Inleiding tot gesynthetiseerde antilichaambibliotheken

Een gesynthetiseerde antilichaambibliotheek, ook wel een de novo-bibliotheek genoemd, is een synthetische methode die gebruikmaakt van technieken zoals DNA-synthese of faagdisplay om complete variabele regio's van antilichamen te ontwerpen en te synthetiseren, inclusief frameworkregio's en CDR's, zonder gebruik te maken van naïeve antilichaambibliotheken.

Een semi-synthetische antilichaambibliotheek wordt gecreëerd door natuurlijk voorkomende antilichaambibliotheken te combineren met synthetische diversiteit. Dit omvat doorgaans het synthetiseren van DNA-oligonucleotiden om een ​​reeks verschillende complementaire determinantregio's (CDR's) te produceren, die vervolgens worden gecombineerd met een constant antilichaamframework afkomstig van natuurlijke bronnen zoals menselijke of dierlijke B-cellen. De gesynthetiseerde CDR introduceert diversiteit in de bibliotheek, wat resulteert in antilichamen die gericht zijn op een breed scala aan epitopen. De semi-synthetische antilichaambibliotheek biedt een compromis tussen de natuurlijke diversiteit van het immuunsysteem en de gecontroleerde diversiteit die wordt bereikt door synthetische methoden.

Het onderscheid tussen naïeve en synthetische antilichaambibliotheken hangt af van de bron van de immunoglobulinegenen. Het verschil tussen een semi-gesynthetiseerde en een gesynthetiseerde antilichaambibliotheek is dat de eerste bestaat uit een deel van naïeve antilichaamsegmenten, zoals de lichte of zware keten, waarvan er slechts één in vitro is gesynthetiseerd; terwijl de gesynthetiseerde bibliotheek volledig is afgeleid van een kunstmatige synthese door middel van PCR in vitro.

Alpha Lifetech kan het volgende leveren:

Alpha Lifetech Inc.Wij kunnen een semi-gesynthetiseerde/gesynthetiseerde antilichaambibliotheek aanbieden, afkomstig van dieren en mensen, gebaseerd op ons professionele platform voor antilichaamontdekking. Dankzij jarenlange ervaring in genetische modificatie en bibliotheekconstructie kunnen we gesynthetiseerde bibliotheken samenstellen die in staat zijn synthetische antilichamen te produceren met een affiniteit en specificiteit die de mogelijkheden van natuurlijke antilichamen overstijgen.Alpha Lifetech'sExperts kondigen met trots aan dat we een hoog slagingspercentage kunnen garanderen bij de constructie van een antilichaambibliotheek met 10^8 – 10^10 onafhankelijke klonen.

Alpha Lifetech Inc.Wij zijn er trots op uitgebreide diensten aan te bieden voor de constructie van antilichaambibliotheken, waarmee we tegemoetkomen aan de uiteenlopende behoeften van onderzoekers wereldwijd. Dit omvat scFv-, Fab-, VHH-antilichaam- en op maat gemaakte bibliotheken. Ons doel is om de eisen van verschillende klanten te begrijpen en daaraan te voldoen, en om hen te ondersteunen bij eventuele toekomstige en opkomende problemen in hun onderzoek.

Serviceproces voor de constructie van gesynthetiseerde antilichaambibliotheken

Ontwerp
De ontwerpfase omvat het selecteren van antilichaamstructuren en complementaire bindingsregio's (CDR's) op basis van bestaande antilichaamsequenties of structurele gegevens. Synthetische CDR-antilichamen kunnen ook worden ontworpen om specifieke functionaliteiten te introduceren of de bindingseigenschappen te verbeteren.

Synthese
Synthetisch DNA dat de ontworpen antilichaamsequenties codeert, inclusief zowel de frameworkregio's als de CDR's, wordt gesynthetiseerd met behulp van chemische of enzymatische methoden.

Montage
De gesynthetiseerde DNA-fragmenten worden met behulp van technieken zoals PCR, ligatie of Gibson-assemblage samengevoegd tot expressievectoren voor antilichamen. Deze vectoren kunnen vervolgens worden geïntroduceerd in expressiesystemen zoals bacteriële, gist- of zoogdiercellen voor de productie van antilichamen.

Screening en selectie
De samengestelde antilichaambibliotheken worden gescreend en geselecteerd op antilichamen met de gewenste eigenschappen met behulp van high-throughput screeningmethoden. Dit kan technieken omvatten zoals faagdisplay, gistdisplay of ribosoomdisplay, afhankelijk van het bibliotheekformaat en de toepassing.

Constructieservice voor gesynthetiseerde antilichaambibliotheken

Alpha Lifetech Inc.Het bedrijf biedt klanten een totaaloplossing voor het ontwerpen en synthetiseren van antilichaambibliotheken door de V-genrepertoires van de zware en lichte ketens in een faagvector te ligeren met behulp van het Cre-lox-systeem voor plaatsspecifieke recombinatie. Hierdoor ontstaat een repertoire van Fabs, weergegeven op fagen, bestaande uit 6,5 × 10¹⁰ klonen. De bibliotheek leverde antilichamen op tegen talrijke antigenen, waarvan sommige een nanomolaire affiniteit hadden. De generatie van de humane antilichaambibliotheek is gebaseerd op de M13-faagdisplaytechnologie (zie onderstaande afbeelding).