Introduksjon til syntetiserte antistoffbiblioteker

Syntetisert antistoffbibliotek, også kjent som et De novo-bibliotek, er en syntetisk metode som bruker teknikker som DNA-syntese eller fagvisning for å designe og syntetisere komplette antistoffvariable regioner, inkludert rammeverksregioner og CDR-er, uten å stole på naive antistoffbiblioteker.

Semisyntetisk antistoffbibliotek skapes ved å kombinere naturlig forekommende antistoffbiblioteker med syntetisk mangfold. Det involverer vanligvis syntetisering av DNA-oligonukleotider for å produsere et sett med forskjellige komplementære bestemmende regioner (CDR), som deretter kombineres med et konstant antistofframmeverk avledet fra naturlige kilder som menneskelige eller animalske B-celler. Den syntetiserte CDR introduserer mangfold i biblioteket, noe som resulterer i antistoffer rettet mot et bredt spekter av epitoper. Det semisyntetiske antistoffbiblioteket gir et kompromiss mellom det naturlige mangfoldet i immunsystemet og det kontrollerte mangfoldet som oppnås gjennom syntetiske metoder.

Skillet mellom naive og syntetiske antistoffbiblioteker avhenger av kilden til immunoglobulingener. I mellomtiden ligger forskjellen mellom et semi-syntetisert og syntetisert antistoffbibliotek i at førstnevnte består av deler av naive antistoffsegmenter, slik som lett kjede eller tung kjede, og bare en av dem er syntetisert in vitro; mens den syntetiserte er helt avledet fra en kunstig syntese ved PCR in vitro.

Alpha Lifetech kan tilby

Alpha Lifetech Inc.kan tilby et semisyntetisert/syntetisert antistoffbibliotek fra dyr og mennesker basert på vår profesjonelle antistoffoppdagelsesplattform. Med mange års erfaring innen genetisk modifikasjon og bibliotekkonstruksjon, kan syntetiserte biblioteker konstrueres som er i stand til å produsere syntetiske antistoffer med affinitet og spesifisitet utover kapasiteten til naturlige antistoffer.Alpha Lifetech sineeksperter er stolte av å kunngjøre at vi kan garantere en høy suksessrate i konstruksjonen av et antistoffbibliotek som inneholder 10^8 – 10^10 uavhengige kloner.

Alpha Lifetech Inc.er stolte av å tilby omfattende tjenester for bygging av antistoffbiblioteker for å møte de ulike behovene til globale forskere, inkludert scFv, Fab, VHH-antistoff og tilpassede biblioteker. Vårt mål er å forstå og møte kravene fra ulike kunder og å bistå med eventuelle kommende og nye problemer i forskningsarbeid.

Syntetiserte antistoffbiblioteker konstruksjonstjenesteprosess

Design
Designfasen innebærer å velge antistofframmeverk og komplementaritetsbestemmende regioner (CDR) basert på eksisterende antistoffsekvenser eller strukturelle data. Syntetiske CDR-antistoffer kan også utformes for å introdusere spesifikke funksjoner eller forbedre bindingsegenskaper.

Syntese
Syntetisk DNA som koder for de utformede antistoffsekvensene, inkludert både rammeverksregioner og CDR-er, syntetiseres ved bruk av kjemiske eller enzymatiske metoder.

Forsamling
De syntetiserte DNA-fragmentene settes sammen til antistoffekspresjonsvektorer ved bruk av teknikker som PCR, ligering eller Gibson-montering. Disse vektorene kan deretter introduseres i ekspresjonssystemer som bakterie-, gjær- eller pattedyrceller for antistoffproduksjon.

Screening og utvalg
De konstruerte antistoffbibliotekene blir screenet og selektert for antistoffer med ønskede egenskaper ved bruk av high-throughput screeningmetoder. Dette kan innebære teknikker som fagvisning, gjærvisning eller ribosomvisning, avhengig av bibliotekets format og applikasjon.

Synthesized Antibody Libraries Construction Service

Alpha Lifetech Inc.gir kundene en one-stop-design og syntetisert tjeneste av antistoffbiblioteker ved å ligere tung- og lettkjede-V-genrepertoarene inn i en fagvektor ved å bruke Cre-lox-stedspesifikke rekombinasjonssystemet for å lage et repertoar av Fabs vist på fag som omfatter 6,5 × 10^10 kloner. Biblioteket ga Abs mot en rekke antigener, noen med nanomolare affiniteter. Genereringen av det humane antistoffbiblioteket er basert på M13 fagdisplayteknologi (vist i figuren nedenfor).