ଆପ୍ଟାମର ସଂଶ୍ଳେଷଣର ବୈଷୟିକ ପ୍ରକ୍ରିୟା

ମୌଳିକ ନୀତି ଏବଂ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ପ୍ରକ୍ରିୟା

ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଆପ୍ଟାମର ସଂଶ୍ଳେଷଣ ପ୍ରଯୁକ୍ତିର ପ୍ରକ୍ରିୟା ହେଉଛି ଯେ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରେଣ୍ଡେଡ୍ ଅଲିଗୋନୁକ୍ଲିଓଟାଇଡ୍ସର ଏକ ଲାଇବ୍ରେରୀକୁ ରାସାୟନିକ ଭାବରେ ଇନ ଭିଟ୍ରୋ ସଂଶ୍ଳେଷିତ କରାଯାଏ, ଟାର୍ଗେଟ ପଦାର୍ଥ ସହିତ ମିଶ୍ରିତ କରାଯାଏ, ଏବଂ ମିଶ୍ରଣରେ ଟାର୍ଗେଟ ପଦାର୍ଥ ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡର ଏକ ଜଟିଳ ଉପସ୍ଥିତ ଥାଏ, ଟାର୍ଗେଟ ପଦାର୍ଥ ସହିତ ବାନ୍ଧି ନ ଥିବା ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଧୋଇଯାଏ, ଏବଂ ଟାର୍ଗେଟ ପଦାର୍ଥ ସହିତ ବାନ୍ଧି ହେଉଥିବା ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ କରାଯାଏ, ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ ସ୍କ୍ରିନିଂ ପାଇଁ PCR ଆମ୍ପ୍ଲିଫିକେସନ୍ କରିବା ପାଇଁ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଅଣୁଗୁଡ଼ିକୁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଏ। ବାରମ୍ବାର ସେଲେକ୍ସ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଏବଂ ଆମ୍ପ୍ଲିଫିକେସନ୍ ମାଧ୍ୟମରେ, କିଛି DNA କିମ୍ବା RNA ଅଣୁ ଯାହା ଟାର୍ଗେଟ ପଦାର୍ଥ ସହିତ ବାନ୍ଧି ନଥାଏ କିମ୍ବା ଟାର୍ଗେଟ ପଦାର୍ଥ ପାଇଁ କମ୍ କିମ୍ବା ମଧ୍ୟମ ଆକର୍ଷକତା ଥାଏ, ସେଗୁଡ଼ିକ ଧୋଇ ହୋଇଯିବେ, ଏବଂ ଆପ୍ଟାମର୍, ଅର୍ଥାତ୍, ଟାର୍ଗେଟ ପଦାର୍ଥ ପାଇଁ ଉଚ୍ଚ ଆକର୍ଷକତା ସହିତ DNA କିମ୍ବା RNA, ବହୁତ ବଡ଼ ରାଣ୍ଡମ୍ ଲାଇବ୍ରେରୀରୁ ପୃଥକ ହୋଇଯିବେ, ଏବଂ ସେମାନଙ୍କର ଶୁଦ୍ଧତା SELEX ପ୍ରକ୍ରିୟା ସହିତ ବୃଦ୍ଧି ପାଇବ, ଏବଂ ଶେଷରେ ସେମାନେ ଲାଇବ୍ରେରୀର ଏକ ବଡ଼ ଅଂଶ ଦଖଲ କରିବେ।

ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଆପ୍ଟାମରଗୁଡ଼ିକର ସେଲେକ୍ସ ସ୍କ୍ରିନିଂ ପ୍ରକ୍ରିୟା ରାସାୟନିକ ଭାବରେ ସଂଶ୍ଳେଷିତ ଅନିୟମିତ ଅଲିଗୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟ୍ରାଇଡ୍ ଲାଇବ୍ରେରୀଗୁଡ଼ିକର ସମାବେଶ ସହିତ ଆରମ୍ଭ ହୁଏ। ଅନିୟମିତ ଅଲିଗୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟ୍ରାଇଡ୍ ଲାଇବ୍ରେରୀଗୁଡ଼ିକର ଏକ ବଡ଼ ଲାଇବ୍ରେରୀ କ୍ଷମତା ଅଛି। ଉଚ୍ଚ ବିବିଧତା ଏହାର ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଲାଭ। ତତ୍ତ୍ୱଗତ ଭାବରେ, ଯଦି ଏକ ଅଲିଗୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟ୍ରାଇଡ୍ ରେ ଅନିୟମିତ କ୍ରମରେ n ଆଧାର ରହିଥାଏ, ତେବେ ଲାଇବ୍ରେରୀ କ୍ଷମତା 4n। ଯଦି ଆମେ କୃତ୍ରିମ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଲାଇବ୍ରେରୀକୁ ବିଚାର କରୁ, ତେବେ ଏହା ଅନିୟମିତ କ୍ରମର ବିବିଧତାକୁ ବୃଦ୍ଧି କରିବ। ବର୍ତ୍ତମାନ, SELEX ପରୀକ୍ଷଣରେ ସାଧାରଣତଃ ବ୍ୟବହୃତ ଅଲିଗୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟ୍ରାଇଡ୍ସର ଅନିୟମିତ କ୍ରମର ଲମ୍ବ ସାଧାରଣତଃ 30 ଆଧାର, ଏବଂ ଲାଇବ୍ରେରୀ କ୍ଷମତା 10^18 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଉଚ୍ଚ ହୋଇପାରେ। ଉଚ୍ଚ-ଆଫିନିଟି ଲିଗାଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ସେଲେକ୍ସ ସ୍କ୍ରିନିଂ ପାଇଁ ଲାଇବ୍ରେରୀ କ୍ଷମତା ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ। ତଥାପି, ଯେହେତୁ କୃତ୍ରିମ ଲାଇବ୍ରେରୀଗୁଡ଼ିକର ସାନ୍ଦ୍ରତା ନିଶ୍ଚିତ, ଅତ୍ୟଧିକ ଲମ୍ବା ଅନିୟମିତ କ୍ରମ ଲାଇବ୍ରେରୀରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଅଲିଗୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଓଟ୍ରାଇଡ୍ ର ପ୍ରଚୁରତାକୁ ହ୍ରାସ କରିବ, ଯାହା ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଆପ୍ଟାମର ପାଇଁ ସେଲେକ୍ସ ସ୍କ୍ରିନିଂର ସମ୍ଭାବନାକୁ ହ୍ରାସ କରିବ। ସାଧାରଣତଃ, ସେଲେକ୍ସ ସ୍କ୍ରିନିଂର ପ୍ରଥମ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ 10^13~10^15 ର ଲାଇବ୍ରେରୀ କ୍ଷମତା ବ୍ୟବହାରିକ ଆବଶ୍ୟକତାଗୁଡ଼ିକୁ ପୂରଣ କରିପାରିବ।

ଚିତ୍ର ୧ SELEX ବୈଷୟିକ ପ୍ରକ୍ରିୟା