ଆଣ୍ଟିବଡି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂ କ'ଣ?

ଆଣ୍ଟିବଡି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂ ସାହାଯ୍ୟରେ, ଆଣ୍ଟିବଡିର ଆକାର, ଫାର୍ମାକୋକାଇନେଟିକ୍ସ, ଇମ୍ୟୁନୋଜେନିସିଟି, ବାଇଣ୍ଡିଂ ଆଫିନିଟି, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ ପ୍ରଭାବକ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବା ସମ୍ଭବ ହୋଇଛି। ଆଣ୍ଟିବଡି ସଂଶ୍ଳେଷଣ କରିବା ପରେ, ଆଣ୍ଟିବଡିର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବାଇଣ୍ଡିଂ ସେମାନଙ୍କୁ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ଏବଂ ଚିକିତ୍ସାରେ ଅତ୍ୟନ୍ତ ମୂଲ୍ୟବାନ କରିଥାଏ। ଆଣ୍ଟିବଡି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂ ମାଧ୍ୟମରେ, ସେମାନେ ଔଷଧ ଏବଂ ରୋଗ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ବିକାଶର ଆବଶ୍ୟକତା ପୂରଣ କରିପାରିବେ।

ଆଣ୍ଟିବଡି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂର ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ହେଉଛି ପ୍ରାକୃତିକ ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକ ହାସଲ କରିପାରିବେ ନାହିଁ ଏପରି ଅତ୍ୟନ୍ତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ, ସ୍ଥିର କାର୍ଯ୍ୟ ଡିଜାଇନ୍ ଏବଂ ଉତ୍ପାଦନ କରିବା, ଯାହା ଚିକିତ୍ସାଗତ ଆଣ୍ଟିବଡି ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ ମୂଳଦୁଆ ସ୍ଥାପନ କରିଥାଏ।

ଆଲଫା ଲାଇଫଟେକ୍, ଆଣ୍ଟବଡି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂରେ ଏହାର ବ୍ୟାପକ ପ୍ରକଳ୍ପ ଅଭିଜ୍ଞତା ସହିତ, ବହୁବିଧ ପ୍ରଜାତି ପାଇଁ କଷ୍ଟମାଇଜ୍ଡ ମୋନୋକ୍ଲୋନାଲ୍ ଏବଂ ପଲିକ୍ଲୋନାଲ୍ ଆଣ୍ଟବଡି ସେବା, ଏବଂ ଫେଜ୍ ଡିସପ୍ଲେ ଆଣ୍ଟବଡି ଲାଇବ୍ରେରୀ ନିର୍ମାଣ ଏବଂ ସ୍କ୍ରିନିଂ ସେବା ପ୍ରଦାନ କରିପାରିବ। ଆଲଫା ଲାଇଫଟେକ୍ ଗ୍ରାହକମାନଙ୍କୁ ଗୁଣାତ୍ମକ ବାୟୋସିମିଲାର୍ ଆଣ୍ଟବଡି ଏବଂ ପୁନଃସଂଯୋଜକ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଉତ୍ପାଦ, ଏବଂ ଅନୁରୂପ ସେବା ପ୍ରଦାନ କରିପାରେ, ଯାହା ଦ୍ୱାରା ଦକ୍ଷ, ଅତ୍ୟନ୍ତ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଏବଂ ସ୍ଥିର ଆଣ୍ଟବଡି ଉତ୍ପାଦନ କରାଯାଇପାରିବ। ବ୍ୟାପକ ଆଣ୍ଟବଡି, ପ୍ରୋଟିନ୍ ପ୍ଲାଟଫର୍ମ ଏବଂ ଫେଜ୍ ଡିସପ୍ଲେ ସିଷ୍ଟମ ବ୍ୟବହାର କରି, ଆମେ ଆଣ୍ଟବଡି ଉତ୍ପାଦନର ଅପଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ଏବଂ ଡାଉନଷ୍ଟ୍ରିମ୍ କଭର କରୁଥିବା ସେବା ପ୍ରଦାନ କରୁ, ଯେଉଁଥିରେ ଆଣ୍ଟବଡି ହ୍ୟୁମାନାଇଜେସନ୍, ଆଣ୍ଟବଡି ପ୍ୟୁରିଫିକେସନ୍, ଆଣ୍ଟବଡି ସିକୋନ୍ସିଂ ଏବଂ ଆଣ୍ଟବଡି ବୈଧତା ଭଳି ବୈଷୟିକ ସେବା ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ।

ଆଣ୍ଟିବଡି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂର ଅଗ୍ରଣୀ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଦୁଇଟି ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ସହିତ ଜଡିତ:

--ପୁନଃସଂଯୋଜିତ ଡିଏନଏ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା

--ହାଇବ୍ରିଡୋମା ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା

ଆଣ୍ଟିବଡି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂର ଦ୍ରୁତ ବିକାଶ ତିନୋଟି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ସହିତ ଜଡିତ:

--ଜିନ୍ କ୍ଲୋନିଂ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ଏବଂ ପଲିମରେଜ୍ ଚେନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା

--ପ୍ରୋଟିନ୍ ପ୍ରକାଶନ: ପୁନଃସଂଯୋଜିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଇଷ୍ଟ, ରଡ୍-ଆକୃତିର ଭାଇରସ୍ ଏବଂ ଉଦ୍ଭିଦ ଭଳି ପ୍ରକାଶନ ପ୍ରଣାଳୀ ଦ୍ୱାରା ଉତ୍ପାଦିତ ହୁଏ।

--କମ୍ପ୍ୟୁଟର ସାହାଯ୍ୟପ୍ରାପ୍ତ ସଂରଚନାତ୍ମକ ଡିଜାଇନ୍

ପ୍ରଥମ ପିଢ଼ିର ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକୁ କାଇମେରିକ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ ମାନବୀକରଣ କରାଯାଇଥିଲା, ଯେଉଁଠାରେ ମୂଷା ମୋନୋକ୍ଲୋନାଲ୍ ଆଣ୍ଟିବଡିର ପରିବର୍ତ୍ତନଶୀଳ ଅଞ୍ଚଳକୁ ମାନବ IgG ଅଣୁର ସ୍ଥିର କ୍ଷେତ୍ର ସହିତ ସଂଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା। ଦ୍ୱିତୀୟ ପିଢ଼ିର ମୂଷା ମୋନୋକ୍ଲୋନାଲ୍ ଆଣ୍ଟିବଡିର ଆଣ୍ଟିଜେନ୍ ବାଇଣ୍ଡିଂ ଅଞ୍ଚଳ (CDR) କୁ ମାନବ IgG ରେ ପ୍ରତିରୋପଣ କରାଯାଇଥିଲା। CDR କ୍ଷେତ୍ର ବ୍ୟତୀତ, ଅନ୍ୟ ସମସ୍ତ ଆଣ୍ଟିବଡି ପ୍ରାୟ ମାନବ ଆଣ୍ଟିବଡି, ଏବଂ ମାନବ ଚିକିତ୍ସା ପାଇଁ ମୂଷା କ୍ଲୋନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି ବ୍ୟବହାର କରିବା ସମୟରେ ମାନବ ଆଣ୍ଟି ମାଉସ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି (HAMA) ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ ପ୍ରୟାସ କରାଯାଇଥିଲା।

 

ଏକ ଫେଜ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ ଲାଇବ୍ରେରୀ ନିର୍ମାଣ କରିବା ପାଇଁ, ପ୍ରଥମ ପଦକ୍ଷେପ ହେଉଛି ଜିନ୍ ଏନକୋଡିଂ ଆଣ୍ଟିବଡି ପାଇବା, ଯାହାକୁ ଇମିନ୍ୟୁଜାଇଜ୍ଡ୍ ପ୍ରାଣୀଙ୍କ B କୋଷରୁ ପୃଥକ କରାଯାଇପାରିବ (ଇମିନ୍ୟୁଜଡ୍ ଲାଇବ୍ରେରୀ ନିର୍ମାଣ), ଅଣ-ଇମିନ୍ୟୁଜଡ୍ ପ୍ରାଣୀମାନଙ୍କଠାରୁ ସିଧାସଳଖ ବାହାର କରାଯାଇପାରିବ (ପ୍ରାକୃତିକ ଲାଇବ୍ରେରୀ ନିର୍ମାଣ), କିମ୍ବା ଆଣ୍ଟିବଡି ଜିନ୍ ଖଣ୍ଡ (ସିନ୍ଥେଟିକ୍ ଲାଇବ୍ରେରୀ ନିର୍ମାଣ) ସହିତ ଭିଟ୍ରୋରେ ଏକତ୍ରିତ କରାଯାଇପାରିବ। ତା’ପରେ, ଜିନ୍ଗୁଡ଼ିକୁ PCR ଦ୍ୱାରା ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଏ, ପ୍ଲାଜମିଡ୍‌ରେ ଭର୍ତି କରାଯାଏ ଏବଂ ଉପଯୁକ୍ତ ହୋଷ୍ଟ ସିଷ୍ଟମରେ ପ୍ରକାଶ କରାଯାଏ (ଯମିଷ୍ଟ ପ୍ରକାଶନ (ସାଧାରଣତଃ ପିଚିଆ ପାଷ୍ଟୋରିସ୍), ପ୍ରୋକାରିଓଟିକ୍ ପ୍ରକାଶନ (ସାଧାରଣତଃ E. coli), ସ୍ତନ୍ୟପାୟୀ କୋଷ ପ୍ରକାଶନ, ଉଦ୍ଭିଦ କୋଷ ପ୍ରକାଶନ, ଏବଂ ରଡ୍-ଆକୃତିର ଭାଇରସ ଦ୍ୱାରା ସଂକ୍ରମିତ କୀଟ କୋଷ ପ୍ରକାଶନ)। ସବୁଠାରୁ ସାଧାରଣ ହେଉଛି E. coli ପ୍ରକାଶନ ସିଷ୍ଟମ, ଯାହା ଫେଜ୍ ଉପରେ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଏନକୋଡିଂ ଆଣ୍ଟିବଡି କ୍ରମକୁ ସଂହତ କରେ ଏବଂ ଫେଜ୍ ସେଲ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ (pIII କିମ୍ବା pVIII) ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏକୁ ଏନକୋଡ୍ କରେ। ବ୍ୟାକ୍ଟିରୋଫେଜ୍ ପୃଷ୍ଠରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ଏବଂ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହେବାର ଜିନ୍। ଏହି ପ୍ରଯୁକ୍ତିର ମୂଳ ହେଉଛି ଏକ ଫେଜ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ ଲାଇବ୍ରେରୀ ନିର୍ମାଣ କରିବା, ଯାହା ପ୍ରାକୃତିକ ଲାଇବ୍ରେରୀ ତୁଳନାରେ ସୁବିଧା ପ୍ରଦାନ କରେ ଯେ ଏଥିରେ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବନ୍ଧନ ରହିପାରିବ। ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ, ଆଣ୍ଟିଜେନ୍ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଥିବା ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକୁ ଏକ ଜୈବିକ ଚୟନ ପ୍ରକ୍ରିୟା ମାଧ୍ୟମରେ ଯାଞ୍ଚ କରାଯାଏ, ଟାର୍ଗେଟ ଆଣ୍ଟିଜେନ୍ ସ୍ଥିର କରାଯାଏ, ଅନବାଉଣ୍ଡ ଫେଜ୍ ବାରମ୍ବାର ଧୋଇ ଦିଆଯାଏ, ଏବଂ ଅଧିକ ସମୃଦ୍ଧି ପାଇଁ ଆବଦ୍ଧ ଫେଜ୍ ଧୋଇ ଦିଆଯାଏ। ତିନି କିମ୍ବା ଅଧିକ ରାଉଣ୍ଡ ପୁନରାବୃତ୍ତି ପରେ, ଉଚ୍ଚ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ଆଫିନିଟି ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ କରାଯାଏ।

ଚିତ୍ର ୩: ଆଣ୍ଟିବଡି ଲାଇବ୍ରେରୀ ନିର୍ମାଣ ଏବଂ ସ୍କ୍ରିନିଂ

ପୁନଃସଂଯୋଜିତ DNA ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ଆଣ୍ଟିବଡି ଖଣ୍ଡ ସୃଷ୍ଟି କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ। ଫାବ୍ ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକୁ ପ୍ରାରମ୍ଭରେ କେବଳ ଗ୍ୟାଷ୍ଟ୍ରିକ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ଦ୍ୱାରା ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ କରାଯାଇପାରେ ଯାହା ଦ୍ୱାରା (Fab ') 2 ଖଣ୍ଡ ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ, ଯାହା ପରେ papain ଦ୍ୱାରା ପଚନ ହୋଇ ବ୍ୟକ୍ତିଗତ Fab ଖଣ୍ଡ ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ। Fv ଖଣ୍ଡରେ VH ଏବଂ VL ରହିଥାଏ, ଯାହାର ସ୍ଥିରତା ଦୁର୍ବଳ ଥାଏ କାରଣ ଡାଇସଲଫାଇଡ୍ ବନ୍ଧନ ନାହିଁ। ତେଣୁ, VH ଏବଂ VL 15-20 ଆମିନୋ ଏସିଡର ଏକ ଛୋଟ ପେପ୍ଟାଇଡ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ଏକତ୍ର ଯୋଡା ଯାଇଥାଏ ଯାହାର ଆଣବିକ ଓଜନ ପ୍ରାୟ 25KDa ଅଟେ ଏବଂ ଏକକ ଶୃଙ୍ଖଳ ପରିବର୍ତ୍ତନଶୀଳ ଖଣ୍ଡ (scFv) ଆଣ୍ଟିବଡି ଗଠନ କରିଥାଏ।

କ୍ୟାମେଲିଡେ (କାମେଲ, ଲିଆମା ଏବଂ ଆଲପାକା) ରେ ଆଣ୍ଟିବଡି ଗଠନର ଅଧ୍ୟୟନ ସ୍ପଷ୍ଟ କରିଛି ଯେ ଆଣ୍ଟିବଡିଗୁଡ଼ିକର କେବଳ ଭାରୀ ଶୃଙ୍ଖଳ ଥାଏ ଏବଂ କୌଣସି ହାଲୁକା ଶୃଙ୍ଖଳ ଥାଏ, ତେଣୁ ସେମାନଙ୍କୁ ଭାରୀ ଶୃଙ୍ଖଳ ଆଣ୍ଟିବଡି (hcAb) କୁହାଯାଏ। ଭାରୀ ଶୃଙ୍ଖଳ ଆଣ୍ଟିବଡିର ପରିବର୍ତ୍ତନଶୀଳ ଡୋମେନକୁ ସିଙ୍ଗଲ ଡୋମେନ ଆଣ୍ଟିବଡି କିମ୍ବା ନାନୋବଡି କିମ୍ବା VHH କୁହାଯାଏ, ଯାହାର ଆକାର 12-15 kDa। ମନୋମର୍ ଭାବରେ, ସେମାନଙ୍କର କୌଣସି ଡାଇସଲଫାଇଡ୍ ବନ୍ଧନ ନାହିଁ ଏବଂ ସେମାନେ ବହୁତ ସ୍ଥିର, ଆଣ୍ଟିଜେନ ପାଇଁ ବହୁତ ଉଚ୍ଚ ଆକର୍ଷକତା ସହିତ।

ଚିତ୍ର ୫: ହେଭି ଚେନ୍ ଆଣ୍ଟିବଡି ଏବଂ VHH/ ନାନୋବଡି

କୋଷ ମୁକ୍ତ ପ୍ରକାଶନ ପ୍ରାକୃତିକ କିମ୍ବା କୃତ୍ରିମ DNA ର ପ୍ରକାଶନକୁ ବ୍ୟବହାର କରି ଇନ ଭିଟ୍ରୋ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସଂଶ୍ଳେଷଣ ହାସଲ କରିଥାଏ, ସାଧାରଣତଃ E. coli ପ୍ରକାଶନ ପ୍ରଣାଳୀ ବ୍ୟବହାର କରି। ଏହା ଶୀଘ୍ର ପ୍ରୋଟିନ୍ ଉତ୍ପାଦନ କରେ ଏବଂ ଭିଭୋରେ ବହୁ ପରିମାଣର ପୁନଃସଂଯୋଜିତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଉତ୍ପାଦନ କରିବା ସମୟରେ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଉପରେ ମେଟାବୋଲିକ୍ ଏବଂ ସାଇଟୋଟକ୍ସିକ ବୋଝକୁ ଏଡାଏ। ଏହା ଏପରି ପ୍ରୋଟିନ୍ ମଧ୍ୟ ଉତ୍ପାଦନ କରିପାରିବ ଯାହା ସଂଶ୍ଳେଷଣ କରିବା କଷ୍ଟକର, ଯେପରିକି ଅନୁବାଦ ପରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରିବା କିମ୍ବା ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସଂଶ୍ଳେଷଣ କରିବା କଷ୍ଟକର।