Hybridoma-technologieplatform
Alpha Lifetech levert klanten kwaliteitsgegarandeerde antilichaam- en recombinante antilichaamproducten en -diensten.
NEEM CONTACT MET ONS OP01
Hybridoma-technologieplatform
Alpha Lifetech heeft ruime ervaring op het gebied van antilichaamontwikkeling. In de loop der jaren heeft Alpha Lifetech een uitgebreid platform voor antilichaamontwikkeling ontwikkeld (inclusief de ontwikkeling van monoklonale antilichamen, polyklonale antilichamen, recombinante monoklonale antilichamen en andere diensten voor de voorbereiding en ontwikkeling van antilichamen).
Alpha Lifetech levert klanten producten en diensten met kwaliteitsgarantie voor antilichamen en recombinante antilichamen. De bereide antilichamen hebben een hoge specificiteit en goede stabiliteit. Diverse antilichaamzuiveringsinstrumenten en -apparatuur kunnen worden gebruikt om antilichaamzuiveringsdiensten te leveren uit verschillende bronnen, zoals monoklonale antilichamen van konijnen, schapen, kippen en muizen, evenals diensten voor proteïne A/G-affiniteitszuivering en antilichaamscheiding.
Op basis van diverse antilichaampreparatietechnieken, zoals hybridomaceltechnologie, kan Alpha Lifetech maatwerkdiensten leveren voor monoklonale en polyklonale antilichamen van verschillende soorten. Daarnaast bieden we een scala aan diensten, van high-throughput sequencing, antilichaampreparatie en -zuivering tot antilichaamvalidatie. We kiezen de zuiveringsmethode op basis van het specifieke doel van de klant. Alpha Lifetech biedt upstream- en downstreamdiensten voor de productie van antilichamen, waaronder antilichaamzuivering, high-throughput sequencing, antilichaamvalidatie en andere technische diensten.
Hybridoma-technologie
Hybridoomtechnologie kan worden gebruikt om monoklonale antilichamen te bereiden. Door miltcellen van geïmmuniseerde muizen te fuseren met myeloomcellen van mensen of muizen, worden hybridoomcellen gevormd die specifieke antilichamen afscheiden. De gegenereerde, van muizen afkomstige monoklonale antilichamen kunnen worden gebruikt in wetenschappelijk onderzoek, zoals enzyme-linked immunosorbent assay, radioimmunoassay, immunohistochemie, flowcytometrie, eiwitzuivering, enz. Monsters van monoklonale antilichamen omvatten ascites, hybridoomsupernatant, enz. Het monster dat wordt verkregen door hybridoomcellen in de buikholte van dieren te injecteren en de fysiologische omgeving van de buikholte van het dier te gebruiken om antilichamen te produceren, wordt een ascitesmonster genoemd. Hybridoomcellen die in de buikholte van dieren worden geïnjecteerd, kunnen prolifereren en monoklonale antilichamen afscheiden, die zich kunnen ophopen in ascites. Vanwege de mogelijkheid van onzuiverheden (dierlijke eiwitten, hormonen, enz.) in deze antilichamen, is zuivering vereist. Gebaseerd op de secretiefunctie van B-lymfocyten, worden monoklonale antilichamen vaak uitgescheiden in het kweekmedium bij het kweken van hybridoomcellen. De vloeistof met monoklonale antilichamen in het kweekmedium wordt hybridoma-supernatant genoemd. De zuiverheid van monoklonale antilichamen in de supernatant is relatief hoog, maar verdere zuivering is vereist voor grootschalige bereiding, omdat ze worden verkregen via in-vitrokweek.
Zuivering van antilichamen kan zeer zuivere antilichamen uit complexen isoleren. Momenteel zijn affiniteitszuivering en scheiding en zuivering van antilichamen veelgebruikte methoden voor antilichaamzuivering, waaronder voornamelijk proteïne A/G-zuivering, ionenuitwisselingschromatografie, gelfiltratie, precipitatie en hydrofobe interactiechromatografie. Affiniteitszuivering van proteïne A/G is een van de meest gebruikte methoden voor antilichaamzuivering in diverse toepassingen. Het proces van de bereiding van monoklonale antilichamen door Alpha Lifetech op basis van hybridomatechnologie wordt weergegeven in Figuur 1.
Figuur 1 Procesdiagram voor het bereiden van monoklonale antilichamen op basis van hybridoomtechnologie.
Antilichaam-geneesmiddelconjugaat- en hybridoomtechnologie
Antilichaam-geneesmiddelconjugaat (ADC) is een nieuw biologisch middel dat antilichamen chemisch koppelt aan cytotoxische geneesmiddelen. Antilichaam-geneesmiddelconjugaat combineert het specifieke herkenningsvermogen van antilichamen met de krachtige dodende werking van cytotoxische geneesmiddelen en brengt cytotoxische geneesmiddelen nauwkeurig in tumorcellen via antilichamen, wat een precieze behandeling mogelijk maakt. Het antilichaamgedeelte in ADC-geneesmiddelen wordt vaak bereid met behulp van hybridoomtechnologie of andere antilichaamproductietechnieken, zoals genetische manipulatie. Hybridoomtechnologie levert hoogwaardige antilichaamgrondstoffen voor ADC-geneesmiddelen. ADC-geneesmiddelen en monoklonale antilichamen die met behulp van hybridoomtechnologie worden bereid, spelen een belangrijke rol in vakgebieden zoals kankerbehandeling. Ze kunnen afzonderlijk of in combinatie worden gebruikt om de therapeutische werkzaamheid te verbeteren.
Monoklonale antilichamen bereid met hybridomatechnologie hebben een hoge specificiteit, kunnen specifieke antigenen nauwkeurig binden en herkennen, en kunnen op grote schaal worden geproduceerd. Door middel van hybridomasequentietechnologie kunnen antilichaamgenen in hybridomacellen worden geëxtraheerd en gesequenced om corresponderende sequenties te verkrijgen, wat gunstig is voor de daaropvolgende antilichaamexpressie. Monoklonale antilichamen bereid met hybridomatechnologie kunnen worden gebruikt om specifieke ziektemarkers te detecteren, zoals tumormarkers, virale antigenen, enz., wat een sterke ondersteuning biedt voor vroege diagnose van ziekten. Daarnaast kunnen ze ook worden gebruikt in experimenten zoals immunoblotting en immunohistochemie om eiwitexpressie, -lokalisatie, -structuur en -functie te bestuderen.
Hybridoma-technologie Productie Antilichaam Service Workflow
| Stappen | Service-inhoud | Tijdlijn |
|---|---|---|
| Stap 1: Vaccinatie van dieren | (1) Vaccinatie van dieren 4 keer, boostervaccinatie 1 dosis, in totaal 5 doses geïmmuniseerd. (2) Vóór de immunisatie werd negatief serum verzameld en bij de vierde dosis werd ELISA uitgevoerd om de serumtiter te bepalen. (3) Indien de serumantilichaamtiter van de vierde dosis aan de eisen voldoet, wordt 7 dagen vóór de bloedafname een extra vaccinatiedosis toegediend. Indien deze niet aan de eisen voldoet, wordt de routinematige vaccinatie voortgezet. (4) Gekwalificeerde potentie, miltcellen worden geïsoleerd voor celfusie. | 10-12 weken |
| Stap 2: Fusie en screening | (1) Fusie: Na immunisatie werden muizenmiltcellen verzameld en gefuseerd met myelomacellen. (2) Proliferatie en screening: De verkregen hybridomacellen werden onderworpen aan proliferatie en ELISA-screening om zeer efficiënte klonen te verkrijgen. | 6 weken |
| Stap 3: Subkloon | Subklonen van 15-25 positieve moedercellen met behulp van de beperkte verdunningsmethode en uiteindelijk het bepalen van 10-15 positieve klonen | 3-4 weken |
| Stap 4: Ascitesproductie en antilichaamzuivering | (1) Ascitesproductie: 10-15 hybridomastammen worden gebruikt voor ascitesproductie bij muizen (als er een groot aantal hybridomastammen wordt verkregen, worden deze in cellulaire vorm verzonden) (2) Ascites-identificatie: Ascites ELISA-detectie, potentie (eiwit/virus>10^5, klein molecuul/peptide>10^4) voor verdere zuivering (3) Zuivering van proteïne A/G: zuivering van ascites | 3-4 weken |
| Stap 5: Levering | (1) Zorg voor 3-5 monoklonale antilichaam-hybridoomstammen. (2) Elke hybridomacel levert 1 mg gezuiverd antilichaam (asciteszuivering). (3) Experimenteel procesrapport | 1 week |
Meerdere soorten
Immuniteit kan worden verleend aan verschillende dieren, waaronder maar niet beperkt tot muizen, konijnen, schapen, enz.
Meerdere doelen
Op basis van hybridomatechnologie zijn er meerdere doelwit-antilichaamontdekkingsdiensten beschikbaar: eiwitten, peptiden, kleine moleculen, virussen, membraaneiwitten, mRNA, enzovoort.
Traceerbaarheidsrecords
Kwaliteitscontrolenormen voor kwaliteitscontrole (immuniteitspotentie, PBMC-kwaliteitscontrole, bibliotheekkwaliteitscontrole en screeningvalidatiekwaliteitscontrole), Engelse experimentele rapporten, originele experimentele verslagen
Gepersonaliseerd programma
Een op een gepersonaliseerde programma-aanpassing om te voldoen aan de onderzoeksprojectbehoeften van verschillende klanten
Dienst voor de ontwikkeling van monoklonale antilichamen
Wij kunnen hoogwaardige, zeer zuivere en zeer specifieke diensten leveren voor de ontwikkeling van monoklonale antilichamen, waaronder de productie van monoklonale antilichamen van muizen en konijnen.
Hybridoma-technologieplatform
Inclusief immunisatieprogramma's, antilichaambereidingsdiensten, antilichaamzuivering, high-throughput sequencing van antilichamen, antilichaamvalidatie, enz.
Sorteerplatform voor enkele B-cellen
Alpha Lifetech biedt voordelen op het gebied van screeningtijd en het verkrijgen van hoogwaardige antilichamen. Het bedrijf kan antigeenontwerp, -synthese en -modificatie, dierlijke immuniteit, screening van individuele B-celverrijking en sequencing van individuele cellen verzorgen.
Platform voor de ontwikkeling van fagedisplay-antilichamen
Alpha Lifetech kan technische diensten verlenen voor de ontwikkeling van fagedisplay-antilichamen, zoals de bereiding van antilichamen, de zuivering van antilichamen, het sequensen van antilichamen, enzovoort.
Gerelateerde technologische bron
Inleiding tot hybridomatechnologieVIDEO
Indien u vragen heeft, kunt u te allen tijde contact met ons opnemen.
Leave Your Message
2018-07-16 
0102