Sequentiebepaling van individuele cellen

Sequentiebepaling van individuele cellen is een geavanceerde biotechnologie die zich richt op het ontrafelen van de mysteries van genexpressiepatronen en functionele eigenschappen binnen een enkele cel. Deze technologie heeft een breed scala aan toepassingsmogelijkheden laten zien in de immunologie, ontwikkelingsbiologie, oncologie, neurowetenschappen en andere disciplines, en biedt wetenschappers ongekende onderzoeksperspectieven en -mogelijkheden. De implementatie van sequentiebepaling van individuele cellen volgt doorgaans een reeks zorgvuldig ontworpen stappen om de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid van de gegevens te waarborgen.

Inleiding tot single-cell sequencing-technologie

Single Cell Sequencing (SCS)-technologie richt zich op het genoom van een enkele cel, of op de transcriptiediepte van een groep cellen, om zo meer informatie te verkrijgen over het genoom, transcriptoom en andere details op meerdere niveaus van de cel. Dit maakt het mogelijk om nauwkeurig de verschillen tussen celgroepen en de evolutionaire context van cellen te onthullen. Dankzij deze technologie kunnen we de complexe, heterogene mechanismen achter het ontstaan en de ontwikkeling van ziekten begrijpen en een sterke basis leggen voor een nauwkeurige diagnose, prognosebepaling en de formulering en optimalisatie van gepersonaliseerde behandelprogramma's. In vergelijking met traditionele sequencingmethoden, die slechts de gemiddelde waarde van een groot aantal celgedragingen vastleggen en enkele belangrijke cellen en hun unieke, heterogene kenmerken negeren, is de volledigheid van de verkregen informatie beperkt. Single-cell sequencing daarentegen kan zich direct richten op een enkele cel, waardoor niet alleen de subtiele verschillen tussen cellen nauwkeurig worden geïdentificeerd, maar ook celtypen effectief kunnen worden onderscheiden in een klein aantal celmonsters en zelfs een gedetailleerde celkaart kan worden gemaakt. Vroege technologieën voor sequencing van individuele cellen hadden vanwege hun hoge kosten een beperkt toepassingsgebied. Daarom werd onderzoek en ontwikkeling van deze technologie in de gaten gehouden. Veel innovatieve technologieën voor sequencing van individuele cellen ontstonden op een historisch moment, waardoor de kostendrempel aanzienlijk werd verlaagd. Tegenwoordig is sequencing van individuele cellen een revolutionair instrument in biologisch onderzoek. Het speelt niet alleen een belangrijke rol in fundamenteel wetenschappelijk onderzoek naar de mysteries van het leven, maar biedt ook een enorm potentieel voor transformatie en praktische toepassing in diverse belangrijke gebieden van de klinische praktijk.

Afbeelding 1: Isolatie van individuele cellen en preparatie van een bibliotheek. (Bron: Hwang, B., Lee, JH & Bang, D. Single-cell RNA-sequencingtechnologieën en bio-informatica-pipelines. )

Serviceworkflow voor single-cell sequencingtechnologie

Stappen	Service-inhoud	Tijdlijn
Stap 1: Isolatie en vangst van individuele cellen	Individuele cellen werden geïsoleerd uit weefsels of celpopulaties en verspreid in suspensies van afzonderlijke cellen, waardoor elke cel als een onafhankelijke biologische eenheid werd geanalyseerd.	2-3 weken
Stap 2: Cellysis en RNA-extractie	Pyrolyse van een enkele cel maakt de interne RNA-moleculen vrij. Door middel van een zorgvuldige RNA-extractie worden hoogwaardige RNA-monsters verkregen, die de basis vormen voor de daaropvolgende sequentieanalyse.	2 dagen
Stap 3: cDNA-synthese en -amplificatie	Om voldoende materiaal voor sequentiebepaling te verkrijgen, wordt eerst cDNA gesynthetiseerd met behulp van reverse transcriptase en vervolgens vermenigvuldigd. Tijdens het vermenigvuldigingsproces kan, door toevoeging van een bepaalde hoeveelheid labels of herkenningssequenties, onderscheid worden gemaakt tussen sequenties van verschillende afzonderlijke cellen.	2 dagen
Stap 4: Bibliotheekbouw	Het geamplificeerde cDNA werd gesegmenteerd, geligeerd en verrijkt om een sequentiebibliotheek te construeren die geschikt is voor high-throughput sequencing-platforms.	1 week
Stap 5: Sequentieanalyse met hoge doorvoer	De geconstrueerde bibliotheek werd op de sequencer geladen voor high-throughput sequencing, waardoor een grote hoeveelheid sequentiedata werd gegenereerd. Deze data kunnen het genexpressieprofiel in een enkele cel weergeven, inclusief het type, de hoeveelheid en de sequentievariatie van transcripten.	1 week
Stap 6: Gegevensanalyse en -interpretatie	Sequentiedataverwerking en -analyse, inclusief kwaliteitscontrole, matching- en clusteranalyse, differentiële expressieanalyse, identificatie van celtype, functie en belangrijke informatie, zoals het onthullen van heterogeniteit, het genregulatienetwerk op celniveau en de moleculaire mechanismen van ziekteontwikkeling.	1 week

Voordelen van single-cell sequencing-service

Hoge celvangstsnelheid

Het effectieve celvangstpercentage was hoger dan 60%.

Professioneel technisch team

Het beschikt over volwaardige technologieplatforms voor single-cell sequencing, waaronder platforms voor screening van stabiele cellijnen en fundamentele moleculaire biologie, en platforms voor antilichaamtechnologie.

Rijke ervaring

Ons bedrijf beschikt over een perfect niveau van experimentele uitvoering en experimentele omstandigheden, evenals een strikt systeem voor de controle van cel-experimenten, om de effectiviteit van de experimentele resultaten te garanderen.

Gediversifieerde technische diensten

Het is niet beperkt tot conventionele genexpressieanalyse, maar kan ook diverse parameters analyseren, zoals DNA, RNA, eiwitten en celoppervlakte-antigenen in cellen.

Strikte kwaliteitscontrole

Er worden strenge kwaliteitscontroles uitgevoerd bij het ontwerpen van experimentele opstellingen, de monstervoorbereiding, de data-analyse, enzovoort, om de nauwkeurigheid en betrouwbaarheid van de experimentele resultaten te waarborgen.

Hoge celresolutie

Fijnere, microscopische celpopulaties en celsubpopulaties kunnen worden onderscheiden.

Terug naar de pagina van het platform voor het sorteren van individuele B-cellen

Heeft u vragen? Neem dan gerust contact met ons op.

Leave Your Message

Uitgelichte service

0102