Wprowadzenie do bibliotek syntetyzowanych przeciwciał

Biblioteka syntetyzowanych przeciwciał, znana również jako biblioteka De novo, to metoda syntezy wykorzystująca techniki takie jak synteza DNA lub prezentacja fagowa w celu zaprojektowania i syntezy kompletnych zmiennych regionów przeciwciał, w tym regionów zrębowych i CDR, bez konieczności korzystania z bibliotek przeciwciał naiwnych.

Półsyntetyczna biblioteka przeciwciał powstaje przez połączenie naturalnie występujących bibliotek przeciwciał z syntetyczną różnorodnością. Zazwyczaj obejmuje syntezę oligonukleotydów DNA w celu wytworzenia zestawu różnych komplementarnych regionów determinujących (CDR), które są następnie łączone ze stałym szkieletem przeciwciała pochodzącym ze źródeł naturalnych, takich jak ludzkie lub zwierzęce komórki B. Syntetyzowany CDR wprowadza różnorodność do biblioteki, co skutkuje przeciwciałami ukierunkowanymi na szeroki zakres epitopów. Półsyntetyczna biblioteka przeciwciał zapewnia kompromis między naturalną różnorodnością układu odpornościowego a kontrolowaną różnorodnością uzyskaną za pomocą metod syntetycznych.

Rozróżnienie między bibliotekami przeciwciał naiwnych i syntetycznych zależy od źródła genów immunoglobulin. Tymczasem różnica między biblioteką przeciwciał półsyntetyzowanych i syntetyzowanych polega na tym, że pierwsza składa się z części segmentów przeciwciał naiwnych, takich jak łańcuch lekki lub łańcuch ciężki, a tylko jeden z nich jest syntetyzowany in vitro; podczas gdy syntetyzowany jest całkowicie uzyskany ze sztucznej syntezy metodą PCR in vitro.

Alpha Lifetech może zapewnić

Alpha Lifetech Inc.może zaoferować półsyntetyczną/syntetyczną bibliotekę przeciwciał od zwierząt i ludzi opartą na naszej profesjonalnej platformie odkrywania przeciwciał. Dzięki wieloletniemu doświadczeniu w modyfikacji genetycznej i konstrukcji bibliotek można skonstruować biblioteki syntetyzowane, które są w stanie produkować syntetyczne przeciwciała o powinowactwie i specyficzności wykraczającej poza możliwości naturalnych przeciwciał.Firma Alpha LifetechEksperci z dumą ogłaszają, że możemy zagwarantować wysoki wskaźnik sukcesu przy budowie biblioteki przeciwciał zawierającej 10^8 – 10^10 niezależnych klonów.

Alpha Lifetech Inc.z dumą oferuje kompleksowe usługi budowy bibliotek przeciwciał, aby sprostać zróżnicowanym potrzebom globalnych badaczy, w tym scFv, Fab, przeciwciał VHH i bibliotek dostosowanych. Naszym celem jest zrozumienie i spełnienie wymagań różnych klientów oraz pomoc w rozwiązywaniu wszelkich nadchodzących i pojawiających się problemów w pracy badawczej.

Usługa budowy bibliotek zsyntetyzowanych przeciwciał

Projekt
Faza projektowania obejmuje wybór struktur przeciwciał i regionów determinujących komplementarność (CDR) na podstawie istniejących sekwencji przeciwciał lub danych strukturalnych. Syntetyczne przeciwciała CDR można również zaprojektować w celu wprowadzenia określonych funkcjonalności lub wzmocnienia właściwości wiążących.

Synteza
Syntetyczne DNA kodujące zaprojektowane sekwencje przeciwciał, obejmujące zarówno regiony zrębowe, jak i CDR, syntetyzuje się metodami chemicznymi lub enzymatycznymi.

Montaż
Syntetyzowane fragmenty DNA są montowane w wektory ekspresji przeciwciał przy użyciu technik takich jak PCR, ligacja lub montaż Gibsona. Następnie wektory te można wprowadzić do systemów ekspresji, takich jak komórki bakteryjne, drożdżowe lub ssacze w celu produkcji przeciwciał.

Przesiewanie i selekcja
Skonstruowane biblioteki przeciwciał są przesiewane i wybierane pod kątem przeciwciał o pożądanych właściwościach przy użyciu metod przesiewowych o wysokiej przepustowości. Może to obejmować techniki takie jak ekspozycja fagowa, ekspozycja drożdżowa lub ekspozycja rybosomowa, w zależności od formatu biblioteki i zastosowania.

Usługa budowy bibliotek syntetyzowanych przeciwciał

Alpha Lifetech Inc.zapewnia klientom kompleksową obsługę projektowania i syntezy bibliotek przeciwciał poprzez ligację repertuarów genów V łańcucha ciężkiego i lekkiego do wektora fagowego przy użyciu systemu rekombinacji specyficznej dla miejsca Cre-lox w celu utworzenia repertuaru Fab wyświetlanych na fagu obejmującym 6,5 × 10^10 klonów. Biblioteka wytworzyła Abs przeciwko licznym antygenom, niektóre z nanomolowymi powinowactwami. Generowanie biblioteki ludzkich przeciwciał opiera się na technologii wyświetlania fagowego M13 (przedstawionej na poniższym rysunku).