Plataforma de desenvolvimento de anticorpos para exibição de fagos

A Alpha Lifetech, com sua vasta experiência em projetos de descoberta de anticorpos, pode fornecer serviços personalizados de anticorpos monoclonais e policlonais para diversas espécies, bem como serviços de construção e triagem de bibliotecas de anticorpos. A Alpha Lifetech pode fornecer aos clientes anticorpos e anticorpos recombinantes com qualidade garantida, bem como serviços correspondentes, para a preparação de anticorpos eficientes, altamente específicos e estáveis. Utilizando plataformas abrangentes de anticorpos e engenharia de anticorpos, oferecemos serviços que abrangem todo o processo de produção de anticorpos, incluindo serviços técnicos como preparação, purificação, sequenciamento e validação de anticorpos.

A Alpha Lifetech possui uma plataforma madura de descoberta de anticorpos que oferece aos clientes uma gama de serviços, incluindo imunidade animal, construção e triagem de bibliotecas de anticorpos para exibição em fagos, sequenciamento de anticorpos, expressão de anticorpos, purificação de anticorpos, validação de anticorpos e rotulagem de anticorpos com base em tecnologia de hibridoma, tecnologia de célula B única, tecnologia de exibição em fagos e muito mais. A Alpha Lifetech possui uma linha de produção padrão e, além dos serviços de preparação de anticorpos, também pode fornecer serviços de suporte como humanização de anticorpos, maturação por afinidade de anticorpos, design e desenvolvimento de fármacos ADC e design de sequência subsequente CAR-T. Ao mesmo tempo, a Alpha Lifetech construiu uma biblioteca de anticorpos com base nas plataformas de tecnologia de exibição em fagos M13, T4 e T7, com capacidade de armazenamento de até 10^8-10^9. A taxa de positividade, a taxa de inserção e a diversidade da biblioteca podem atingir mais de 90%.

Tecnologia de exibição de fagos

A produção de anticorpos monoclonais foi inicialmente preparada utilizando a tecnologia de anticorpos monoclonais de hibridoma para produzir anticorpos monoclonais de hibridoma de camundongo. Especificamente, pela fusão de células esplênicas de camundongos imunizados com células de mieloma de humanos ou camundongos, são formadas células de hibridoma, que secretam anticorpos monoclonais de hibridoma específicos. A modificação humanizada de anticorpos monoclonais de camundongo e a modificação genética dos anticorpos para fornecer-lhes uma região de imunoglobulina humana constante permitem reduzir sua imunogenicidade. A engenharia de anticorpos monoclonais é amplamente utilizada em aplicações biomédicas e clínicas.

A Alpha Lifetech pode fornecer serviços completos de engenharia de anticorpos, desde o desenvolvimento de protocolos de pesquisa pré-clínica até a descoberta de conjugados de anticorpo-droga (ADCs) e validação em animais. Os conjugados de anticorpo-droga (ADCs) podem administrar medicamentos quimioterápicos às células cancerígenas. Após se ligar a alvos específicos expressos nas células cancerígenas, o ADC libera medicamentos citotóxicos nas células cancerígenas. A Alpha Lifetech também pode fornecer aos clientes serviços abrangentes de maturação de afinidade de anticorpos. Com a otimização avançada de mutações e a tecnologia de triagem de exibição de fagos de alto rendimento, os anticorpos com certa afinidade são primeiro triados e, em seguida, as mutações de aminoácidos são introduzidas para gerar diversas variantes. Posteriormente, os anticorpos de alta afinidade foram avaliados e triados usando técnicas de triagem. Após várias rodadas de otimização e análise estrutural, os anticorpos com maior afinidade e especificidade mais forte foram finalmente obtidos.

A Alpha Lifetech pode construir vários tipos de bibliotecas de exibição de fagos de anticorpos, incluindo bibliotecas imunológicas, bibliotecas nativas, bibliotecas semissintéticas e bibliotecas sintéticas. Com base na alta capacidade das bibliotecas de anticorpos, anticorpos altamente específicos podem ser obtidos. Múltiplos vetores fagemídeos, como pMECS, pComb3X e pCANTAB 5E, podem ser fornecidos, bem como cepas como E. coli TG1, XL1 Blue e ER2738. Além de uma capacidade de biblioteca de até 10^9, a taxa de inserção de fragmentos-alvo da biblioteca também é alta, criando condições suficientes para a triagem de anticorpos que satisfaçam os clientes. O fluxograma do serviço de preparação de anticorpos da Alpha Lifetech com base na tecnologia de exibição de fagos é mostrado na Figura 1.

Fig.1 Diagrama do processo para preparação de anticorpos monoclonais com base na tecnologia de exibição de fagos.

Fluxo de trabalho de produção de anticorpos para exibição de fagos

Passos	Conteúdo do serviço	Linha do tempo
Etapa 1: Imunização animal	(1) Imunização animal 4 vezes, reforço 1 dose, totalizando 5 doses imunizadas. (2) O soro negativo antes da imunização foi coletado e o ELISA foi realizado na quarta dose para detectar o título sérico. (3) Se o título de anticorpos séricos da quarta dose atender aos requisitos, uma dose adicional de imunização será administrada 7 dias antes da coleta de sangue. Caso não atenda aos requisitos, a imunização de rotina continuará. (4) Potência qualificada, coleta de sangue e separação de monócitos	10 semanas
Etapa 2: Preparação do cDNA	(1) Extração de RNA total de PBMC (Kit de extração de RNA) (2) Preparação de cDNA por RT-PCR de alta fidelidade (kit de transcrição reversa)	1 dia
Etapa 3: Construção da Biblioteca de Anticorpos	(1) Usando cDNA como molde, os genes foram amplificados por duas rodadas de PCR. (2) Construção e transformação de fagos: splicing de genes de vetores fagemídeos, transformação por eletroporação de bactérias hospedeiras TG1, construção de biblioteca de anticorpos. (3) Identificação: Selecionar aleatoriamente 24 clones, taxa de identificação positiva por PCR + taxa de inserção. (4) Preparação assistida de fagos: amplificação+purificação de fagos M13. (5) Resgate da biblioteca de exibição de fagos	3-4 semanas
Etapa 4: Triagem da biblioteca de anticorpos (3 rodadas)	(1) Triagem padrão de 3 rodadas (triagem em fase sólida): triagem de pressão para remover anticorpos não específicos na extensão máxima possível. (2) Bacteriófago de amplificação de clone único selecionado + expressão induzida por IPTG + detecção por ELISA de clones positivos. (3) Todos os clones positivos foram selecionados para sequenciamento genético.	4-5 semanas

Vantagem da tecnologia de exibição de fagos

A Alpha Lifetech possui vasta experiência na área de desenvolvimento de anticorpos. Ao longo dos anos, a Alpha Lifetech estabeleceu uma plataforma abrangente para o desenvolvimento de anticorpos.

Serviços de Suporte

Podemos fornecer diferentes serviços de construção de bibliotecas imunológicas baseadas em animais e serviços de triagem de bibliotecas de anticorpos naturais de acordo com as necessidades do cliente.

Alvo múltiplo

Estão disponíveis serviços de descoberta de múltiplos alvos de anticorpos: proteínas, peptídeos, pequenas moléculas, vírus, proteínas de membrana, mRNA, etc.

Vetores múltiplos

Serviço personalizado de construção de biblioteca, podemos fornecer vários vetores bacteriófagos, incluindo PMECS, pComb3X e pCANTAB 5E, e modificá-los de acordo com as necessidades do cliente

Plataforma Madura

A capacidade de armazenamento pode atingir 10 ^ 8-10 ^ 9, as taxas de inserção estão todas acima de 90% e a afinidade dos anticorpos obtidos por meio da triagem está geralmente no nível nM pM

SERVIÇO relacionado

Estratégias de desenvolvimento de anticorpos múltiplos

Serviço de Desenvolvimento de Anticorpos Monoclonais

Plataforma de Tecnologia Hybridoma

Plataforma de triagem de células B individuais

Plataforma de desenvolvimento de anticorpos para exibição de fagos

desenvolvimento de anticorpos monoclonais - Alpha Lifetech

Serviço de Desenvolvimento de Anticorpos Monoclonais

Podemos fornecer serviços de desenvolvimento de anticorpos monoclonais de alta qualidade, alta pureza e altamente específicos, incluindo a produção de anticorpos monoclonais de camundongo e anticorpos monoclonais de coelho.

Plataforma de Tecnologia Hybridoma

Incluindo programa de imunização, serviços de preparação de anticorpos, purificação de anticorpos, sequenciamento de alto rendimento de anticorpos, validação de anticorpos, etc.

Plataforma de triagem de células B individuais

A Alpha Lifetech possui vantagens em termos de tempo de triagem e obtenção de anticorpos de alta qualidade. Ela pode fornecer design, síntese e modificação de antígenos, imunidade animal, triagem de enriquecimento de células B individuais e sequenciamento de células individuais.