုင်းထုတ်ရန်နှင့် ကုထုံးပဋိပစ္စည်း ထုတ်လုပ်မှုအတွက် အုတ်မြစ်ချရန် ဖြစ်သည်။

Alpha Lifetech သည် ၎င်း၏ ကျယ်ပြန့်သော ပဋိပစ္စည်းအင်ဂျင်နီယာဆိုင်ရာ ပရောဂျက်အတွေ့အကြုံဖြင့်၊ မျိုးစိတ်များစွာအတွက် စိတ်ကြိုက် monoclonal နှင့် polyclonal antibody ဝန်ဆောင်မှုများအပြင် phage display antibody စာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှုနှင့် စစ်ဆေးခြင်းဝန်ဆောင်မှုများကို ပေးဆောင်နိုင်ပါသည်။ Alpha Lifetech သည် သုံးစွဲသူများအား အရည်အသွေးပြည့်မီသော biosimilar antibodies နှင့် recombinant protein ထုတ်ကုန်များအပြင် သက်ဆိုင်ရာဝန်ဆောင်မှုများကို ထိရောက်စွာ၊ အလွန်တိကျသော၊ နှင့် တည်ငြိမ်သော ပဋိပစ္စည်းများထုတ်လုပ်ရန် ပံ့ပိုးပေးနိုင်ပါသည်။ ပြည့်စုံသော ပဋိပစ္စည်း၊ ပရိုတိန်းပလပ်ဖောင်းများနှင့် phage ပြသမှုစနစ်များကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် ပဋိပစ္စည်းကို လူသားဆန်ခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်း သန့်စင်ခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်း စီစစ်ခြင်းနှင့် ပဋိပစ္စည်း စစ်ဆေးခြင်းကဲ့သို့သော နည်းပညာဆိုင်ရာ ဝန်ဆောင်မှုများ အပါအဝင် ပဋိပစ္စည်းထုတ်လုပ်မှု၏ အထက်ပိုင်းနှင့် အောက်ပိုင်းကို အကျုံးဝင်သည့် ဝန်ဆောင်မှုများ ပေးပါသည်။

ပဋိပစ္စည်းအင်ဂျင်နီယာ၏ ရှေ့ဆောင်အဆင့်သည် နည်းပညာနှစ်ခုနှင့် သက်ဆိုင်သည်-

--Recombinant DNA နည်းပညာ

--Hybridoma နည်းပညာ

ပဋိပစ္စည်း အင်ဂျင်နီယာ၏ လျင်မြန်စွာ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုသည် အရေးကြီးသော နည်းပညာသုံးမျိုးနှင့် ဆက်စပ်နေသည်။

--Gene cloning နည်းပညာနှင့် polymerase ကွင်းဆက်တုံ့ပြန်မှု

--ပရိုတိန်းအသုံးအနှုန်း- ပေါင်းစပ်ပရိုတိန်းများကို တဆေး၊ တုတ်ချောင်းပုံသဏ္ဍာန်ရှိသော ဗိုင်းရပ်စ်များနှင့် အပင်များကဲ့သို့သော ထုတ်ဖော်မှုစနစ်များဖြင့် ထုတ်လုပ်သည်။

--Computer ဖြင့် structural design ပြုလုပ်နိုင်ရမည်။

mouse monoclonal antibodies များ၏ ပြောင်းလဲနိုင်သော ဒေသသည် လူ့ IgG မော်လီကျူးများ၏ စဉ်ဆက်မပြတ်သော ဒေသနှင့် ချိတ်ဆက်ထားသည့် ပဋိပစ္စည်း၏ ပထမမျိုးဆက်ကို လူသားအဖြစ် ပြုလုပ်ထားခြင်း ဖြစ်သည်။ ဒုတိယမျိုးဆက် mouse monoclonal antibody ၏ antigen binding region (CDR) ကို လူ့ IgG သို့ အစားထိုးခဲ့သည်။ CDR ဒေသမှလွဲ၍ ကျန်ပဋိပစ္စည်းအားလုံးသည် လူသားပဋိပစ္စည်းနီးပါးဖြစ်ပြီး လူသားကုသမှုအတွက် mouse clone antibodies ကိုအသုံးပြုသည့်အခါ human anti- mouse antibody (HAMA) တုံ့ပြန်မှုများကို ရှောင်ရှားရန် ကြိုးပမ်းမှုများ ပြုလုပ်ခဲ့သည်။

 

phage ပြသမှုစာကြည့်တိုက်ကို တည်ဆောက်ရန်အတွက် ပထမအဆင့်မှာ ကာကွယ်ဆေးထိုးတိရစ္ဆာန်များ၏ B ဆဲလ်များမှ ခွဲထုတ်နိုင်သည့် ဗီဇကုဒ်လုပ်ထားသော ပဋိပစ္စည်းများ (ကိုယ်ခံအားစာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှု)၊ ကာကွယ်ဆေးမရှိသောတိရစ္ဆာန်များ (သဘာဝစာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှု) မှ တိုက်ရိုက်ထုတ်နုတ်ထားခြင်း သို့မဟုတ် ပဋိပစ္စည်းဗီဇအပိုင်းအစများ (ဓာတုစာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှု) ဖြင့်ပင် ဗီရိုအတွင်း စုစည်းထားသည်။ ထို့နောက်၊ မျိုးဗီဇများကို PCR ဖြင့် ချဲ့ထွင်ပြီး plasmids များထဲသို့ ထည့်သွင်းကာ သင့်လျော်သော လက်ခံစနစ်များ (Yeast expression (များသောအားဖြင့် Pichia pastoris)၊ prokaryotic expression (များသောအားဖြင့် E. coli)၊ နို့တိုက်သတ္တဝါဆဲလ်ဖော်ပြမှု၊ အပင်ဆဲလ်ဖော်ပြမှု၊ နှင့် တုတ်ပုံသဏ္ဍာန် ဗိုင်းရပ်စ်ပိုးကူးစက်ခံထားရသော အင်းဆက်ဆဲလ်ဖော်ပြမှု)။ အသုံးအများဆုံးမှာ E. coli ဖော်ပြမှုစနစ်ဖြစ်ပြီး၊ တိကျသောကုဒ်သွင်းသည့် ပဋိပစ္စည်းအစီအစဥ်ကို phage တွင် ပေါင်းစပ်ပြီး phage shell ပရိုတင်းများ (pIII သို့မဟုတ် pVIII) မှတစ်ခုအား ကုဒ်လုပ်သည်။ ဗီဇပေါင်းစပ်မှု၊ ဘက်တီးရီးယားပိုးမွှားများ၏ မျက်နှာပြင်ပေါ်တွင် ပြသသည်။ ဤနည်းပညာ၏ အဓိကအချက်မှာ သဘာဝစာကြည့်တိုက်များထက် အားသာချက်ရှိသော phage display စာကြည့်တိုက်ကို တည်ဆောက်ရန်ဖြစ်ပြီး ၎င်းသည် သီးခြား binding လုပ်နိုင်သည့်အတွက် ဖြစ်သည်။ နောက်ပိုင်းတွင်၊ အန်တီဂျင် တိကျသော ပဋိပစ္စည်းများကို ဇီဝဗေဒရွေးချယ်မှု လုပ်ငန်းစဉ်ဖြင့် စစ်ဆေးပြီး၊ ပစ်မှတ် အန်တီဂျင်များကို ပုံသေ၊ ဘောင်မဝင်သော ဖာများကို ထပ်ခါတလဲလဲ ဆေးကြောပြီး နောက်ထပ် ကြွယ်ဝစေရန် ထုပ်ပိုးထားသော ဖာများကို ဆေးကြောပေးသည်။ သုံးကြိမ် သို့မဟုတ် ထို့ထက်ပို၍ ထပ်ခါတလဲလဲလုပ်ပြီးနောက်၊ မြင့်မားသောတိကျမှုနှင့် ရင်းနှီးမှုမြင့်မားသော ပဋိပစ္စည်းများကို သီးခြားခွဲထားသည်။

ပုံ 3- ပဋိပစ္စည်းစာကြည့်တိုက် တည်ဆောက်ခြင်းနှင့် စစ်ဆေးခြင်း။

Recombinant DNA နည်းပညာကို ပဋိပစ္စည်း အပိုင်းအစများ ထုတ်လုပ်ရန် အသုံးပြုနိုင်သည်။ Fab ပဋိပစ္စည်းကို အစပိုင်းတွင် (Fab ') အပိုင်းအစ ၂ ခုကို ထုတ်လုပ်ရန် အစာအိမ်ပရိုတင်းဖြင့်သာ ဟိုက်ဒရောလစ်လုပ်နိုင်သည်၊ ထို့နောက် Fab အပိုင်းအစတစ်ခုစီကို ထုတ်လုပ်ရန်အတွက် papain ဖြင့် ချေဖျက်သည်။ Fv အပိုင်းအစတွင် disulfide နှောင်ကြိုးများမရှိခြင်းကြောင့် တည်ငြိမ်မှုအားနည်းသော VH နှင့် VL တို့ပါဝင်သည်။ ထို့ကြောင့်၊ VH နှင့် VL တို့သည် ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် 25KDa ရှိသော မော်လီကျူးအလေးချိန် 25KDa ရှိသော တစ်ခုတည်းသော ကွင်းဆက်ပြောင်းလဲနိုင်သော ပြောင်းလဲနိုင်သောအပိုင်း (scFv) ပဋိပစ္စည်းကို ဖွဲ့စည်းရန်အတွက် အတိုကောက် peptide 15-20 ရှိသော အမိုင်နိုအက်ဆစ်များမှတဆင့် အတူတကွ ချိတ်ဆက်ထားသည်။

Camelidae (Camel, LIama နှင့် Alpaca) ရှိ ပဋိပစ္စည်းဖွဲ့စည်းပုံကို လေ့လာခြင်းသည် ပဋိပစ္စည်းများတွင် လေးလံသောကွင်းဆက်များသာရှိပြီး အလင်းကွင်းဆက်များမရှိသောကြောင့် ၎င်းတို့အား heavy chain antibodies (hcAb) ဟုခေါ်သည်။ လေးလံသောကွင်းဆက်ပဋိပစ္စည်းများ၏ ပြောင်းလဲနိုင်သောဒိုမိန်းကို single domain antibodies သို့မဟုတ် nanobodies သို့မဟုတ် VHH ဟုခေါ်သည်၊ အရွယ်အစား 12-15 kDa ဖြစ်သည်။ မိုနိုမာများအနေနှင့် ၎င်းတို့တွင် disulfide နှောင်ကြိုးများမရှိသည့်အပြင် antigens များအတွက် အလွန်ဆက်စပ်မှုမြင့်မားပြီး အလွန်တည်ငြိမ်သည်။

ပုံ 5- Heavy Chain Antibody နှင့် VHH/ Nanobody

ဆဲလ်ကင်းစင်သောဖော်ပြချက်သည် ပုံမှန်အားဖြင့် E. coli ဖော်ပြမှုစနစ်အား အသုံးပြု၍ ဗိုက်ထရိုပရိုတိန်းပေါင်းစပ်မှုအောင်မြင်ရန် သဘာဝ သို့မဟုတ် ပေါင်းစပ် DNA ၏ဖော်ပြချက်ကို အသုံးပြုသည်။ ၎င်းသည် ပရိုတင်းများကို လျင်မြန်စွာထုတ်လုပ်ပြီး vivo တွင် ပြန်လည်ပေါင်းစည်းထားသော ပရိုတင်းအမြောက်အမြားကို ထုတ်လုပ်သောအခါ ဆဲလ်များပေါ်ရှိ ဇီဝဖြစ်စဉ်နှင့် cytotoxic ဝန်ထုပ်ဝန်ပိုးကို ရှောင်ရှားသည်။ ဘာသာပြန်ပြီးနောက် ပြုပြင်ရန်ခက်ခဲသော သို့မဟုတ် အမြှေးပါးပရိုတင်းများကို ပေါင်းစပ်ရန်ခက်ခဲသော ပရိုတင်းများကဲ့သို့သော ပေါင်းစပ်ရန်ခက်ခဲသော ပရိုတင်းများကိုလည်း ထုတ်လုပ်နိုင်သည်။