Fage-displaysysteem
Alpha Lifetech heeft een perfect stabiel faagdisplaysysteem ontwikkeld dat tijd bespaart voor wetenschappelijk onderzoek of projectonderzoek en de daaropvolgende productie vergemakkelijkt.
NEEM CONTACT MET ONS OP01
Fage-displaysysteem
Alpha Lifetech is al vele jaren intensief betrokken bij faagdisplaytechnologie. Alpha Lifetech heeft een perfect stabiel faagdisplayplatform ontwikkeld dat tijd bespaart bij wetenschappelijk onderzoek of projectonderzoek en de daaropvolgende productie vergemakkelijkt. We bieden klanten diverse faagdisplaysystemen aan, waaronder M13-, T7-, T4- en λ-faagdisplaysystemen. Afhankelijk van uw experimentele behoeften kunt u het juiste faagdisplaysysteem selecteren. Alpha Lifetech kan klanten ook diensten aanbieden zoals de productie van VHH-antilichamen, SCFV-antilichamen en Fab-antilichamen.
Inleiding tot faagdisplay
Fagedisplaytechnologie is een techniek die fagen (een virus dat bacteriën infecteert) gebruikt om functionele bindingsmoleculen van specifieke eiwitten of peptiden op te sporen. Technieken voor de constructie van fage-antilichaambibliotheken omvatten onder andere de constructie van Fab-antilichaambibliotheken, scFv-antilichaambibliotheken en vhh-antilichaambibliotheken. Afhankelijk van het type bacteriofaag kunnen deze worden onderverdeeld in bacteriofaag m13, T7, T4, λ en andere bacteriofagen. Afhankelijk van het type bibliotheek kunnen deze worden onderverdeeld in willekeurige peptidebibliotheken, cDNA-bibliotheken, antilichaambibliotheken en eiwitbibliotheken. Fagedisplaytechnologie is eenvoudig te bedienen en goedkoop in gebruik en omvat technieken zoals Fab-fagedisplay, scFv-fagedisplay en vhh-fagedisplay. Deze techniek beperkt echter de diversiteit van de moleculaire genetica in de bibliotheek, omdat er geen al te lange sequenties mee tot expressie kunnen worden gebracht.
Faagdisplaytechnologie maakt het mogelijk een fysieke verbinding te leggen tussen het weergegeven molecuul en de DNA-sequentie die het weergegeven molecuul codeert. De aminozuursequentie van een specifiek conjugaat kan direct worden bepaald door middel van DNA-sequencing van het gewenste fragment in het faaggenoom.
De faagdisplaytechnologie wordt momenteel veelvuldig gebruikt. Er zijn aanzienlijke successen geboekt op het gebied van onderzoek en ontwikkeling van nieuwe vaccins (goedkope en efficiënte synthetische vaccins), de ontwikkeling van antilichaamgeneesmiddelen (screening van enzymremmers), celsignaaltransductie (screening van gesimuleerde epitopen) en onderzoek naar antigeenepitopen (bereiding van monoklonale antilichamen).
Principe van faagdisplay
Fagedisplay is een moleculaire technologie gebaseerd op genetische modificatie van faag-DNA, waarbij het doelfragment zich bindt aan het faag-mantelproteïne en zo tot expressie wordt gebracht op het faagoppervlak. De vreemde DNA-sequentie wordt ingebracht op een specifieke locatie in de nucleotidevolgorde van het faaggenoom die codeert voor een faag-mantelproteïne (Fig. 1).
Wanneer een faaginfectie optreedt, begint het faaggen tot expressie te komen in de bacteriële gastheer, en het ingevoegde doelfragment wordt op het faagoppervlak weergegeven als een combinatie van het verwante gen dat codeert voor het coatproteïne en de gekloonde sequentie.
Figuur 1. Architectuur van het bacteriofaag M13-virion en het principe van de faagdisplaytechnologie.(Bronverwijzing: Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
faagdisplaysystemen
Filamentachtige fagen zijn het meest gebruikte faagdisplaysysteem, maar faagdisplaysystemen kunnen ook met andere fagen worden geconstrueerd. Dergelijke systemen kunnen relatief grote peptiden weergeven of cDNA-bibliotheken efficiënter screenen dan systemen op basis van filamentachtige fagen.
Figuur 2. Soorten bacteriofagen die worden gebruikt bij faagdisplay.(Bronverwijzing: Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Voordelen van het faagdisplaysysteem
Fagedisplaysystemen maken doorgaans gebruik van draadvormige fagen, waaronder M13, fd en f1. In vergelijking met M13-fagen bestaan T7-bacteriofaagfagen uit dubbelstrengs DNA, wat zorgt voor een grotere stabiliteit en minder kans op mutaties tijdens replicatie. T7-fagen groeien als drager snel en kunnen binnen 3 uur plaques vormen, wat veel tijd bespaart bij klonering en screening.
De constructie van T7-faagbibliotheken is gebruikt voor de expressie van genen op en buiten het oppervlak, en voor het samenstellen van displaybibliotheken van peptiden, cDNA, genomisch DNA en antilichamen. Hierdoor kan de T7-faag niet alleen als antimicrobieel middel worden ingezet, maar ook voor het screenen van geneesmiddeldoelen in organen (zoals de hersenen, lever en longen), het screenen van antilichaamherkenningsdoelen, onderzoek naar fysiologische mechanismen, enzovoort. De faag kan tevens worden gebruikt voor de diagnose en behandeling van diverse ziekten.
Andere vormen van bacteriofagen
Selectief infectieuze faag
In tegenstelling tot traditionele faagdisplay koppelt selectieve infectieuze faag (SIP) de interacties tussen productieproteïne en ligand rechtstreeks aan de infectie en vermenigvuldiging van de faag, zonder dat elutiestappen nodig zijn.
Figuur 3. Selectief infectieuze faag (SIP).(Bronverwijzing: Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Landschapsfagen
Landschapsfagen worden veroorzaakt door duizenden kopieën van vreemde peptiden die in zeer strakke, herhalende patronen rond buisvormige capside-eiwitten zijn gerangschikt. De polyvalente presentatie op landschapsfagen dwingt tot selectie op basis van hoge affiniteit, waardoor het onmogelijk is om onderscheid te maken tussen peptide-liganden met een hoge en lage affiniteit.
Figuur 4. Het idee van landschapsfagen. (Bron: Faagdisplay en andere peptidedisplaytechnologieën | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Meerdere faagdisplaysystemen
Klanten kunnen kiezen uit verschillende weergavesystemen voor M13-, T7-, T4- en λ-fagen.
Screening met hoge doorvoercapaciteit
We kunnen faagdisplaysystemen gebruiken om snel grootschalige faagbibliotheken samen te stellen en experimenten met hoge doorvoer te realiseren.
Aangepaste fage-displayservice
Klanten kunnen uitgebreide diensten op maat samenstellen, afhankelijk van de projectvereisten, zoals bijvoorbeeld het screenen van antilichamen met een hoge affiniteit.
Breed toepassingsgebied
Toegepast in vakgebieden zoals antilichaamtechnologie, peptide- en eiwittechnologie, geneesmiddelenonderzoek en -ontwikkeling, onderzoek naar eiwitinteracties, enz.
Heeft u vragen? Neem dan gerust contact met ons op.
Leave Your Message
16-07-2018 
0102