Sistema de Phage Display
A Alpha Lifetech desenvolveu um sistema de phage display perfeitamente estável que economiza tempo para pesquisa científica ou desenvolvimento de projetos e facilita a produção subsequente.
CONTATE-NOS01
Sistema de Phage Display
A Alpha Lifetech atua há muitos anos com a tecnologia de phage display. Desenvolvemos uma plataforma de phage display estável e eficiente que otimiza o tempo dedicado à pesquisa científica e a projetos, além de facilitar a produção subsequente. Oferecemos diversos sistemas de phage display para atender às necessidades de nossos clientes, incluindo os sistemas M13, T7, T4 e λ. Você pode selecionar o sistema mais adequado às suas necessidades experimentais. A Alpha Lifetech também oferece serviços como a produção de anticorpos VHH, anticorpos SCFV e anticorpos Fab.
Introdução à apresentação em fagos
A tecnologia de phage display é uma técnica que utiliza fagos (vírus que infectam bactérias) para buscar moléculas de ligação funcional para proteínas ou peptídeos específicos. As técnicas de construção de bibliotecas de anticorpos de fagos incluem a construção de bibliotecas de anticorpos Fab, scFv e vhh. De acordo com o tipo de bacteriófago, podem ser classificados em bacteriófago m13, T7, T4, λ e outros. Quanto ao tipo de biblioteca, podem ser divididas em bibliotecas de peptídeos aleatórios, bibliotecas de cDNA, bibliotecas de anticorpos e bibliotecas de proteínas. A tecnologia de phage display é simples de operar e de baixo custo, abrangendo as técnicas de Fab, scFv e vhh. No entanto, essa técnica limita a diversidade genética molecular da biblioteca, não sendo capaz de expressar sequências muito longas.
A tecnologia de phage display é capaz de formar uma ligação física entre a molécula exibida e a sequência de DNA que a codifica, e a sequência de aminoácidos de um conjugado específico pode ser determinada instantaneamente pelo sequenciamento de DNA do fragmento desejado no genoma do fago.
Atualmente, a tecnologia de phage display é amplamente utilizada. Entre suas aplicações, destacam-se as conquistas significativas na pesquisa e desenvolvimento de novas vacinas (vacinas sintéticas de baixo custo e alta eficiência), no desenvolvimento de medicamentos à base de anticorpos (triagem de inibidores enzimáticos), na transdução de sinal celular (triagem de epítopos simulados) e na pesquisa de epítopos antigênicos (preparação de anticorpos monoclonais).
Princípio da apresentação de fagos
A tecnologia de phage display é uma técnica molecular baseada na modificação genética do DNA do fago, que liga o fragmento alvo à proteína do capsídeo do fago, expressando-o assim na superfície do mesmo. A sequência de DNA exógena é introduzida em um local específico da sequência de nucleotídeos do genoma do fago que codifica uma proteína do capsídeo (Fig. 1).
Quando ocorre uma infecção por fago, o gene do fago começa a ser expresso dentro da bactéria hospedeira, e o fragmento alvo inserido é exibido na superfície do fago como uma combinação do gene relacionado que codifica a proteína do capsídeo e da sequência clonada.
Figura 1. Arquitetura do vírion do bacteriófago M13 e princípio da tecnologia de phage display.(Fonte de referência: Tecnologias de phage display e outras tecnologias de peptídeos | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Sistemas de phage display
Os bacteriófagos filamentosos são o sistema de phage display mais comumente usado, e sistemas de phage display podem ser construídos usando outros bacteriófagos. Tais sistemas podem exibir peptídeos relativamente grandes ou selecionar bibliotecas de cDNA com mais eficiência do que os sistemas baseados em bacteriófagos filamentosos.
Figura 2. Tipos de bacteriófagos usados na apresentação de fagos.(Fonte de referência: Tecnologias de phage display e outras tecnologias de peptídeos | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Vantagens do sistema de phage display
Os sistemas de phage display geralmente empregam fagos filamentosos, incluindo M13, fd e f1. Comparados aos fagos M13, os bacteriófagos T7 são compostos de DNA de fita dupla, o que lhes confere maior estabilidade e menor propensão a mutações durante a replicação. O fago T7, como vetor, cresce rapidamente e pode formar placas em até 3 horas, o que economiza muito tempo para clonagem e triagem.
A construção de bibliotecas de fagos T7 tem sido utilizada para a expressão de genes de superfície e não de superfície, bem como para a construção de bibliotecas de apresentação de peptídeos, cDNA, DNA genômico e anticorpos. Isso permite que o fago T7 seja utilizado não apenas como um agente antimicrobiano, mas também para a triagem de alvos de fármacos em órgãos específicos (como cérebro, fígado e pulmão), triagem de alvos de reconhecimento de anticorpos, pesquisa de mecanismos fisiológicos, etc. Ele também pode ser utilizado para o diagnóstico e tratamento de diversas doenças.
Outras formas de bacteriófagos
Fago seletivamente infeccioso
Ao contrário da apresentação de fagos tradicional, o fago infeccioso seletivo (SIP) vincula as interações proteína-ligante de produção diretamente à infecção e expansão do fago, sem a necessidade de etapas de eluição.
Figura 3. Fago seletivamente infeccioso (SIP).(Fonte de referência: Tecnologias de phage display e outras tecnologias de peptídeos | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
fagos de paisagem
Os bacteriófagos de paisagem são causados por milhares de cópias de peptídeos estranhos dispostos em torno de capsídeos tubulares em padrões repetitivos extremamente compactos, e a apresentação polivalente nesses bacteriófagos impulsiona a seleção de alta afinidade, tornando impossível distinguir entre ligantes peptídicos de alta e baixa afinidade.
Figura 4. A ideia de fagos de paisagem. (Fonte de referência: Tecnologias de phage display e outras tecnologias de peptídeos | FEMS Microbiology Reviews | Oxford Academic (oup.com))
Sistemas de phage display múltiplos
Sistema de exibição de fagos M13, T7, T4 e λ para os clientes escolherem.
Capacidade de triagem de alto rendimento
Podemos usar sistemas de phage display para construir rapidamente bibliotecas de fagos em larga escala e realizar experimentos de triagem de alto rendimento.
Serviço personalizado de phage display
Os clientes podem personalizar serviços abrangentes de acordo com os requisitos do projeto, como a triagem de anticorpos de alta afinidade, etc.
Ampla gama de aplicações
Aplicado em áreas como engenharia de anticorpos, engenharia de peptídeos e proteínas, descoberta e desenvolvimento de fármacos, pesquisa de interação proteína-proteína, etc.
Caso tenha alguma dúvida, não hesite em nos contatar a qualquer momento.
Leave Your Message
16/07/2018 
0102