Platforma rozwoju przeciwciał do prezentacji fagowej

Alpha Lifetech, dzięki swojemu bogatemu doświadczeniu projektowemu w odkrywaniu przeciwciał, może świadczyć dostosowane usługi przeciwciał monoklonalnych i poliklonalnych dla wielu gatunków, a także usługi konstrukcji bibliotek przeciwciał i przesiewu. Alpha Lifetech może świadczyć klientom produkty przeciwciał i przeciwciał rekombinowanych o zapewnionej jakości, a także odpowiednie usługi, aby przygotować wydajne, wysoce specyficzne i stabilne przeciwciała. Wykorzystując kompleksowe platformy przeciwciał i inżynierię przeciwciał, świadczymy usługi obejmujące upstream i downstream produkcji przeciwciał, w tym usługi techniczne, takie jak przygotowanie przeciwciał, oczyszczanie, sekwencjonowanie przeciwciał i walidacja.

Alpha Lifetech ma dojrzałą platformę odkrywania przeciwciał, która zapewnia klientom szereg usług, w tym odporność zwierząt, konstrukcję i przesiew biblioteki przeciwciał eksponowanych na fagach, sekwencjonowanie przeciwciał, ekspresję przeciwciał, oczyszczanie przeciwciał, walidację przeciwciał i znakowanie przeciwciał w oparciu o technologię hybrydoma, technologię pojedynczych komórek B, technologię ekspozycji na fagach i wiele innych. Alpha Lifetech ma standardową linię produkcyjną i oprócz usług przygotowywania przeciwciał, można również świadczyć usługi pomocnicze, takie jak humanizacja przeciwciał, dojrzewanie powinowactwa przeciwciał, projektowanie i rozwój leków ADC oraz projektowanie sekwencji CAR-T. Jednocześnie Alpha Lifetech skonstruował bibliotekę przeciwciał opartą na platformach technologii ekspozycji na fagach M13, T4 i T7 o pojemności do 10^8-10^9. Współczynnik dodatni, współczynnik insercji i różnorodność biblioteki mogą osiągnąć ponad 90%.

Technologia wyświetlania fagów

Produkcja przeciwciał monoklonalnych została początkowo przygotowana przy użyciu technologii hybrydomowych przeciwciał monoklonalnych w celu wytworzenia mysich przeciwciał monoklonalnych hybrydomowych. Dokładniej, poprzez fuzję komórek śledziony od immunizowanych myszy z komórkami szpiczaka od ludzi lub myszy, powstają komórki hybrydomowe, które wydzielają specyficzne przeciwciała monoklonalne hybrydomowe. Poprzez humanizowaną modyfikację mysich przeciwciał monoklonalnych i modyfikację genetyczną przeciwciał w celu nadania im stałego regionu ludzkiej immunoglobuliny, można zmniejszyć ich immunogenność. Inżynieria przeciwciał monoklonalnych jest szeroko stosowana w zastosowaniach biomedycznych i klinicznych.

Alpha Lifetech może świadczyć kompleksowe usługi inżynierii przeciwciał, od projektowania protokołów badań przedklinicznych po odkrywanie koniugatów przeciwciał i leków (ADC) oraz walidację na zwierzętach. Koniugaty przeciwciał i leków (ADC) mogą dostarczać leki chemioterapeutyczne do komórek nowotworowych. Po związaniu się ze specyficznymi celami ekspresjonowanymi na komórkach nowotworowych, ADC uwalnia leki cytotoksyczne do komórek nowotworowych. Alpha Lifetech może również świadczyć klientom kompleksowe usługi dojrzewania powinowactwa przeciwciał. Dzięki zaawansowanej optymalizacji mutacji i technologii przesiewu fagowego o wysokiej przepustowości, przeciwciała o określonym powinowactwie są najpierw przesiewane, a następnie wprowadzane są mutacje aminokwasów w celu wygenerowania różnych wariantów. Następnie przeciwciała o wysokim powinowactwie zostały ocenione i przesiane przy użyciu technik przesiewowych. Po wielu rundach optymalizacji i analizy strukturalnej ostatecznie uzyskano przeciwciała o wyższym powinowactwie i silniejszej swoistości.

Alpha Lifetech może konstruować różne typy bibliotek przeciwciał fagowych, w tym biblioteki immunologiczne, biblioteki natywne, biblioteki półsyntetyczne i biblioteki syntetyczne. Na podstawie dużej pojemności bibliotek przeciwciał można uzyskać wysoce specyficzne przeciwciała. Można dostarczyć wiele wektorów fagemidowych, takich jak pMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, a także szczepy, takie jak TG1 E. coli, XL1 Blue i ER2738. Oprócz pojemności biblioteki do 10^9, szybkość wprowadzania fragmentów docelowych biblioteki jest również wysoka, co stwarza wystarczające warunki do przesiewania przeciwciał, które zadowalają klientów. Schemat blokowy usługi przygotowywania przeciwciał Alpha Lifetech opartej na technologii prezentacji fagowej pokazano na rysunku 1.

Rys.1 Schemat procesu przygotowywania przeciwciał monoklonalnych w oparciu o technologię prezentacji fagowej.

Przebieg pracy nad produkcją przeciwciał do prezentacji fagowej

Kroki	Treść usługi	Oś czasu
Krok 1: Uodpornienie zwierząt	(1) Uodpornienie zwierząt 4 razy, szczepienie przypominające 1 dawka, łącznie podano 5 dawek szczepionki. (2) Przed szczepieniem pobrano ujemną surowicę, a po czwartej dawce wykonano test ELISA w celu wykrycia miana surowicy. (3) Jeśli miano przeciwciał w surowicy czwartej dawki spełnia wymagania, jedna dodatkowa dawka immunizacji zostanie podana 7 dni przed pobraniem krwi. Jeśli nie spełnia wymagań, rutynowe szczepienie będzie kontynuowane. (4) Kwalifikowana moc, pobieranie krwi i separacja monocytów	10 tygodni
Krok 2: Przygotowanie cDNA	(1) Ekstrakcja całkowitego RNA z PBMC (zestaw do ekstrakcji RNA) (2) Przygotowanie cDNA metodą RT-PCR o wysokiej wierności (zestaw do odwrotnej transkrypcji)	1 dzień
Krok 3: Konstrukcja biblioteki przeciwciał	(1) Używając cDNA jako matrycy, geny amplifikowano w dwóch rundach PCR. (2) Konstrukcja i transformacja fagów: wektor fagemidowy do składania genów, transformacja elektroporacyjna bakterii gospodarza TG1, konstrukcja biblioteki przeciwciał. (3) Identyfikacja: Losowy wybór 24 klonów, wskaźnik pozytywnej identyfikacji PCR + wskaźnik insercji. (4) Wspomagane przygotowanie fagów: amplifikacja i oczyszczanie faga M13. (5) Ratowanie biblioteki ekspozycji fagowej	3-4 tygodnie
Krok 4: Przesiewanie biblioteki przeciwciał (3 rundy)	(1) Domyślne badanie przesiewowe składające się z 3 rund (badanie fazy stałej): badanie przesiewowe pod ciśnieniem mające na celu usunięcie niespecyficznych przeciwciał w maksymalnym możliwym zakresie. (2) Amplifikacja pojedynczego klonu za pomocą wyselekcjonowanego bakteriofaga + ekspresja indukowana przez IPTG + wykrywanie klonów dodatnich za pomocą testu ELISA. (3) Wszystkie pozytywne klony wybrano do sekwencjonowania genów.	4-5 tygodni

Zaleta technologii wyświetlania fagów

Alpha Lifetech ma bogate doświadczenie w dziedzinie rozwoju przeciwciał. Przez lata Alpha Lifetech stworzyła kompleksową platformę rozwoju przeciwciał.

Usługi wsparcia

Możemy świadczyć różne usługi w zakresie budowy bibliotek odpornościowych na bazie zwierząt oraz usługi przesiewowe bibliotek naturalnych przeciwciał zgodnie z potrzebami klienta.

Wiele celów

Dostępne są usługi odkrywania przeciwciał wielocelowych: białek, peptydów, małych cząsteczek, wirusów, białek błonowych, mRNA itp.

Wiele wektorów

Spersonalizowana usługa budowy biblioteki, możemy dostarczyć różne wektory bakteriofagowe, w tym PMECS, pComb3X i pCANTAB 5E, i zmodyfikować je zgodnie z potrzebami klienta

Dojrzała platforma

Pojemność magazynowania może osiągnąć 10^8-10^9, współczynniki wprowadzania wynoszą powyżej 90%, a powinowactwo przeciwciał uzyskanych poprzez przesiew wynosi zazwyczaj nM pM

Powiązana USŁUGA

Strategie rozwoju wielu przeciwciał

Usługa rozwoju przeciwciał monoklonalnych

Platforma technologii hybrydowej

Pojedyncza platforma sortująca komórki B

Platforma rozwoju przeciwciał do prezentacji fagowej

rozwój przeciwciał monoklonalnych-Alpha Lifetech

Usługa rozwoju przeciwciał monoklonalnych

Możemy zapewnić wysokiej jakości, wysoce czyste i wysoce specyficzne usługi rozwoju przeciwciał monoklonalnych, w tym produkcję przeciwciał monoklonalnych myszy i przeciwciał monoklonalnych królika

Platforma technologii hybrydowej

W tym program szczepień, usługi przygotowania przeciwciał, oczyszczanie przeciwciał, sekwencjonowanie przeciwciał o wysokiej przepustowości, walidacja przeciwciał itp.

Pojedyncza platforma sortująca komórki B

Alpha Lifetech ma zalety w zakresie czasu przesiewu i uzyskiwania wysokiej jakości przeciwciał. Może zapewnić projektowanie, syntezę i modyfikację antygenów, odporność zwierząt, przesiewowe wzbogacanie pojedynczych komórek B, sekwencjonowanie pojedynczych komórek.