Bouwservice voor gistdisplaybibliotheken

Alpha Lifetech is gespecialiseerd in de constructie van gistdisplaybibliotheken en het screenen van antilichaambibliotheken. Wij bieden klanten wereldwijd de mogelijkheid om verschillende soorten gistbibliotheken te genereren en deze te screenen op antilichamen met een hoge affiniteit en specificiteit. Met een team van deskundige onderzoekers, geavanceerde technologie en apparatuur kunnen we gistbibliotheken samenstellen die gericht zijn op een breed scala aan ziektegerelateerde eiwitten.

Achtergrond van het gistweergavesysteem

Gistdisplay is een eukaryotische eiwitexpressietechnologie die gebruikmaakt van het intracellulaire eiwittranslocatiemechanisme (GPI-anker) van het gistoppervlaktedisplaysysteem om exogene antilichamen of eiwitgenen op het gistoppervlak te immobiliseren en weer te geven. Het gistoppervlaktedisplaysysteem beschikt over een compleet mechanisme voor posttranslationele modificatie en secretie van eiwitten, wat het zeer geschikt maakt voor de vouwing, modificatie en het transport van gehumaniseerde eiwitten. Daarom lijken de antilichamen die met het gistoppervlaktedisplaysysteem worden geproduceerd, zowel qua conformatie als functie meer op natuurlijke menselijke antilichamen en bieden ze veelbelovende mogelijkheden voor toepassingen in de behandeling van ziekten.

Het gistdisplaysysteem maakt de productie mogelijk van antilichamen die specifiek zijn voor eiwitten, peptiden, kleine moleculen en T-celreceptoren. Deze antilichamen hebben als voordelen veelzijdigheid, kwantificeerbaarheid en therapeutische werkzaamheid. De toepassingsmogelijkheden van gistdisplaytechnologie zijn nog veel breder en kunnen niet alleen worden gebruikt voor de ontdekking van antilichamen via gistdisplay, maar ook voor screening van eiwitbibliotheken, gerichte evolutie van eiwitten, de constructie van antigeenbibliotheken, sortering van antilichamen met hoge affiniteit, affiniteitsrijping van antilichamen, vaccinproductie, immunobiokatalyse en biosensoren, enzovoort. Dit biedt brede perspectieven op het gebied van diagnostiek, ziektebehandeling en medisch onderzoek. Bovendien benaderen eiwitten die via antigene gistoppervlaktedisplay worden geproduceerd hun natuurlijke conformatie, waardoor ze ideaal zijn voor serologische testen zoals ELISA. gistdisplay - Alpha Lifetech

Figuur 1: Weergaveprincipe van gist

Constructieproces van een gist-displaybibliotheek

Onze gistbibliotheken hebben een grote capaciteit en een hoge diversiteit, wat een solide basis vormt voor de effectieve screening van specifieke antilichaamsequenties. We kunnen verschillende soorten gistantilichaambibliotheken samenstellen (IgG-, scFv-, VHH-, Fab-antilichaambibliotheken), eiwitbibliotheken, peptidebibliotheken, cDNA-bibliotheken, enzovoort, afhankelijk van uw behoeften. Daarnaast kunnen we ook antilichaambibliotheken met diverse eigenschappen ontwikkelen, waaronder immuunbibliotheken, natuurlijke bibliotheken, synthetische bibliotheken, semi-synthetische bibliotheken en ziekte-antilichaambibliotheken. pYD is onze veelgebruikte gist-oppervlakte-displayvector.

We zijn in staat gistbibliotheken te construeren met een capaciteit tot 10^9, met een insertiesnelheid van 100% en een diversiteit van 100%. Voordat we een gistbibliotheek leveren, valideren we deze grondig om de diversiteit, integriteit en functionaliteit van de antilichaamgenen te garanderen. Om ervoor te zorgen dat de gescreende antilichamen een zeer hoge affiniteit en specificiteit hebben, maken we gebruik van realtime kwantitatieve evaluatie van de antilichaambibliotheek. Fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS) screent kwantitatief op veranderingen in antilichaamexpressie en -activiteit. Hierbij worden specifieke markers op zowel antilichaam als antigeen gebruikt om de bindingssterkte en antilichaamexpressie op het oppervlak van gistcellen te bepalen. We gebruiken FACS-bindingsassays om kwantitatief te screenen op antilichamen met een hoge bindingsaffiniteit en selectiviteit. De display-efficiëntie van onze gistdisplay-nanobodybibliotheek met FACS is meer dan 95%. Gistscreening omvat doorgaans 3-5 rondes van screening en verrijking, waardoor we in korte tijd antilichamen met een hoge antilichaamaffiniteit kunnen verkrijgen.

Het gistdisplaysysteem is een krachtig hulpmiddel geworden in gerichte eiwitevolutie. Alpha Lifetech biedt diensten aan op het gebied van eiwitexpressie, -zuivering en expressiekinetische analyse voor de in vitro bereiding van specifieke antilichamen. We zijn in staat om eiwitten op grote schaal te produceren en de zuiverheid van recombinante eiwitten effectief te verbeteren. We bieden een totaaloplossing, van gensynthese tot recombinante eiwitexpressie en -zuivering. Met behulp van ons geavanceerde gistdisplaysysteem hebben we met succes antilichamen met de hoogste picomolaire (pM) affiniteit geproduceerd, wat een belangrijke doorbraak is in de technologie voor de in vitro bereiding van recombinante antilichamen.