Dienst voor de bouw van gistdisplaybibliotheken

Alpha Lifetech is gespecialiseerd in de constructie van gistdisplaybibliotheken en het screenen van antilichaambibliotheken. We bieden klanten wereldwijd de mogelijkheid om verschillende vormen van gistbibliotheken te genereren en deze te screenen op antilichamen met hoge affiniteit en specifieke antilichamen. Met een team van deskundige onderzoekers, geavanceerde technologie en apparatuur kunnen we gistbibliotheken samenstellen die gericht zijn op een breed scala aan ziektegerelateerde eiwitten.

Achtergrond van het gistdisplaysysteem

Gistdisplay is een eukaryote eiwitexpressietechnologie die gebruikmaakt van het intracellulaire eiwittranslocatiemechanisme (GPI-anker) van het gistoppervlakdisplaysysteem om exogene antilichamen of eiwitgenen op het gistoppervlak te immobiliseren en te presenteren. Het gistoppervlakdisplaysysteem beschikt over een volledig posttranslationeel eiwitmodificatie- en secretiemechanisme, wat beter geschikt is voor de vouwing, modificatie en het transport van gehumaniseerde eiwitten. Antilichamen geproduceerd door het gistdisplaysysteem lijken daarom qua conformatie en functie meer op natuurlijke, menselijke antilichamen en bieden veelbelovende mogelijkheden voor ziektebehandeling.

Gistdisplaysystemen maken de productie mogelijk van antilichamen die specifiek zijn voor eiwitten, peptiden, kleine moleculen en T-celreceptoren. Deze antilichamen bieden voordelen op het gebied van veelzijdigheid, kwantificering en therapeutische werkzaamheid. De toepassing van gistdisplaytechnologie is nog uitgebreider en kan niet alleen worden gebruikt voor de ontdekking van gistdisplay-antilichamen, maar ook voor het screenen van eiwitbibliotheken, eiwitgerichte evolutie, de constructie van antigeenbibliotheken, het sorteren van antilichamen met hoge affiniteit, de affiniteitsrijping van antilichamen, vaccinproductie, immunobiokatalyse en biosensoren, enz. Dit biedt brede perspectieven op het gebied van diagnose, ziektebehandeling en medisch onderzoek. Bovendien liggen eiwitten die worden bereid via antigene gistoppervlakdisplay dichter bij hun natuurlijke conformatie, waardoor ze ideaal zijn voor serologische assays zoals ELISA. gistdisplay-Alpha Lifetech

Figuur 1: Gist-displayprincipe

Proces voor de constructie van een gistdisplaybibliotheek

Onze gistbibliotheken hebben een grote capaciteit en een hoge diversiteit, wat een uitstekende basis vormt voor effectieve screening van specifieke antilichaamsequenties. We kunnen verschillende vormen gist-antilichaambibliotheken (IgG-, scFv-, VHH-, Fab-antilichaambibliotheken), eiwitbibliotheken, peptidebibliotheken, cDNA-bibliotheken, enz. samenstellen, afhankelijk van uw behoeften. Daarnaast kunnen we ook antilichaambibliotheken met verschillende eigenschappen ontwikkelen, waaronder immuunbibliotheken, natuurlijke bibliotheken, synthetische bibliotheken, semi-synthetische bibliotheken en ziekte-antilichaambibliotheken. pYD is onze veelgebruikte gist-oppervlaktedisplayvector.

We kunnen gistbibliotheken samenstellen met een capaciteit tot 10^9, met een insertiepercentage en diversiteit van 100%. Voordat we de gistbibliotheek leveren, valideren we grondig om de diversiteit, integriteit en functionaliteit van de antilichaamgenen te garanderen. Om te garanderen dat de gescreende antilichamen een zeer hoge affiniteit en specificiteit hebben, maken we gebruik van realtime kwantitatieve evaluatie van de antilichaambibliotheek. Fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS) screent kwantitatief op veranderingen in antilichaamexpressie en -activiteit. Hierbij worden verschillende markers op zowel antilichaam als antigeen gebruikt om de bindingssterkte en antilichaamexpressie op het oppervlak van gistcellen te bepalen. We gebruiken FACS-bindingstesten om kwantitatief te screenen op antilichamen met een hoge bindingsaffiniteit en selectiviteit. De display-efficiëntie van onze gistdisplay nanobodybibliotheek met behulp van FACS is meer dan 95%. Gistscreening omvat doorgaans 3-5 screenings- en verrijkingsrondes, waardoor we in korte tijd antilichamen met een hoge antilichaamaffiniteit kunnen verkrijgen.

Het gistdisplaysysteem is een krachtig hulpmiddel geworden in gerichte eiwitevolutie. Alpha Lifetech biedt eiwitexpressie, -zuivering en expressiekinetische analysediensten voor in-vitro-specifieke antilichaambereiding. We kunnen grootschalige eiwitten bereiden en de zuiverheid van recombinante eiwitten effectief verbeteren. We bieden een totaaloplossing, van gensynthese tot recombinante eiwitexpressie en -zuivering. Met behulp van ons geavanceerde gistdisplaysysteem hebben we met succes antilichamen bereid met de hoogste picomolaire (pM) affiniteit, wat een belangrijke doorbraak is in de technologie voor de bereiding van in-vitro-recombinante antilichamen.