Phage Display Antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးပလပ်ဖောင်း

ပဋိပစ္စည်းပလပ်ဖောင်း၏ ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့်သော ပလက်ဖောင်းစနစ်တည်ဆောက်မှုအပေါ် အခြေခံ၍ Alpha Lifetech သည် ပဋိပစ္စည်းပြင်ဆင်မှု၊ ပဋိပစ္စည်းသန့်စင်မှု၊ ပဋိပစ္စည်း စီတန်းခြင်းစသည်ဖြင့် နည်းပညာဆိုင်ရာ ဝန်ဆောင်မှုများကို ပံ့ပိုးပေးနိုင်ပါသည်။

ကြှနျုပျတို့ကိုဆကျသှယျရနျ

၀၁

Phage Display Antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးပလပ်ဖောင်း

Alpha Lifetech သည် ပဋိပစ္စည်းရှာဖွေတွေ့ရှိမှုတွင် ၎င်း၏ကျယ်ပြန့်သော ပရောဂျက်အတွေ့အကြုံဖြင့်၊ မျိုးစိတ်များစွာအတွက် စိတ်ကြိုက် monoclonal နှင့် polyclonal antibody ဝန်ဆောင်မှုများအပြင် ပဋိပစ္စည်းစာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှုနှင့် စစ်ဆေးခြင်းဝန်ဆောင်မှုများကို ပေးဆောင်နိုင်ပါသည်။ Alpha Lifetech သည် သုံးစွဲသူများအား အရည်အသွေး စိတ်ချရသော ပဋိပစ္စည်းနှင့် ပြန်လည်ပေါင်းစပ်ထားသော ပဋိပစ္စည်း ထုတ်ကုန်များအပြင် သက်ဆိုင်ရာ ဝန်ဆောင်မှုများကို ထိရောက်စွာ၊ အလွန်တိကျပြီး တည်ငြိမ်သော ပဋိပစ္စည်းများကို ပြင်ဆင်ပေးနိုင်ပါသည်။ ပြည့်စုံသော ပဋိပစ္စည်းပလပ်ဖောင်းများနှင့် ပဋိပစ္စည်းအင်ဂျင်နီယာကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် ပဋိပစ္စည်းကို ပြင်ဆင်ခြင်း၊ သန့်စင်ခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်း စီစစ်ခြင်းနှင့် စစ်ဆေးခြင်းကဲ့သို့ နည်းပညာဆိုင်ရာ ဝန်ဆောင်မှုများ အပါအဝင် ပဋိပစ္စည်းထုတ်လုပ်မှု၏ အထက်ပိုင်းနှင့် အောက်ပိုင်းကို အကျုံးဝင်သည့် ဝန်ဆောင်မှုများ ပေးပါသည်။

Alpha Lifetech တွင် တိရစ္ဆာန်ကိုယ်ခံစွမ်းအား၊ phage display antibody စာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှုနှင့် စစ်ဆေးမှု၊ ပဋိပစ္စည်း အမျိုးအစားခွဲခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်းဖော်ပြမှု၊ ပဋိပစ္စည်းသန့်စင်ခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်းအတည်ပြုခြင်းနှင့် hybridoma နည်းပညာ၊ တစ်ခုတည်းသော B ဆဲလ်နည်းပညာ၊ phage ပြသမှုနည်းပညာနှင့် အခြားအရာများ အပါအဝင် ဝန်ဆောင်မှုများစွာကို ပံ့ပိုးပေးသည့် ရင့်ကျက်သော ပဋိပစ္စည်းရှာဖွေရေးပလပ်ဖောင်းတစ်ခုရှိသည်။ Alpha Lifetech တွင် စံထုတ်လုပ်သည့်လိုင်းတစ်ခုရှိပြီး ပဋိပစ္စည်းပြင်ဆင်မှုဝန်ဆောင်မှုများအပြင် ပဋိပစ္စည်းလူသားဆန်ခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်း၏ရင်းနှီးမှုရင့်ကျက်မှု၊ ADC ဆေးဝါးဒီဇိုင်းနှင့် ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှု၊ နှင့် CAR-T ၏ နောက်ဆက်တွဲ အစီအစဉ်ဒီဇိုင်းများကိုလည်း ပံ့ပိုးပေးနိုင်ပါသည်။ တစ်ချိန်တည်းမှာပင်၊ Alpha Lifetech သည် သိုလှောင်မှုပမာဏ 10^8-10^9 အထိ M13၊ T4 နှင့် T7 phage မျက်နှာပြင်နည်းပညာပလပ်ဖောင်းများကို အခြေခံ၍ ပဋိပစ္စည်းစာကြည့်တိုက်တစ်ခုကို တည်ဆောက်ခဲ့သည်။ စာကြည့်တိုက်၏ အပြုသဘောဆောင်သောနှုန်း၊ ထည့်သွင်းမှုနှုန်းနှင့် ကွဲပြားမှုသည် 90% ကျော်အထိ ရှိနိုင်ပါသည်။

Phage display နည်းပညာ

မောက်စ် hybridoma monoclonal antibody ထုတ်လုပ်ရန် hybridoma monoclonal antibody နည်းပညာကို အသုံးပြု၍ Monoclonal antibodies ထုတ်လုပ်မှုကို ကနဦးတွင် ပြင်ဆင်ခဲ့သည်။ အတိအကျအားဖြင့်၊ လူ သို့မဟုတ် ကြွက်များမှ myeloma ဆဲလ်များနှင့် ကာကွယ်ဆေးထိုးကြွက်များမှ သရက်ရွက်ဆဲလ်များကို ပေါင်းစပ်ခြင်းဖြင့်၊ တိကျသော hybridoma monoclonal antibody ပဋိပစ္စည်းကို လျှို့ဝှက်ထုတ်လုပ်ပေးသည့် hybridoma ဆဲလ်များကို ဖွဲ့စည်းထားပါသည်။ mouse monoclonal antibodies များကို လူသားဆန်စွာ ပြုပြင်မွမ်းမံခြင်းနှင့် ၎င်းတို့အား စဉ်ဆက်မပြတ် လူသား immunoglobulin ဒေသကို ပေးဆောင်ရန် ပဋိပစ္စည်းများ၏ မျိုးရိုးဗီဇ အင်ဂျင်နီယာဆိုင်ရာ ပြုပြင်မွမ်းမံခြင်းဖြင့်၊ ၎င်းတို့၏ ခုခံအားစနစ်ကို လျှော့ချနိုင်သည်။ Monoclonal antibody engineering ကို biomedical နှင့် clinical applications များတွင် တွင်ကျယ်စွာ အသုံးပြုကြသည်။

Alpha Lifetech သည် ကြိုတင်လက်တွေ့သုတေသနပရိုတိုကော ဒီဇိုင်းမှ ပဋိဇီဝဆေးပေါင်းစပ်မှုများ (ADCs) ရှာဖွေတွေ့ရှိမှုနှင့် တိရိစ္ဆာန်အတည်ပြုခြင်းအထိ တစ်ခုတည်းသော ရပ်တန့်ပဋိပစ္စည်းအင်ဂျင်နီယာဝန်ဆောင်မှုများကို ပေးဆောင်နိုင်ပါသည်။ Antibody drug conjugates (ADCs) သည် ကင်ဆာဆဲလ်များသို့ ဓာတုကုထုံးဆေးများ ပေးပို့နိုင်သည်။ ကင်ဆာဆဲလ်များတွင် ဖော်ပြထားသော သီးခြားပစ်မှတ်များနှင့် ချိတ်ဆက်ပြီးနောက်၊ ADC သည် ကင်ဆာဆဲလ်များအတွင်းသို့ cytotoxic ဆေးဝါးများကို ထုတ်လွှတ်သည်။ Alpha Lifetech သည် သုံးစွဲသူများအား ပြည့်စုံသော antibody affinity ရင့်ကျက်မှုဆိုင်ရာ ဝန်ဆောင်မှုများကို ပေးစွမ်းနိုင်သည်။ အဆင့်မြင့် ဗီဇပြောင်းလဲခြင်း ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ခြင်း နှင့် high-throughput phage display screening နည်းပညာဖြင့်၊ အချို့သော ရင်းနှီးမှုရှိသော ပဋိပစ္စည်းများကို ဦးစွာ စစ်ဆေးပြီး ကွဲပြားသော မျိုးကွဲများကို ထုတ်လုပ်ရန်အတွက် အမိုင်နိုအက်ဆစ် ဗီဇပြောင်းလဲမှုများကို မိတ်ဆက်ပေးပါသည်။ နောက်ပိုင်းတွင်၊ မြင့်မားသောဆက်စပ်မှုရှိသောပဋိပစ္စည်းများကို စိစစ်ခြင်းနည်းပညာများအသုံးပြု၍ အကဲဖြတ်စစ်ဆေးခဲ့သည်။ ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းနှင့် ဖွဲ့စည်းတည်ဆောက်ပုံဆိုင်ရာ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု အကြိမ်ကြိမ်ပြုလုပ်ပြီးနောက်၊ ပိုမိုရင်းနှီးမှုနှင့် ပိုမိုခိုင်မာသောတိကျမှုရှိသော ပဋိပစ္စည်းများကို နောက်ဆုံးတွင် ရရှိခဲ့သည်။

Alpha Lifetech သည် ခုခံအားစာကြည့်တိုက်များ၊ မူရင်းစာကြည့်တိုက်များ၊ semi synthetic libraries နှင့် synthetic libraries များအပါအဝင် antibody phage display library အမျိုးအစားအမျိုးမျိုးကို တည်ဆောက်နိုင်ပါသည်။ မြင့်မားသော ပဋိပစ္စည်းစာကြည့်တိုက်များ၏ စွမ်းရည်အပေါ် အခြေခံ၍ အလွန်တိကျသော ပဋိပစ္စည်းကို ရရှိနိုင်သည်။ pMECS၊ pComb3X၊ နှင့် pCANTAB 5E ကဲ့သို့သော phagemid vector အများအပြားအပြင် TG1 E. coli၊ XL1 Blue နှင့် ER2738 ကဲ့သို့သော မျိုးကွဲများကို ပေးနိုင်ပါသည်။ 10^9 အထိရှိသော စာကြည့်တိုက်စွမ်းရည်အပြင်၊ စာကြည့်တိုက်၏ ပစ်မှတ်အပိုင်းအစထည့်သွင်းမှုနှုန်းမှာလည်း မြင့်မားသောကြောင့် သုံးစွဲသူများကျေနပ်စေမည့် ပဋိပစ္စည်းများကို စစ်ဆေးခြင်းအတွက် လုံလောက်သောအခြေအနေများကို ဖန်တီးပေးပါသည်။ phage မျက်နှာပြင်နည်းပညာကိုအခြေခံ၍ Alpha Lifetech ၏ပဋိပစ္စည်းပြင်ဆင်မှုဝန်ဆောင်မှု၏စီးဆင်းမှုဇယားကိုပုံ 1 တွင်ပြသထားသည်။

Fig.1 သည် phage ပြသမှုနည်းပညာအပေါ်အခြေခံ၍ monoclonal antibodies ပြင်ဆင်ခြင်းအတွက် လုပ်ငန်းစဉ်ပုံကြမ်း။

Phage Display Antibody ထုတ်လုပ်မှု အလုပ်အသွားအလာ

ခြေလှမ်းများ	ဝန်ဆောင်မှု အကြောင်းအရာ	အချိန်ဇယား
အဆင့် 1- တိရစ္ဆာန် ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်း။	(၁) တိရစ္ဆာန် ကာကွယ်ဆေး ၄ ကြိမ်၊ boost immunization ၁ ကြိမ် စုစုပေါင်း ၅ ကြိမ် ကာကွယ်ဆေးထိုးပါ။ (၂) ကာကွယ်ဆေးမထိုးမီ အနုတ်လက္ခဏာရှိသောသွေးရည်ကြည်နှင့် သွေးရည်ကြည် titer ကိုသိရှိရန် စတုတ္ထအကြိမ်တွင် ELISA ကို လုပ်ဆောင်ခဲ့သည်။ (၃) စတုတ္ထအကြိမ်၏ သွေးရည်ကြည် ပဋိပစ္စည်း titer သည် လိုအပ်ချက်များ နှင့် ကိုက်ညီပါက သွေးမစုဆောင်းမီ ၇ ရက်အလိုတွင် နောက်ထပ် ကာကွယ်ဆေးထိုး တစ်ကြိမ် ပေးရပါမည်။ လိုအပ်ချက်များ မပြည့်မီပါက ပုံမှန် ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်းကို ဆက်လက်လုပ်ဆောင်ပါမည်။ (၄) အရည်အချင်းပြည့်မီသော အာနိသင်၊ သွေးစုဆောင်းခြင်းနှင့် monocytes များကို ခွဲထုတ်ခြင်း။	၁၀ ပတ်
အဆင့် 2- cDNA ပြင်ဆင်မှု	(၁) PBMC စုစုပေါင်း RNA ထုတ်ယူခြင်း (RNA ထုတ်ယူခြင်းကိရိယာ) (2) မြင့်မားသောသစ္စာရှိမှု RT-PCR cDNA ၏ပြင်ဆင်မှု (ပြောင်းပြန်စာသားရေးကိရိယာအစုံ)	၁ ရက်
အဆင့် 3- Antibody စာကြည့်တိုက် တည်ဆောက်ခြင်း။	(1) cDNA ကို နမူနာအဖြစ် အသုံးပြု၍ မျိုးဗီဇများကို PCR ၏ နှစ်ကျော့ပြန် ချဲ့ထွင်ခဲ့သည်။ (2) Phage တည်ဆောက်မှုနှင့် အသွင်ပြောင်းခြင်း- မျိုးရိုးဗီဇ ပေါင်းစပ်ထားသော phagemid vector၊ TG1 လက်ခံဘက်တီးရီးယားများ၏ လျှပ်စစ်ဓါတ်ပြောင်းလဲခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်းစာကြည့်တိုက် တည်ဆောက်ခြင်း။ (3) ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်း- 24 မျိုးပွား၊ PCR ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်း အပြုသဘောနှုန်း+ ထည့်သွင်းမှုနှုန်းကို ကျပန်းရွေးချယ်ပါ။ (၄) အထောက်အကူပြု ဖာ့ဂ်ပြင်ဆင်မှု- M13 phage ချဲ့ထွင်ခြင်း+သန့်စင်ခြင်း။ (၅) Phage display စာကြည့်တိုက် ကယ်ဆယ်ရေး	3-4 ပတ်
အဆင့် 4- Antibody Library ကို စစ်ဆေးခြင်း (၃ ကြိမ်)	(1) ပုံသေ 3-ပတ်ပတ်လည် စိစစ်ခြင်း (အစိုင်အခဲ-အဆင့် စိစစ်ခြင်း)- အတိအကျမဟုတ်သော ပဋိပစ္စည်းများကို ဖြစ်နိုင်သမျှ အမြင့်ဆုံးအထိ ဖယ်ရှားရန် ဖိအားစစ်ဆေးမှု။ (2) တစ်ခုတည်းသော clone amplification bacteriophage ကိုရွေးချယ်ထားသော + IPTG induced expression+ ELISA သည် အပြုသဘောဆောင်သော clones များကို ထောက်လှမ်းခြင်း။ (၃) မျိုးရိုးဗီဇ စီစစ်ရန်အတွက် အပြုသဘောဆောင်သော ကိုယ်ပွားများအားလုံးကို ရွေးချယ်ခဲ့သည်။	4-5 ပတ်

phage ရုပ်ထွက်နည်းပညာ၏အားသာချက်

Alpha Lifetech သည် ပဋိပစ္စည်း ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုနယ်ပယ်တွင် အတွေ့အကြုံကြွယ်ဝသည်။ နှစ်များတစ်လျှောက်တွင် Alpha Lifetech သည် ပြီးပြည့်စုံသော ပဋိပစ္စည်းဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးပလက်ဖောင်းကို တည်ထောင်ခဲ့သည်။

ပံ့ပိုးမှုဝန်ဆောင်မှုများ

ကျွန်ုပ်တို့သည် ဖောက်သည်များ၏လိုအပ်ချက်အရ မတူညီသောတိရစ္ဆာန်အခြေခံကိုယ်ခံအားစာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်ရေးဝန်ဆောင်မှုများနှင့် သဘာဝပဋိပစ္စည်းစာကြည့်တိုက်စစ်ဆေးခြင်းဝန်ဆောင်မှုများကို ပံ့ပိုးပေးနိုင်ပါသည်။

ပစ်မှတ်မျိုးစုံ

ပစ်မှတ် ပဋိပစ္စည်း ရှာဖွေတွေ့ရှိမှု ဝန်ဆောင်မှု အများအပြားကို ရရှိနိုင်သည်- ပရိုတင်းများ၊ ပက်တီဒစ်များ၊ သေးငယ်သော မော်လီကျူးများ၊ ဗိုင်းရပ်စ်များ၊ အမြှေးပါးပရိုတင်းများ၊ mRNA စသည်တို့။

Vector မျိုးစုံ

စိတ်ကြိုက်စာကြည့်တိုက်တည်ဆောက်မှုဝန်ဆောင်မှု၊ PMECS၊ pComb3X နှင့် pCANTAB 5E အပါအဝင် ဘက်တီးရီးယားပိုးမွှားများကို ပေးဆောင်နိုင်ပြီး ဖောက်သည်လိုအပ်ချက်အရ ၎င်းတို့ကို ပြုပြင်မွမ်းမံနိုင်သည်။

ရင့်ကျက်သော ပလပ်ဖောင်း

သိုလှောင်မှုပမာဏသည် 10^8-10^9 သို့ရောက်ရှိနိုင်သည်၊ ထည့်သွင်းမှုနှုန်းသည် 90% အထက်တွင်ရှိပြီး စိစစ်ခြင်းဖြင့်ရရှိသော ပဋိပစ္စည်းများ၏ဆက်စပ်မှုမှာ ယေဘုယျအားဖြင့် nM pM အဆင့်တွင်ရှိသည်။

ဆက်စပ်ဝန်ဆောင်မှု

များစွာသော Antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုမဟာဗျူဟာ

Monoclonal Antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးဝန်ဆောင်မှု

Hybridoma နည်းပညာပလပ်ဖောင်း

Single B Cell အမျိုးအစားခွဲခြင်း ပလပ်ဖောင်း

Phage Display Antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးပလပ်ဖောင်း

monoclonal antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှု-Alpha Lifetech

Monoclonal Antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးဝန်ဆောင်မှု

ကျွန်ုပ်တို့သည် mouse monoclonal antibodies နှင့် ယုန် monoclonal antibodies များထုတ်လုပ်ခြင်းအပါအဝင် အရည်အသွေးမြင့်၊ မြင့်မားသော၊ နှင့် အလွန်တိကျသော monoclonal antibody ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေးဝန်ဆောင်မှုများကို ပံ့ပိုးပေးနိုင်ပါသည်။

Hybridoma နည်းပညာပလပ်ဖောင်း

ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်းအစီအစဉ်၊ ပဋိပစ္စည်းပြင်ဆင်ခြင်းဝန်ဆောင်မှုများ၊ ပဋိပစ္စည်းသန့်စင်ခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်းပါဝင်မှုနှုန်းမြင့်မားခြင်း၊ ပဋိပစ္စည်းစစ်ဆေးခြင်းစသည်တို့ အပါအဝင်

Single B Cell အမျိုးအစားခွဲခြင်း ပလပ်ဖောင်း

Alpha Lifetech သည် စစ်ဆေးချိန်နှင့် အရည်အသွေးမြင့် ပဋိပစ္စည်းများ ရရှိခြင်းအတွက် အားသာချက်များရှိသည်။ ၎င်းသည် antigen ဒီဇိုင်း၊ ပေါင်းစပ်မှုနှင့် ပြုပြင်မွမ်းမံမှု၊ တိရစ္ဆာန်ကိုယ်ခံစွမ်းအား၊ တစ်ခုတည်းသော B ဆဲလ်ဖြည့်တင်းမှုကို စစ်ဆေးခြင်း၊ ဆဲလ်တစ်ခုစီစီခြင်းကို ပေးစွမ်းနိုင်သည်။