Zuiveringsservice voor membraaneiwitten

Alpha Lifetech heeft met succes duizenden recombinante eiwitten voor onze klanten geproduceerd, waaronder recombinante antilichamen, secretoire eiwitten, transmembraaneiwitten, proteasen, enz., met een hoog slagingspercentage. Klanten hoeven alleen een eiwitsequentie, CDS of eiwitnaam aan te leveren, en Alpha Lifetech kan binnen korte tijd een compleet expressie- en zuiveringsplan voor fusie-eiwitten ontwikkelen. We bieden op maat gemaakte eiwitexpressiediensten aan op basis van de vier belangrijkste expressiesystemen en kiezen verschillende expressie- en zuiveringsstrategieën voor fusie-eiwitten afhankelijk van de behoeften van de klant.

Alpha Lifetech beschikt over een breed scala aan instrumenten en apparatuur voor eiwitzuivering, waarmee zowel natuurlijke als recombinante eiwitzuivering kan worden uitgevoerd. Voorbeelden van dergelijke zuiveringsmethoden zijn affiniteitszuivering, moleculaire zeefchromatografie, ionenwisselingschromatografie en hydrofobe chromatografie. We kiezen de zuiveringsmethode op basis van de specifieke behoeften van onze klanten en combineren deze met ons eiwitzuiveringsplatform om in korte tijd hoogwaardige eiwitproducten te verkrijgen.

Classificatie van membraaneiwitten

Op basis van de verdeling van eiwitten in het membraan en de relatie tussen membraaneiwitten en membraanlipiden worden membraaneiwitten onderverdeeld in drie categorieën: perifere membraaneiwitten, geïntegreerde membraaneiwitten en lipideverankerende eiwitten.

Ionkanaalproteïne

Ionkanaalproteïnen zijn geïntegreerde membraanproteïnen die zich in biologische membranen nestelen en specifieke kanaalstructuren vormen. Hierdoor kunnen bepaalde ionen selectief door membranen binnen en buiten de cel worden getransporteerd, terwijl andere ionen worden tegengehouden. De selectiviteit van ionkanaalproteïnen is cruciaal voor het behoud van cellulaire levensfuncties, zoals het reguleren van de ionenconcentratie binnen en buiten de cel, het transport van neurotransmitters, enzovoort.

G-proteïne-gekoppelde receptoren

G-proteïnegekoppelde receptoren is een algemene term voor een grote klasse membraanproteïnereceptoren, die de meest voorkomende celoppervlakreceptoren in eukaryoten zijn. De belangrijkste functie van G-proteïnegekoppelde receptoren is het overbrengen van informatie van buiten de cel naar het binnenste van de cel door interactie met G-proteïnen, en spelen zo een belangrijke rol in signaaltransductie. G-proteïnegekoppelde receptoren herkennen en binden aan liganden van buiten de cel om intracellulaire signaalroutes te activeren en zo diverse fysiologische activiteiten van cellen te reguleren.

Virusachtige deeltjes

Een virusachtig deeltje is een eiwitdeeltje dat gevormd wordt door de zelfassemblage van een of meer structurele eiwitten van een virus. Deze deeltjes lijken qua morfologie en structuur op natuurlijke virusdeeltjes, maar bevatten niet het genetisch materiaal van het virus en zijn daarom niet besmettelijk.

Virusachtige deeltjes kunnen dienen als platform voor de presentatie van membraaneiwitten. Door specifieke membraaneiwitten op virusachtige deeltjes weer te geven, simuleren ze de conformatie en functie van membraaneiwitten in natuurlijke omgevingen. Bij de ontwikkeling van vaccins kunnen beschermende antigenen van het virus, meestal membraaneiwitten, op virusachtige deeltjes worden weergegeven om het lichaam te stimuleren tot het produceren van immuunreacties tegen deze antigenen. Vaccins die op deze manier worden bereid, zijn zeer veilig en immunogeen.

Zuivering van membraaneiwitten

Er bestaan verschillende methoden voor het zuiveren van membraaneiwitten. Affiniteitschromatografie maakt gebruik van de affiniteit van membraaneiwitten zelf of van fusietags, zoals His-tags, met hun specifieke liganden om membraaneiwitten te zuiveren en te scheiden. Ionuitwisselingschromatografie maakt gebruik van de ladingseigenschappen van membraaneiwitten om ze te scheiden op ionenwisselingsharsen. Membraaneiwitoplossingen bevatten echter vaak detergenten, en de filtratie kan de effectiviteit van ionuitwisselingschromatografie beïnvloeden. Gelfiltratiechromatografie maakt gebruik van het verschil in moleculair gewicht van membraaneiwitten om ze te scheiden op een gelkolom. Met deze methode kunnen we membraaneiwitten met een hoge zuiverheid verkrijgen. Dankzij de affiniteit en hydrofobiciteit van membraaneiwitten kunnen ze worden gescheiden op chromatografische kolommen. Deze methode is efficiënt, snel en zeer gevoelig, maar de kosten zijn ook relatief hoog.

membraaneiwitzuivering - Alpha Lifetech

Figuur 1. Principediagram van eiwitaffiniteitszuivering.

Voordelen van membraaneiwitzuiveringWAAROM kiezen voor

Codonoptimalisatie

Een hoge expressie van oplosbare eiwitten en een hoge eiwitactiviteit kunnen worden gegarandeerd.

Verschillende fermentatiemethoden voor eiwitten: kleinschalig (1L, 10L en 30L), grootschalig (fermentatietanks van 80L, 130L, 250L en 500L)

Bereiding van zeer zuivere recombinante eiwitten in milligrammen en grammen in een korte tijdspanne.

Laag endotoxinegehalte: LAL-detectiemethode

Een compleet GMP-documentatiesysteem garandeert de traceerbaarheid van alle materialen, reagentia en bereidingsinformatie voor het product.

Terug naar de pagina over het membraaneiwitplatform

Heeft u vragen? Neem dan gerust contact met ons op.

Leave Your Message

Uitgelichte service

0102