1960 ਵਿੱਚ, ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਧਾਰਨਾ ਪ੍ਰਸਤਾਵਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ। ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਨੂੰ ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਮੋਨੋਕਲੋਨਲ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਵੀ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜੈਨੇਟਿਕ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਨਕਲੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਿੰਥੇਸਾਈਜ਼ਡ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਹਨ। ਇੱਕ ਇੰਜੀਨੀਅਰਡ ਨਕਲੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ, ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ IgG ਸਬਕਲਾਸ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ CD3 ਸਬਯੂਨਿਟ ਨੂੰ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾਉਣ ਵਾਲਾ ਇੱਕ ਐਂਟੀਜੇਨ ਬਾਈਡਿੰਗ ਟੁਕੜਾ ਰੱਖਦੇ ਹਨ। ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਵਿੱਚ ਦੋ ਖਾਸ ਐਂਟੀਜੇਨ ਬਾਈਡਿੰਗ ਸਾਈਟਾਂ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ ਜੋ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਦੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਐਂਟੀਜੇਨਾਂ, ਜਾਂ ਇੱਕ ਐਂਟੀਜੇਨ ਦੇ ਦੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਐਪੀਟੋਪਾਂ ਨੂੰ ਬੰਨ੍ਹ ਅਤੇ ਪਛਾਣ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ। ਮੋਨੋਕਲੋਨਲ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਵਾਧੂ ਖਾਸ ਐਂਟੀਜੇਨ ਬਾਈਡਿੰਗ ਸਾਈਟ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਜ਼ਬੂਤ ​​ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਅਤੇ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾਉਣ ਦੀ ਯੋਗਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਟਿਊਮਰ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਵਧੇਰੇ ਸਹੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਬਣਾ ਸਕਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਜ਼ਹਿਰੀਲੇਪਣ ਨੂੰ ਘਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਇੱਕੋ ਸਮੇਂ ਕਈ ਜੈਵਿਕ ਕਾਰਜ ਕਰ ਸਕਦੇ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਇਮਿਊਨ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਭਰਤੀ ਕਰਨਾ, ਸਿਗਨਲਿੰਗ ਮਾਰਗਾਂ ਨੂੰ ਰੋਕਣਾ, ਅਤੇ ਟਿਊਮਰ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਾਰਨਾ। ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਰਸਾਇਣਕ ਸੰਯੋਜਨ ਜਾਂ ਸੈੱਲ ਫਿਊਜ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ, ਪਰ ਇਹ ਵਿਧੀ ਬੇਤਰਤੀਬ ਸੁਮੇਲ ਅਤੇ ਨਿਸ਼ਾਨਾ ਸੁਮੇਲ ਨੂੰ ਅਲੱਗ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਮੁਸ਼ਕਲ ਦੇ ਕਾਰਨ ਹੌਲੀ ਹੌਲੀ ਅੱਗੇ ਵਧੀ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਜੈਨੇਟਿਕ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੇ ਨਿਰੰਤਰ ਵਿਕਾਸ ਦੇ ਨਾਲ, ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਨਵੇਂ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਵਿਕਸਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਹਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਗੰਢਾਂ ਵਿੱਚ ਛੇਕ (KIH), ਕਰਾਸਮੈਬ, DVD Ig, ਆਦਿ। ਇਹ ਪਲੇਟਫਾਰਮ ਭਾਰੀ ਚੇਨ ਅਤੇ ਲਾਈਟ ਚੇਨ ਬੇਮੇਲ ਵਰਗੀਆਂ ਸਮੱਸਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ਾਲੀ ਢੰਗ ਨਾਲ ਹੱਲ ਕਰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਦੋ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਇਕਸਾਰਤਾ ਅਤੇ ਉਪਜ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰਦੇ ਹਨ।

ਦੋ-ਸਰੋਤ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਉਤਪਾਦਨ ਦੇ ਮੁੱਖ ਤਰੀਕਿਆਂ ਵਿੱਚ ਰਸਾਇਣਕ ਜੋੜ, ਚਾਰ ਸਰੋਤ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡੋਮਾ, ਅਤੇ ਜੈਨੇਟਿਕ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਤਿਆਰੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ। ਇਹਨਾਂ ਵਿੱਚੋਂ, ਰਸਾਇਣਕ ਜੋੜਨ ਵਿਧੀ ਦੋ ਅਟੁੱਟ IgG ਜਾਂ ਦੋ F (ab ') 2 ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਰਸਾਇਣਕ ਜੋੜਨ ਵਾਲੇ ਏਜੰਟਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ phthalimide ਅਤੇ dithioacylbenzoic ਐਸਿਡ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਕੇ ਦੋ-ਸਥਿਰ IgG ਜਾਂ ਦੋ F (ab ') 2 ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਦੋ-ਸਥਿਰ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਵਿੱਚ ਜੋੜਦੀ ਹੈ। ਇਹ ਵਿਧੀ ਸਰਲ ਅਤੇ ਚਲਾਉਣ ਵਿੱਚ ਆਸਾਨ ਹੈ, ਪਰ ਇਹ ਐਂਟੀਜੇਨ ਬਾਈਡਿੰਗ ਸਾਈਟ ਨੂੰ ਨੁਕਸਾਨ ਪਹੁੰਚਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਘਟਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਜੋੜਨ ਵਾਲੇ ਏਜੰਟ ਵਿੱਚ ਵੀ ਇੱਕ ਖਾਸ ਡਿਗਰੀ ਕਾਰਸੀਨੋਜਨਿਕਤਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ। ਚਾਰ-ਸਰੋਤ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡੋਮਾ ਵਿਧੀ ਦੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਹਾਈਬ੍ਰਿਡੋਮਾ ਸੈੱਲ ਲਾਈਨਾਂ ਤੋਂ ਸੋਮੈਟਿਕ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਫਿਊਜ਼ਨ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਸੰਬੰਧਿਤ ਮਾਊਸ IgG ਨੂੰ ਪ੍ਰਗਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ। ਜੈਨੇਟਿਕ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੁਆਰਾ, ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਨੂੰ ਦੋ-ਸਥਿਰ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਜੈਨੇਟਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੋਧਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਦੋ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਮੋਨੋਕਲੋਨਲ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਬਣਾਏ ਗਏ ਸਨ, ਅਤੇ ਦੋ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੇ ਫੈਬ ਟੁਕੜਿਆਂ ਜਾਂ ਭਾਰੀ ਚੇਨ ਅਤੇ ਲਾਈਟ ਚੇਨ ਵੇਰੀਏਬਲ ਖੇਤਰਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖਰੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਕੱਟਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਕਰਾਸ-ਲਿੰਕਿੰਗ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਜਾਂ ਚੇਨ ਰੀਕੰਬੀਨੇਸ਼ਨ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੁਆਰਾ, ਦੋ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਇੱਕ ਦੋ-ਸਥਿਰ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਜੋੜਿਆ ਗਿਆ ਸੀ। ਹਾਲਾਂਕਿ ਜੈਨੇਟਿਕ ਇੰਜੀਨੀਅਰਿੰਗ ਤਕਨਾਲੋਜੀ ਦੀ ਗੁੰਝਲਤਾ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੈ, ਪਰ ਇਹ ਵਰਤਮਾਨ ਵਿੱਚ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਬਣਤਰ ਅਤੇ ਕਾਰਜ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲ ਕਰਨ ਲਈ ਬਿਸਪੈਸਿਫਿਕ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਉਤਪਾਦਨ ਲਈ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਤਰੀਕਾ ਹੈ। ਬਿਸਪੈਸਿਫਿਕ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਕਰਾਸ ਰਿਐਕਟੀਵਿਟੀ ਦੇ ਸਿਧਾਂਤ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਪਰ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਕਰਾਸ ਰਿਐਕਟੀਵਿਟੀ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਇਸ ਲਈ ਇਸਨੂੰ ਬਿਸਪੈਸਿਫਿਕ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਡਿਜ਼ਾਈਨ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਬਿਸਪੈਸਿਫਿਕ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਥੈਰੇਪੀ ਦੇ ਵਿਹਾਰਕ ਉਪਯੋਗ ਵਿੱਚ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਵਿਚਾਰਿਆ ਜਾਵੇਗਾ।

ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਉੱਚ-ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਾਲੇ ਟੀਚੇ ਵਾਲੇ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਨੂੰ ਅਲੱਗ ਕਰਨ ਅਤੇ ਸ਼ੁੱਧ ਕਰਨ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਹੈ। ਕੁਝ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਦੋ ਤਰੀਕੇ, ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਗੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਡੂੰਘੀ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਟਾਰਗੇਟ ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਨੂੰ ਸ਼ੁਰੂ ਵਿੱਚ ਐਫੀਨਿਟੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੁਆਰਾ ਕੈਪਚਰ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। IgG ਵਰਗੇ ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਲਈ, ਪ੍ਰੋਟੀਨ A ਐਫੀਨਿਟੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਗੈਰ IgG ਵਰਗੇ ਬਿਸਪੇਸ਼ਿਵ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਲਈ, ਲਾਈਟ ਚੇਨ ਅਧਾਰਤ ਐਫੀਨਿਟੀ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ, ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਨੂੰ ਇੱਕ ਨਿਸ਼ਚਿਤ ਸਮੇਂ ਲਈ ਘੱਟ pH ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ ਇਨਕਿਊਬੇਟ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਵਾਇਰਸ ਦੇ ਲਿਫਾਫੇ ਦੀ ਸਤ੍ਹਾ 'ਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਬਣਤਰ ਵਿਘਨ ਪਾਉਂਦੀ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸੰਕਰਮਿਤ ਕਰਨ ਦੀ ਸਮਰੱਥਾ ਖਤਮ ਹੋ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਹੋਸਟ ਸੈੱਲ ਪ੍ਰੋਟੀਨ (HCP) ਵਰਗੀਆਂ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਨੂੰ ਹੋਰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਇੰਟਰਮੀਡੀਏਟ ਡੀਪ ਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਨੂੰ ਆਇਨ ਐਕਸਚੇਂਜ ਕ੍ਰੋਮੈਟੋਗ੍ਰਾਫੀ ਵਰਗੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੁਆਰਾ ਸੁਧਾਰਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਕਿਸੇ ਵੀ ਬਚੇ ਹੋਏ ਵਾਇਰਸ ਨੂੰ ਨੈਨੋਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਜਾਂ ਅਲਟਰਾਫਿਲਟਰੇਸ਼ਨ ਤਕਨੀਕਾਂ ਦੁਆਰਾ ਹਟਾ ਦਿੱਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਅੰਤ ਵਿੱਚ, ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਕੇਂਦ੍ਰਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇੱਕ ਢੁਕਵੇਂ ਫਾਰਮੂਲੇਸ਼ਨ ਬਫਰ ਨਾਲ ਬਦਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।