Hybridoma-technologieplatform
Alpha Lifetech levert klanten kwaliteitsgegarandeerde antilichaam- en recombinantantilichaamproducten en -diensten.
NEEM CONTACT MET ONS OP01
Hybridoma-technologieplatform
Alpha Lifetech heeft ruime ervaring op het gebied van antilichaamontwikkeling. In de loop der jaren heeft Alpha Lifetech een uitgebreid platform voor antilichaamontwikkeling opgebouwd (inclusief de ontwikkeling van monoklonale antilichamen, polyklonale antilichamen, recombinante monoklonale antilichamen en andere diensten voor de bereiding en ontwikkeling van antilichamen).
Alpha Lifetech levert klanten kwaliteitsgegarandeerde antilichaam- en recombinant-antilichaamproducten en -diensten. De geproduceerde antilichamen kenmerken zich door een hoge specificiteit en goede stabiliteit. Er worden diverse antilichaamzuiveringsinstrumenten en -apparatuur ingezet om antilichaamzuiveringsdiensten te leveren vanuit verschillende bronnen, zoals monoklonale antilichamen van konijnen, schapen, kippen en muizen. Daarnaast bieden we ook affiniteitszuivering met proteïne A/G en antilichaamscheidingsdiensten aan.
Op basis van diverse antilichaambereidingstechnieken, zoals hybridoma-celtechnologie, kan Alpha Lifetech maatwerk leveren voor monoklonale en polyklonale antilichamen van verschillende soorten. Daarnaast bieden we een breed scala aan diensten, van high-throughput sequencing en antilichaambereiding tot antilichaamzuivering en -validatie. De zuiveringsmethode wordt afgestemd op het specifieke doel van de klant. Dankzij uitgebreide platformsystemen, zoals een antilichaamontwikkelingsplatform en een eiwitplatform, bestrijkt Alpha Lifetech alle fasen van de antilichaamproductie, inclusief antilichaamzuivering, high-throughput sequencing, antilichaamvalidatie en andere technische diensten.
Hybridoma-technologie
Hybridoma-technologie kan worden gebruikt om monoklonale antilichamen te produceren. Door miltcellen van geïmmuniseerde muizen te fuseren met myeloomcellen van mensen of muizen, worden hybridoma-cellen gevormd die specifieke antilichamen afscheiden. De gegenereerde, van muizen afgeleide monoklonale antilichamen kunnen worden gebruikt in wetenschappelijk onderzoek, zoals ELISA, radio-immunoassay, immunohistochemie, flowcytometrie, eiwitzuivering, enzovoort. Monsters van monoklonale antilichamen omvatten ascitesvloeistof, hybridoma-supernatant, enzovoort. Het monster dat wordt verkregen door hybridoma-cellen in de buikholte van dieren te injecteren en de fysiologische omgeving van de buikholte te gebruiken om antilichamen te produceren, wordt ascitesvloeistof genoemd. Hybridoma-cellen die in de buikholte van dieren worden geïnjecteerd, kunnen prolifereren en monoklonale antilichamen afscheiden, die zich kunnen ophopen in ascitesvloeistof. Vanwege de mogelijke aanwezigheid van onzuiverheden (dierlijke eiwitten, hormonen, enz.) in deze antilichamen is zuivering noodzakelijk. Op basis van de secretiefunctie van B-lymfocyten worden monoklonale antilichamen vaak in het kweekmedium afgescheiden tijdens het kweken van hybridoma-cellen. De vloeistof die monoklonale antilichamen in het kweekmedium bevat, wordt hybridoma-supernatant genoemd. De zuiverheid van de monoklonale antilichamen in het supernatant is relatief hoog, maar verdere zuivering is nodig voor grootschalige productie, aangezien ze worden verkregen via in vitro-kweek.
Antilichaamzuivering maakt het mogelijk om zeer zuivere antilichamen uit complexen te isoleren. Momenteel zijn affiniteitszuivering en scheiding en zuivering van antilichamen veelgebruikte methoden voor antilichaamzuivering, waaronder met name proteïne A/G-zuivering, ionenwisselingschromatografie, gelfiltratie, precipitatie en hydrofobe interactiechromatografie. Proteïne A/G-affiniteitszuivering is hierbij een populaire methode voor diverse antilichaamzuiveringstoepassingen. Figuur 1 toont het proces waarmee Alpha Lifetech monoklonale antilichamen bereidt op basis van hybridoma-technologie.
Figuur 1. Procesdiagram voor de bereiding van monoklonale antilichamen op basis van hybridoma-technologie.
Antilichaam-geneesmiddelconjugaten en hybridoma-technologie
Een antilichaam-geneesmiddelconjugaat (ADC) is een nieuw biologisch middel dat antilichamen chemisch koppelt aan cytotoxische geneesmiddelen. Een ADC combineert het specifieke herkenningsvermogen van antilichamen met de krachtige dodende werking van cytotoxische geneesmiddelen, waardoor cytotoxische geneesmiddelen via antilichamen nauwkeurig in tumorcellen worden afgeleverd en een precieze behandeling mogelijk wordt. Het antilichaamgedeelte in ADC-geneesmiddelen wordt vaak geproduceerd met behulp van hybridoma-technologie of andere antilichaamproductietechnieken, zoals genetische modificatie van antilichamen. Hybridoma-technologie levert hoogwaardige antilichaamgrondstoffen voor ADC-geneesmiddelen. ADC-geneesmiddelen en monoklonale antilichamen die met behulp van hybridoma-technologie worden geproduceerd, spelen een belangrijke rol in gebieden zoals de kankerbehandeling. Ze kunnen afzonderlijk of in combinatie worden gebruikt om de therapeutische werkzaamheid te verhogen.
Monoklonale antilichamen die met behulp van hybridoma-technologie worden geproduceerd, hebben een hoge specificiteit, kunnen specifieke antigenen nauwkeurig binden en herkennen, en kunnen op grote schaal worden geproduceerd. Door middel van hybridoma-sequencingtechnologie kunnen antilichaamgenen in hybridoma-cellen worden geëxtraheerd en gesequenced om de corresponderende sequenties te verkrijgen, wat gunstig is voor de daaropvolgende antilichaamexpressie. Monoklonale antilichamen die met behulp van hybridoma-technologie worden geproduceerd, kunnen worden gebruikt om specifieke ziektemarkers op te sporen, zoals tumormarkers, virale antigenen, enz., en bieden daarmee een sterke ondersteuning voor de vroege diagnose van ziekten. Daarnaast kunnen ze ook worden gebruikt in experimenten zoals immunoblotting en immunohistochemie om de expressie, lokalisatie, structuur en functie van eiwitten te bestuderen.
Hybridoma-technologie Productie Antilichaam Service Workflow
| Stappen | Service-inhoud | Tijdlijn |
|---|---|---|
| Stap 1: Immunisatie van de dieren | (1) Dierlijke immunisatie 4 keer, boostervaccinatie 1 dosis, in totaal 5 doses geïmmuniseerd. (2) Negatief serum werd vóór de immunisatie verzameld en ELISA werd uitgevoerd op de vierde dosis om de serumtiter te bepalen. (3) Indien de serumantilichaamtiter van de vierde dosis aan de vereisten voldoet, wordt 7 dagen vóór de bloedafname nog een extra dosis immunisatie toegediend. Indien deze niet aan de vereisten voldoet, wordt de routinematige immunisatie voortgezet. (4) Gekwalificeerde potentie, Miltcellen worden geïsoleerd voor celfusie. | 10-12 weken |
| Stap 2: Fusie en screening | (1) Fusie: Na immunisatie werden miltcellen van muizen verzameld en gefuseerd met myeloomcellen. (2) Proliferatie en screening: De verkregen hybridomacellen werden onderworpen aan proliferatie en ELISA-screening om zeer efficiënte klonen te verkrijgen. | 6 weken |
| Stap 3: Subklonen | Subklonering van 15-25 positieve moedercellen met behulp van de beperkte verdunningsmethode, en uiteindelijk het bepalen van 10-15 positieve klonen. | 3-4 weken |
| Stap 4: Ascitesproductie en antilichaamzuivering | (1) Ascitesproductie: 10-15 hybridoma-stammen worden gebruikt voor ascitesproductie bij muizen (indien een groot aantal hybridoma-stammen wordt verkregen, worden deze in cellulaire vorm verzonden). (2) Ascitesidentificatie: Ascites ELISA-detectie, potentie (eiwit/virus > 10^5, klein molecuul/peptide > 10^4) voor verdere zuivering (3) Zuivering van proteïne A/G: Zuivering van ascites | 3-4 weken |
| Stap 5: Levering | (1) Lever 3-5 monoklonale antilichaam-hybridoma-stammen aan. (2) Elke hybridomacel levert 1 mg gezuiverd antilichaam (asciteszuivering). (3) Experimenteel procesrapport | 1 week |
Meerdere soorten
Immuniteit kan worden geboden aan diverse dieren, waaronder maar niet beperkt tot muizen, konijnen, schapen, enz.
Meerdere doelen
Op basis van hybridoma-technologie zijn er diensten beschikbaar voor het ontdekken van antilichamen gericht op meerdere doelwitten: eiwitten, peptiden, kleine moleculen, virussen, membraaneiwitten, mRNA, enzovoort.
Traceerbaarheidsgegevens
QC-kwaliteitscontrolenormen (immuunpotentie, PBMC-kwaliteitscontrole, bibliotheekkwaliteitscontrole en kwaliteitscontrole van screeningsvalidatie), Engelstalige experimentele rapporten, originele experimentele gegevens
Gepersonaliseerd programma
Een op maat gemaakt, individueel programma dat aansluit op de specifieke behoeften van diverse onderzoeksprojecten.
Ontwikkelingsservice voor monoklonale antilichamen
Wij kunnen hoogwaardige, zeer zuivere en zeer specifieke diensten leveren voor de ontwikkeling van monoklonale antilichamen, waaronder de productie van monoklonale antilichamen van muizen en monoklonale antilichamen van konijnen.
Hybridoma-technologieplatform
Dit omvat onder andere vaccinatieprogramma's, diensten voor de bereiding van antilichamen, antilichaamzuivering, high-throughput sequencing van antilichamen en antilichaamvalidatie.
Platform voor het sorteren van individuele B-cellen
Alpha Lifetech heeft voordelen op het gebied van screeningstijd en het verkrijgen van hoogwaardige antilichamen. Het bedrijf kan diensten leveren op het gebied van antigeenontwerp, -synthese en -modificatie, dierimmuniteit, screening van individuele B-cellen en single-cell sequencing.
Fagendisplay-antilichaamontwikkelingsplatform
Alpha Lifetech kan technische diensten leveren voor de ontwikkeling van antilichamen via faagdisplay, van antilichaampreparatie en -zuivering tot antilichaamsequentiebepaling.
Gerelateerde technologiebron
Inleiding tot de hybridoma-technologieVIDEO
Heeft u vragen? Neem dan gerust contact met ons op.
Leave Your Message
16-07-2018 
0102