Plattform for utvikling av fagdisplayantistoffer

Alpha Lifetech, med sin omfattende prosjekterfaring innen antistoffoppdagelse, kan tilby tilpassede monoklonale og polyklonale antistofftjenester for flere arter, samt konstruksjon og screening av antistoffbiblioteker. Alpha Lifetech kan tilby kunder kvalitetssikrede antistoff- og rekombinante antistoffprodukter, samt tilhørende tjenester, for å fremstille effektive, svært spesifikke og stabile antistoffer. Ved å bruke omfattende antistoffplattformer og antistoffteknikk tilbyr vi tjenester som dekker oppstrøms og nedstrøms antistoffproduksjon, inkludert tekniske tjenester som antistoffpreparering, rensing, antistoffsekvensering og validering.

Alpha Lifetech har en moden plattform for antistoffoppdagelse som tilbyr kundene en rekke tjenester, inkludert dyreimmunitet, konstruksjon og screening av fagdisplay-antistoffbiblioteker, antistoffsekvensering, antistoffekspresjon, antistoffrensing, antistoffvalidering og antistoffmerking basert på hybridomteknologi, enkelt-B-celleteknologi, fagdisplayteknologi og mer. Alpha Lifetech har en standard produksjonslinje, og i tillegg til antistoffforberedelsestjenester kan støttetjenester som antistoffhumanisering, antistoffaffinitetsmodning, ADC-legemiddeldesign og -utvikling, og CAR-T påfølgende sekvensdesign også tilbys. Samtidig har Alpha Lifetech konstruert et antistoffbibliotek basert på M13-, T4- og T7-fagdisplayteknologiplattformer, med en lagringskapasitet på opptil 10^8-10^9. Den positive raten, innsettingsraten og mangfoldet i biblioteket kan alle nå over 90 %.

Fagvisningsteknologi

Produksjon av monoklonale antistoffer ble opprinnelig fremstilt ved hjelp av hybridommonoklonal antistoffteknologi for å produsere musehybridommonoklonalt antistoff. Mer spesifikt, ved å fusjonere miltceller fra immuniserte mus med myelomceller fra mennesker eller mus, dannes hybridomceller, som utskiller spesifikke hybridommonoklonale antistoffantistoffer. Ved humanisert modifisering av musemonoklonale antistoffer og genteknologisk modifisering av antistoffene for å gi dem en konstant human immunoglobulinregion, kan deres immunogenisitet reduseres. Monoklonal antistoffteknikk er mye brukt i biomedisinske og kliniske applikasjoner.

Alpha Lifetech kan tilby komplette tjenester innen antistoffteknikk, fra design av preklinisk forskningsprotokoll til oppdagelse av antistoffkonjugater (ADC-er) og validering hos dyr. Antistoffkonjugater (ADC-er) kan levere cellegiftmedisiner til kreftceller. Etter binding til spesifikke mål uttrykt på kreftceller, frigjør ADC cytotoksiske legemidler i kreftcellene. Alpha Lifetech kan også tilby kundene omfattende tjenester for modning av antistoffaffinitet. Med avansert mutasjonsoptimalisering og høykapasitets fagdisplayscreeningsteknologi screenes først antistoffer med en viss affinitet, og deretter introduseres aminosyremutasjoner for å generere forskjellige varianter. Deretter ble antistoffer med høy affinitet evaluert og screenet ved hjelp av screeningsteknikker. Etter flere runder med optimalisering og strukturell analyse ble det til slutt oppnådd antistoffer med høyere affinitet og sterkere spesifisitet.

Alpha Lifetech kan konstruere ulike typer antistoff-fagdisplaybiblioteker, inkludert immunbiblioteker, native biblioteker, semisyntetiske biblioteker og syntetiske biblioteker. Basert på den høye kapasiteten til antistoffbiblioteker kan svært spesifikke antistoffer oppnås. Flere fagemidvektorer som pMECS, pComb3X og pCANTAB 5E kan leveres, samt stammer som TG1 E. coli, XL1 Blue og ER2738. I tillegg til en bibliotekkapasitet på opptil 10^9, er også innsettingshastigheten for målfragmenter i biblioteket høy, noe som skaper tilstrekkelige forhold for screening av antistoffer som tilfredsstiller kundene. Flytskjemaet for Alpha Lifetechs antistoffprepareringstjeneste basert på fagdisplayteknologi er vist i figur 1.

Fig. 1 Prosessdiagram for fremstilling av monoklonale antistoffer basert på fagdisplayteknologi.

Arbeidsflyt for produksjon av fagdisplayantistoffer

Trinn	Tjenesteinnhold	Tidslinje
Trinn 1: Dyreimmunisering	(1) Dyreimmunisering 4 ganger, boosterimmunisering 1 dose, totalt 5 doser immunisert. (2) Negativt serum før immunisering ble samlet inn, og ELISA ble utført på den fjerde dosen for å detektere serumtiter. (3) Hvis serumantistofftiteren for den fjerde dosen oppfyller kravene, vil én ekstra dose immunisering bli gitt 7 dager før blodprøvetaking. Hvis den ikke oppfyller kravene, vil rutinemessig immunisering fortsette. (4) Kvalifisert potens, blodinnsamling og separasjon av monocytter	10 uker
Trinn 2: cDNA-forberedelse	(1) PBMC total RNA-ekstraksjon (RNA-ekstraksjonssett) (2) Høy-fidelity RT-PCR-preparering av cDNA (revers transkripsjonssett)	1 dag
Trinn 3: Konstruksjon av antistoffbibliotek	(1) Ved bruk av cDNA som mal ble gener amplifisert ved to runder med PCR. (2) Fagkonstruksjon og -transformasjon: genspleising av fagemidvektor, elektroporasjonstransformasjon av TG1-vertsbakterier, konstruksjon av antistoffbibliotek. (3) Identifikasjon: Velg tilfeldig 24 kloner, PCR-identifikasjon positiv rate + innsettingsrate. (4) Assistert fagpreparering: M13-fagamplifikasjon + rensing. (5) Redning av fagvisningsbibliotek	3–4 uker
Trinn 4: Screening av antistoffbibliotek (3 runder)	(1) Standard 3-runde screening (fastfasescreening): trykkscreening for å fjerne uspesifikke antistoffer i størst mulig grad. (2) Enkeltklonamplifisering, selektert med bakteriofag + IPTG-indusert ekspresjon + ELISA-deteksjon av positive kloner. (3) Alle positive kloner ble selektert for gensekvensering.	4–5 uker

Fordel med fagdisplayteknologi

Alpha Lifetech har rik erfaring innen antistoffutvikling. Gjennom årene har Alpha Lifetech etablert en omfattende plattform for antistoffutvikling.

Støttetjenester

Vi kan tilby ulike tjenester for bygging av dyrebaserte immunbiblioteker og screening av naturlige antistoffbiblioteker i henhold til kundenes behov.

Flere mål

Flere tjenester for oppdagelse av målantistoffer er tilgjengelige: proteiner, peptider, små molekyler, virus, membranproteiner, mRNA, etc.

Flere vektorer

Personlig tilpasset bibliotekbyggingstjeneste. Vi kan tilby ulike bakteriofagvektorer, inkludert PMECS, pComb3X og pCANTAB 5E, og modifisere dem etter kundens behov.

Moden plattform

Lagringskapasiteten kan nå 10 ^ 8–10 ^ 9, innsettingsratene er alle over 90 %, og affiniteten til antistoffer oppnådd gjennom screening er generelt på nM pM-nivået.

Relatert TJENESTE

Flere strategier for antistoffutvikling

Tjeneste for utvikling av monoklonale antistoffer

Hybridoma-teknologiplattform

Enkelt B-celle sorteringsplattform

Plattform for utvikling av fagdisplayantistoffer

utvikling av monoklonale antistoffer – Alpha Lifetech

Tjeneste for utvikling av monoklonale antistoffer

Vi kan tilby utviklingstjenester for monoklonale antistoffer av høy kvalitet, høy renhet og svært spesifikke, inkludert produksjon av monoklonale antistoffer fra mus og monoklonale antistoffer fra kaniner.

Hybridoma-teknologiplattform

Inkludert immuniseringsprogram, antistoffprepareringstjenester, antistoffrensing, høykapasitetssekvensering av antistoffer, antistoffvalidering osv.

Enkelt B-celle sorteringsplattform

Alpha Lifetech har fordeler når det gjelder screeningtid og innhenting av antistoffer av høy kvalitet. Det kan tilby antigendesign, syntese og modifisering, dyreimmunitet, screening av enkelt B-celleberikelse og enkeltcellesekvensering.