Aptamer-syntheseplatform
Afhankelijk van het doelwit omvatten nucleïnezuuraptameren DNA-aptameren, RNA-aptameren, proteïneaptameren en celmembraanaptameren.
NEEM CONTACT MET ONS OP01
Aptamer-syntheseplatform
Inleiding tot nucleïnezuuraptameren
Nucleïnezuuraptameren, ook bekend als aptameren, complexen en chemische antilichamen, worden verkregen door in-vitro-Selex-screening met behulp van de Ligand Exponential Enrichment System Evolution (SELEX)-techniek. Het is een enkelstrengs deoxyribonucleïnezuur (ssDNA) of ribonucleïnezuur (RNA) dat specifiek en efficiënt bindt aan een doelmolecuul en doorgaans bestaat uit 20-80 basen.
Nucleïnezuuraptameren verkregen door in-vitroscreening zijn structureel stabiel, eenvoudig te synthetiseren en gemakkelijk te modificeren, en zijn superieur aan de veelgebruikte biologisch afgeleide antilichamen qua synthese en toepassing. Bovendien kunnen nucleïnezuuraptameren zich specifiek aan hun doelwitten binden door middel van diverse krachten. Over het algemeen interageren ze met kleine moleculen op basis van een breed scala aan conformaties (bijv. haarspeld, concaaf-convex, pseudo-gedraaid, enz.) door middel van waterstofbruggen, elektrostatische krachten, hydrofobe interacties, enz. Afhankelijk van het doelwit omvatten nucleïnezuuraptameren DNA-aptameren, RNA-aptameren, proteïneaptameren en celmembraanaptameren.
Het aptamersyntheseplatform van Alpha Lifetech omvat voornamelijk de SELEX-aptamerbibliotheeksyntheseservice en aptamer-ontwikkelingsservice (DNA, RNA of XNA), evenals downstream aptamerscreening, aptameroptimalisatie en aptameridentificatieanalyseservices.
Technisch proces van Aptamer-synthese
Fundamenteel principe en technologisch proces
Het proces van nucleïnezuuraptameersynthesetechnologie houdt in dat een bibliotheek van enkelstrengs oligonucleotiden in vitro chemisch wordt gesynthetiseerd, gemengd met de doelstof, en dat een complex van de doelstof en nucleïnezuur in het mengsel aanwezig is. Het nucleïnezuur dat niet aan de doelstof bindt, wordt weggespoeld en de nucleïnezuurmoleculen die wel aan de doelstof binden, worden geïsoleerd. De nucleïnezuurmoleculen worden vervolgens gebruikt als templates voor PCR-amplificatie voor de volgende screeningsronde. Door herhaalde Selex-screening en -amplificatie worden sommige DNA- of RNA-moleculen die niet aan de doelstof binden of een lage of matige affiniteit voor de doelstof hebben, weggespoeld. Aptameren, d.w.z. DNA of RNA met een hoge affiniteit voor de doelstof, worden vervolgens gescheiden van de zeer grote willekeurige bibliotheek. Hun zuiverheid neemt toe met het SELEX-proces en uiteindelijk zullen ze een groot deel van de bibliotheek innemen.
Belangrijkste punten van het technische proces
Het proces van selex-screening van nucleïnezuuraptameren begint met de samenstelling van chemisch gesynthetiseerde, willekeurige oligonucleotidebibliotheken. Willekeurige oligonucleotidebibliotheken hebben een grote capaciteit. Een groot voordeel is de hoge diversiteit. Theoretisch gezien is de capaciteit van een bibliotheek 4n als de willekeurige sequentie in een oligonucleotide uit n basen bestaat. Een bibliotheek met kunstmatige modificatie zal de diversiteit aan willekeurige sequenties vergroten. Momenteel is de lengte van willekeurige sequenties van oligonucleotiden die vaak worden gebruikt in SELEX-experimenten over het algemeen 30 basen, en de capaciteit kan oplopen tot 10^18. De capaciteit van de bibliotheek is cruciaal voor selex-screening van liganden met hoge affiniteit. Omdat de concentratie van de synthetische bibliotheken echter vaststaat, zullen te lange willekeurige sequenties de hoeveelheid van elke oligonucleotide in de bibliotheken verminderen, wat de kans op selex-screening op een specifiek aptameer vermindert. Over het algemeen voldoet een bibliotheekcapaciteit van 10^13~10^15 in de eerste ronde van selex-screening aan de praktische behoeften.
Figuur 1 SELEX technisch proces
voordelen van nucleïnezuuraptameer
| Voordelen | Details |
|---|---|
| Direct | Door het traditionele proces van dierproeven te vermijden en direct te selecteren uit in-vitrobibliotheken; door middel van selex-screening op aptameren van doelmoleculen die niet-immunogeen, laag-immunogeen of zelfs giftig zijn. |
| Breed scala aan toepassingen | De doelmoleculen kunnen organische kleurstoffen, aminozuren, eiwitten, antibiotica, peptiden, vitaminen, medicijnen, zelfs cellen, ziekteverwekkers, virussen, weefsels, etc. zijn. |
| Sterke affiniteit | Aptameren vertonen een hoge specificiteit en affiniteit voor in vitro screening van doelmoleculen. |
| Stabiliteit | Aptameren zijn klein, gemakkelijk te verkrijgen, reproduceerbaar in synthese en hun stabiliteit kan worden verbeterd door chemische synthese en modificatie. De aptameren zijn chemisch stabiel, hebben een lange houdbaarheid en kunnen bij kamertemperatuur worden getransporteerd. |
01/
Klinische geneeskunde: gerichte tumortherapie, kankerdiagnostische technieken
De kredietrapporten van Gladtrust zijn succesvol samengesteld op basis van de grootste online database met bedrijfskredietinformatie: CreditVision.
De database verzamelt en actualiseert op tijd informatie uit meer dan 200.000 gegevensbronnen. Het proces voor het actualiseren en beheren van de informatie garandeert dat de informatie tot in de puntjes nauwkeurig is.
De database verzamelt en actualiseert op tijd informatie uit meer dan 200.000 gegevensbronnen. Het proces voor het actualiseren en beheren van de informatie garandeert dat de informatie tot in de puntjes nauwkeurig is.
02/
Analytisch testgebied: detectie van organische verontreinigende stoffen, detectie van kleine moleculaire geneesmiddelen, detectie van door voedsel overgedragen pathogenen
Op dit gebied zal de technologie voor de synthese van nucleïnezuuraptameer worden gebruikt in combinatie met immunochromatografie van colloïdaal goud, waarbij eerst colloïdaal goud wordt bereid en de kwaliteit ervan wordt bepaald. Vervolgens wordt het verbonden met het nucleïnezuuraptameer, gekarakteriseerd en op een bindingspad gespoten. Vervolgens worden teststrips bereid met het te detecteren polyklonale antilichaam als detectielijn en de complementaire sequentie van het nucleïnezuuraptameer als kwaliteitscontrolelijn, om op basis van de resultaten van de negatieve en positieve experimenten de aanwezigheid van de doelstof te analyseren.
03/
Biologisch veld: ontwikkeling van biosensoren
Nucleïnezuuraptameersensoren gebruiken het aptameer als herkenningselement om een doelstof te herkennen en het herkenningsresultaat om te zetten in een meetbaar signaal. De signaalomzetting kan elektrochemisch, optisch, temperatuur-, piëzo-elektrisch, magnetisch en micromechanisch zijn, of een combinatie van deze technieken. Vergeleken met de bestaande detectiemethoden zijn op nucleïnezuuraptameer gebaseerde sensoren over het algemeen eenvoudig te bedienen, specifiek, responsief en gevoelig. Deze voordelen maken ze gemakkelijker toepasbaar in echte monsters en bieden goede ontwikkelingsperspectieven.
SELEX Aptamer Synthese Service
De SELEX-aptamersyntheseservice van Alpha Lifetech omvat onder andere de constructie van een SELEX-aptamerbibliotheek, SELEX-optimalisatie en meer. Alpha Lifetech streeft ernaar om SELEX-aptameren met een hoge affiniteit en specificiteit te verkrijgen voor klanten via een in-vitroscreeningproces.
LEES MEER
Nucleïnezuur-aptameerontwikkelingsservice
De nucleïnezuuraptamer-ontwikkelingsdienst van Alpha Lifetech is hoofdzakelijk gebaseerd op SELEX-technologie voor SELEX-aptamerscreening, waaronder de ontwikkeling van DNA-aptameren, RNA-aptameren en XNA-aptameren, waarbij bibliotheekontwerp, oligonucleotidesynthese, bibliotheekconstructie en verificatie betrokken zijn.
LEES MEERIndien u vragen heeft, kunt u te allen tijde contact met ons opnemen.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102