Faagdisplaysysteem
Alpha Lifetech is al jarenlang nauw betrokken bij faagdisplaytechnologie. Alpha Lifetech heeft een perfect stabiel platform voor faagdisplaytechnologie ontwikkeld dat tijd bespaart bij wetenschappelijk onderzoek of projectonderzoek en de daaropvolgende productie vergemakkelijkt. We hebben verschillende faagdisplaysystemen beschikbaar waaruit klanten kunnen kiezen, waaronder M13-faag, T7-faag, T4-faag en λ-faagdisplaysystemen. Afhankelijk van uw experimentele behoeften kunt u het juiste faagdisplaysysteem selecteren. Alpha Lifetech kan klanten ook diensten aanbieden zoals de productie van VHH-antilichamen, SCFV-antilichamen en Fab-antilichamen.
Inleiding tot fagedisplay
Faagdisplaytechnologie is een techniek die fagen (een virus dat bacteriën infecteert) gebruikt om te zoeken naar functionele bindende moleculen van specifieke eiwitten of peptiden. Technieken voor de constructie van faag-antilichaambibliotheken omvatten Fab-antilichaambibliotheekconstructie, scFv-antilichaambibliotheekconstructie, vhh-antilichaambibliotheekconstructie, enz. Afhankelijk van het type bacteriofaag kunnen ze worden onderverdeeld in bacteriofaag m13, T7-bacteriofaag, T4-bacteriofaag, λ-bacteriofaag en andere bacteriofaag. Afhankelijk van het type bibliotheek kan deze worden onderverdeeld in een willekeurige peptidebibliotheek, cDNA-bibliotheek, antilichaambibliotheek en eiwitbibliotheek. Faagdisplaytechnologie is eenvoudig te bedienen en goedkoop in gebruik en omvat Fab-faagdisplay, scFV-faagdisplay en Vhh-faagdisplay. Deze techniek beperkt echter de diversiteit aan moleculaire genetica in de bibliotheek die niet te lange sequenties tot expressie kan brengen.
Met behulp van faagdisplaytechnologie kan een fysieke verbinding worden gemaakt tussen het getoonde molecuul en de DNA-sequentie die voor het getoonde molecuul codeert. Bovendien kan de aminozuursequentie van een specifiek conjugaat onmiddellijk worden bepaald door DNA-sequencing van het gewenste fragment in het faaggenoom.
Momenteel wordt faagdisplaytechnologie breed toegepast. Belangrijke resultaten zijn onder meer te vinden in het onderzoek naar en de ontwikkeling van nieuwe vaccins (goedkope en efficiënte synthetische vaccins), de ontwikkeling van antilichaamgeneesmiddelen (screening van enzymremmers), celsignaaltransductie (screening van gesimuleerde epitopen) en het onderzoek naar antigeenepitopen (bereiding van monoklonale antilichamen).
Principe van fagedisplay
Faagdisplay is een moleculaire technologie gebaseerd op genetische modificatie van faag-DNA, waarbij het doelfragment aan het faagmanteleiwit bindt en het zo tot expressie brengt op het faagoppervlak. De vreemde DNA-sequentie wordt geïntroduceerd op een specifieke locatie in de nucleotidesequentie van het faaggenoom die codeert voor een faagmanteleiwit (Figuur 1).
Wanneer een faaginfectie optreedt, begint het faaggen tot expressie te komen in de bacteriële gastheer en wordt het ingevoegde doelwitfragment op het faagoppervlak weergegeven als een combinatie van het verwante gen dat codeert voor het manteleiwit en de gekloonde sequentie.

Figuur 1 Architectuur van het bacteriofaag M13-virion en principe van de fagedisplaytechnologie.(Referentiebron:Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
fage displaysystemen
Filamenteuze fagen zijn het meest gebruikte faagdisplaysysteem, en faagdisplaysystemen kunnen met andere fagen worden geconstrueerd. Dergelijke systemen kunnen relatief grote peptiden of cDNA-bibliotheken efficiënter weergeven dan systemen op basis van filamenteuze fagen.

Figuur 2. Soorten bacteriofagen die worden gebruikt bij fagedisplay.(Referentiebron:Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Voordelen van het fagendisplaysysteem
Faagdisplaysystemen maken meestal gebruik van filamenteuze fagen, waaronder M13, fd en f1. Vergeleken met M13-fagen bestaan T7-bacteriofaagfagen uit dubbelstrengs DNA, dat stabieler is en minder vatbaar voor mutaties tijdens de replicatie. De T7-faag groeit als drager snel en kan binnen 3 uur plaques vormen, wat veel tijd bespaart bij het klonen en screenen.
De constructie van T7-faagbibliotheken is gebruikt voor genexpressie aan zowel het oppervlak als daarbuiten, en voor de constructie van displaybibliotheken van peptiden, cDNA, genomisch DNA en antilichamen. Hierdoor kan T7-faag niet alleen worden gebruikt als antimicrobieel middel, maar ook voor het screenen van medicijndoelen in orgaantargets (zoals hersenen, lever en longen), het screenen van antilichaamherkenningsdoelen, onderzoek naar fysiologische mechanismen, enz. Het kan ook worden gebruikt voor de diagnose en behandeling van diverse ziekten.
Andere vormen van bacteriofagen
Selectief infectieuze fage
In tegenstelling tot traditionele fagedisplay koppelt selectieve infectieve fagen (SIP) interacties tussen productieproteïnen en liganden direct aan fage-infectie en -expansie, zonder dat er elutiestappen nodig zijn.

Figuur 3 Selectief infectieuze faag (SIP).(Referentiebron:Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Landschapsfagen
Landschapsfagen worden veroorzaakt door duizenden kopieën van vreemde peptiden die rond buisvormige capsiden zijn gerangschikt in superstrakke, herhalende patronen. De polyvalente presentatie op landschapsfagen stimuleert selectie met hoge affiniteit, waardoor het onmogelijk is om onderscheid te maken tussen hoge en lage affiniteit van peptideliganden.

Figuur 4 Het idee van landschapsfagen. (Referentiebron:Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))


Meerdere fagendisplaysystemen
Klanten kunnen kiezen uit een M13-faag, T7-faag, T4-faag en λ-faagdisplaysysteem.


Hoge doorvoer screeningscapaciteit
Met behulp van fagedisplaysystemen kunnen we snel grootschalige fagebibliotheken opbouwen en high-throughput screeningexperimenten uitvoeren.


Aangepaste fagendisplayservice
Klanten kunnen uitgebreide diensten op maat aanbieden op basis van de projectvereisten, zoals het screenen van antilichamen met een hoge affiniteit, enzovoort.


Breed toepassingsbereik
Toepasbaar in vakgebieden zoals antilichaamtechnologie, peptide- en proteïnetechnologie, geneesmiddelenontdekking en -ontwikkeling, onderzoek naar proteïne-interacties, etc.
Indien u vragen heeft, kunt u te allen tijde contact met ons opnemen.
Leave Your Message
0102