Wprowadzenie do bibliotek syntetyzowanych przeciwciał

Biblioteka syntetyzowanych przeciwciał, znana również jako biblioteka De novo, to metoda syntezy wykorzystująca techniki takie jak synteza DNA lub prezentacja fagowa do projektowania i syntezy kompletnych zmiennych regionów przeciwciał, w tym regionów zrębowych i CDR, bez konieczności korzystania z bibliotek naiwnych przeciwciał.

Półsyntetyczna biblioteka przeciwciał powstaje poprzez połączenie naturalnie występujących bibliotek przeciwciał z syntetyczną różnorodnością. Zazwyczaj polega to na syntezie oligonukleotydów DNA w celu wytworzenia zestawu różnych regionów determinujących komplementarność (CDR), które następnie są łączone ze stałym szkieletem przeciwciała pochodzącym ze źródeł naturalnych, takich jak ludzkie lub zwierzęce limfocyty B. Zsyntetyzowane CDR wprowadzają różnorodność do biblioteki, w wyniku czego powstają przeciwciała ukierunkowane na szeroki zakres epitopów. Półsyntetyczna biblioteka przeciwciał stanowi kompromis między naturalną różnorodnością układu odpornościowego a kontrolowaną różnorodnością uzyskiwaną metodami syntetycznymi.

Rozróżnienie między bibliotekami przeciwciał naiwnych i syntetycznych zależy od źródła genów immunoglobulin. Natomiast różnica między biblioteką przeciwciał półsyntetyzowanych a syntetyzowanych polega na tym, że ta pierwsza składa się z fragmentów segmentów przeciwciał naiwnych, takich jak łańcuch lekki lub łańcuch ciężki, i tylko jeden z nich jest syntetyzowany in vitro; natomiast biblioteka syntetyzowana pochodzi w całości ze sztucznej syntezy metodą PCR in vitro.

Alpha Lifetech może zapewnić

Alpha Lifetech Inc.może zaoferować półsyntetyczną/syntetyczną bibliotekę przeciwciał pochodzących od zwierząt i ludzi, opartą na naszej profesjonalnej platformie do odkrywania przeciwciał. Dzięki wieloletniemu doświadczeniu w modyfikacji genetycznej i konstrukcji bibliotek, możemy tworzyć biblioteki syntetyczne, które są w stanie wytwarzać syntetyczne przeciwciała o powinowactwie i swoistości przewyższającej możliwości przeciwciał naturalnych.Alpha LifetechEksperci z dumą ogłaszają, że możemy zagwarantować wysoki wskaźnik sukcesu przy budowie biblioteki przeciwciał zawierającej 10^8 – 10^10 niezależnych klonów.

Alpha Lifetech Inc.z dumą oferuje kompleksowe usługi budowy bibliotek przeciwciał, aby sprostać zróżnicowanym potrzebom globalnych badaczy, w tym w zakresie przeciwciał scFv, Fab, VHH oraz bibliotek niestandardowych. Naszym celem jest zrozumienie i zaspokojenie potrzeb różnych klientów oraz pomoc w rozwiązywaniu wszelkich pojawiających się problemów w pracach badawczych.

Usługa budowy bibliotek syntetyzowanych przeciwciał

Projekt
Faza projektowania obejmuje wybór struktur przeciwciał i regionów determinujących komplementarność (CDR) na podstawie istniejących sekwencji przeciwciał lub danych strukturalnych. Syntetyczne przeciwciała CDR można również zaprojektować w celu wprowadzenia określonych funkcjonalności lub wzmocnienia właściwości wiązania.

Synteza
Syntetyczne DNA kodujące zaprojektowane sekwencje przeciwciał, obejmujące zarówno regiony zrębowe, jak i CDR, jest syntetyzowane za pomocą metod chemicznych lub enzymatycznych.

Montaż
Zsyntetyzowane fragmenty DNA są łączone w wektory ekspresyjne przeciwciał za pomocą technik takich jak PCR, ligacja czy montaż Gibsona. Wektory te można następnie wprowadzić do systemów ekspresyjnych, takich jak komórki bakteryjne, drożdżowe lub ssacze, w celu produkcji przeciwciał.

Przesiewanie i selekcja
Skonstruowane biblioteki przeciwciał są przeszukiwane i selekcjonowane pod kątem przeciwciał o pożądanych właściwościach za pomocą wysokoprzepustowych metod przesiewowych. W zależności od formatu biblioteki i jej zastosowania, może to obejmować techniki takie jak prezentacja fagowa, prezentacja drożdżowa lub prezentacja rybosomalna.

Usługa budowy bibliotek syntetyzowanych przeciwciał

Alpha Lifetech Inc.oferuje klientom kompleksową usługę projektowania i syntezy bibliotek przeciwciał poprzez ligację repertuarów genów V łańcucha ciężkiego i lekkiego z wektorem fagowym za pomocą systemu rekombinacji specyficznej miejscowo Cre-lox w celu stworzenia repertuaru Fab eksponowanych na fagu, obejmującego 6,5 × 10^10 klonów. Biblioteka dostarczyła przeciwciała skierowane przeciwko licznym antygenom, niektóre o nanomolowym powinowactwie. Generowanie biblioteki ludzkich przeciwciał opiera się na technologii ekspozycji fagowej M13 (przedstawionej na poniższym rysunku).