Serviço de Descoberta de Anticorpos scFv

Alpha Lifetech Inc.Temos orgulho de oferecer serviços abrangentes de construção de bibliotecas de scFv para atender às diversas necessidades de cientistas do mundo todo. Nosso objetivo é compreender e atender às demandas de diferentes clientes e auxiliar na resolução de quaisquer problemas emergentes em seus trabalhos de pesquisa.

O que é um anticorpo scFv (Single Chain Variable Fragment)?

Um anticorpo de cadeia única consiste em um fragmento variável leve (VL) e um fragmento variável pesado (VH) unidos por um ligante peptídico flexível, que pode ser facilmente expresso de forma funcional na superfície do fago e, portanto, é comumente conhecido como fragmento variável de cadeia única (scFv). O fragmento scFv é a menor unidade da molécula de imunoglobulina (exceto os nanocorpos) com função na ligação ao antígeno e permite a engenharia de proteínas para melhorar as propriedades do scFv (fragmento variável de cadeia única), como o aumento da afinidade e a alteração da especificidade. Na Alpha Lifetech Inc., os anticorpos scFv foram construídos principalmente a partir de hibridomas, células esplênicas de camundongos imunizados e linfócitos B humanos. O RNA total ou mRNA é inicialmente isolado de hibridomas, células esplênicas, linfócitos e células da medula óssea, seguido de transcrição reversa em cDNA para servir como molde para a amplificação do gene do anticorpo (PCR).

Desenvolvimento de anticorpos scFv - Tecnologia de Phage Display

A diversidade de uma biblioteca é determinada pelo número de clones independentes. Para produzir uma biblioteca de anticorpos scFv de grande porte, nossos cientistas utilizarão nossa estratégia proprietária de duas etapas para geração de bibliotecas. Na primeira etapa do procedimento descrito, repertórios primários são preparados a partir de produtos de PCR que codificam os domínios VH, Vκ e Vλ, resultando em bibliotecas típicas de tamanho médio (1 a 100 milhões de clones). Na segunda etapa, fragmentos VH (ou VL) são isolados por digestão do DNA plasmídico purificado dos repertórios primários e clonados no vetor fagemídico receptor contendo os repertórios VL (ou VH). Essa inovação aumenta drasticamente o tamanho das bibliotecas (10⁹).¹⁰-10¹²clones).

Triagem em larga escala e de alto rendimento de anticorpos scFv

Para a preparação em larga escala de scFv, é evidente que a escolha do sistema de expressão terá um impacto significativo no projeto do processo, nas estratégias de processamento subsequente e no custo do processo. A escolha da rota de fabricação dependerá da relevância da modificação pós-translacional e do cronograma para o desenvolvimento clínico e a viabilidade econômica, que também são essencialmente dependentes do sistema hospedeiro. Não existe um sistema de expressão universal que garanta altos níveis de expressão do produto para uma ampla gama de anticorpos ou mesmo proteínas diferentes.