Platformă de dezvoltare a anticorpilor cu afișare fagică

Alpha Lifetech, cu vasta sa experiență în proiecte de descoperire a anticorpilor, poate oferi servicii personalizate de anticorpi monoclonali și policlonali pentru mai multe specii, precum și servicii de construire și screening a bibliotecilor de anticorpi. Alpha Lifetech poate oferi clienților produse de anticorpi și anticorpi recombinanți de calitate garantată, precum și servicii corespunzătoare, pentru a prepara anticorpi eficienți, foarte specifici și stabili. Prin utilizarea unor platforme complete de anticorpi și a ingineriei anticorpilor, oferim servicii care acoperă etapele ascendente și descendente ale producției de anticorpi, inclusiv servicii tehnice precum prepararea, purificarea, secvențierea și validarea anticorpilor.

Alpha Lifetech deține o platformă matură de descoperire a anticorpilor, care oferă clienților o gamă largă de servicii, inclusiv imunitate animală, construirea și screening-ul unei biblioteci de anticorpi cu afișare fagică, secvențierea anticorpilor, expresia anticorpilor, purificarea anticorpilor, validarea anticorpilor și marcarea anticorpilor bazată pe tehnologia hibridoamelor, tehnologia celulelor B individuale, tehnologia de afișare fagică și multe altele. Alpha Lifetech are o linie de producție standard și, pe lângă serviciile de preparare a anticorpilor, pot fi furnizate și servicii de suport, cum ar fi umanizarea anticorpilor, maturarea afinității anticorpilor, proiectarea și dezvoltarea de medicamente ADC și proiectarea secvențelor ulterioare CAR-T. În același timp, Alpha Lifetech a construit o bibliotecă de anticorpi bazată pe platformele tehnologice de afișare a fagilor M13, T4 și T7, cu o capacitate de stocare de până la 10^8-10^9. Rata pozitivă, rata de inserție și diversitatea bibliotecii pot ajunge toate la peste 90%.

Tehnologie de afișare a fagilor

Producerea de anticorpi monoclonali a fost inițial preparată folosind tehnologia anticorpilor monoclonali hibridomi pentru a produce anticorpi monoclonali hibridomi de șoarece. Mai exact, prin fuzionarea celulelor splenice de la șoareci imunizați cu celule de mielom de la oameni sau șoareci, se formează celule hibridomice, care secretă anticorpi monoclonali hibridomi specifici. Prin modificarea umanizată a anticorpilor monoclonali de șoarece și modificarea prin inginerie genetică a anticorpilor pentru a le oferi o regiune constantă de imunoglobulină umană, imunogenitatea lor poate fi redusă. Ingineria anticorpilor monoclonali este utilizată pe scară largă în aplicații biomedicale și clinice.

Alpha Lifetech poate oferi servicii complete de inginerie a anticorpilor, de la proiectarea protocoalelor de cercetare preclinică până la descoperirea conjugatelor de anticorpi-medicament (ADC) și validarea pe animale. Conjugatele de anticorpi-medicament (ADC) pot livra medicamente chimioterapice celulelor canceroase. După legarea la ținte specifice exprimate pe celulele canceroase, ADC-ul eliberează medicamente citotoxice în celulele canceroase. Alpha Lifetech poate oferi, de asemenea, clienților servicii complete de maturare a afinității anticorpilor. Cu ajutorul optimizării avansate a mutațiilor și tehnologiei de screening cu afișare fagică de mare randament, anticorpii cu o anumită afinitate sunt mai întâi analizați, iar apoi sunt introduse mutații de aminoacizi pentru a genera diverse variante. Ulterior, anticorpii cu afinitate ridicată au fost evaluați și analizați folosind tehnici de screening. După mai multe runde de optimizare și analiză structurală, s-au obținut în cele din urmă anticorpi cu afinitate mai mare și specificitate mai puternică.

Alpha Lifetech poate construi diverse tipuri de biblioteci de afișare a anticorpilor cu fagi, inclusiv biblioteci imune, biblioteci native, biblioteci semisintetice și biblioteci sintetice. Datorită capacității mari a bibliotecilor de anticorpi, se pot obține anticorpi cu specificitate ridicată. Pot fi furnizați mai mulți vectori fagidici, cum ar fi pMECS, pComb3X și pCANTAB 5E, precum și tulpini precum TG1 E. coli, XL1 Blue și ER2738. Pe lângă o capacitate a bibliotecii de până la 10^9, rata de inserție a fragmentelor țintă a bibliotecii este, de asemenea, ridicată, creând condiții suficiente pentru screening-ul anticorpilor care satisfac clienții. Schema de flux a serviciului de preparare a anticorpilor Alpha Lifetech bazat pe tehnologia de afișare a fagilor este prezentată în Figura 1.

Fig. 1 Diagrama procesului de preparare a anticorpilor monoclonali bazați pe tehnologia de afișare fagică.

Flux de lucru pentru producția de anticorpi cu afișare fagică

Pași	Conținutul serviciului	Cronologie
Pasul 1: Imunizarea animalelor	(1) Imunizarea animalelor de 4 ori, imunizarea de rapel 1 doză, un total de 5 doze imunizate. (2) A fost colectat ser negativ înainte de imunizare și s-a efectuat test ELISA la a patra doză pentru a detecta titrul seric. (3) Dacă titrul de anticorpi serici al celei de-a patra doze îndeplinește cerințele, se va administra o doză suplimentară de imunizare cu 7 zile înainte de recoltarea sângelui. Dacă aceasta nu îndeplinește cerințele, imunizarea de rutină va continua. (4) Potență calificată, recoltarea de sânge și separarea monocitelor	10 săptămâni
Pasul 2: Prepararea ADNc	(1) Extracție ARN total din PBMC (Kit de extracție ARN) (2) Prepararea ADNc prin RT-PCR de înaltă fidelitate (kit de transcripție inversă)	1 zi
Pasul 3: Construcția bibliotecii de anticorpi	(1) Folosind ADNc ca șablon, genele au fost amplificate prin două runde de PCR. (2) Construcția și transformarea fagilor: splicing genetic al vectorului fagemid, transformarea prin electroporare a bacteriilor gazdă TG1, construirea bibliotecii de anticorpi. (3) Identificare: Selectați aleatoriu 24 de clone, rata de identificare PCR pozitivă + rata de inserție. (4) Prepararea asistată a fagilor: amplificare+purificare a fagului M13. (5) Salvarea bibliotecii de afișare a fagilor	3-4 săptămâni
Pasul 4: Screeningul bibliotecii de anticorpi (3 runde)	(1) Screening implicit în 3 runde (screening în fază solidă): screening sub presiune pentru a elimina anticorpii nespecifici în cea mai mare măsură posibilă. (2) Amplificare cu o singură clonă prin selectarea bacteriofagului + expresie indusă de IPTG + detectarea clonelor pozitive prin ELISA. (3) Toate clonele pozitive au fost selectate pentru secvențierea genelor.	4-5 săptămâni

Avantajul tehnologiei de afișare a fagilor

Alpha Lifetech are o experiență bogată în domeniul dezvoltării anticorpilor. De-a lungul anilor, Alpha Lifetech a creat o platformă cuprinzătoare de dezvoltare a anticorpilor.

Servicii de asistență

Putem oferi diferite servicii de construire a bibliotecilor imune pe bază de animale și servicii de screening ale bibliotecilor de anticorpi naturali, în funcție de nevoile clienților.

Țintă multiplă

Sunt disponibile servicii de descoperire a mai multor anticorpi țintă: proteine, peptide, molecule mici, virusuri, proteine membranare, ARNm etc.

Vectori multipli

Serviciu personalizat de construire a bibliotecilor, putem furniza diverși vectori bacteriofagi, inclusiv PMECS, pComb3X și pCANTAB 5E, și îi putem modifica în funcție de nevoile clientului.

Platformă pentru adulți

Capacitatea de stocare poate ajunge la 10^8-10^9, ratele de inserție sunt toate peste 90%, iar afinitatea anticorpilor obținuți prin screening este în general la nivelul nM pM.

SERVICIU conex

Strategii multiple de dezvoltare a anticorpilor

Serviciul de Dezvoltare a Anticorpilor Monoclonali

Platforma Tehnologică a Hibridoamelor

Platformă de sortare a celulelor B individuale

Platformă de dezvoltare a anticorpilor cu afișare fagică

dezvoltarea de anticorpi monoclonali - Alpha Lifetech

Serviciul de Dezvoltare a Anticorpilor Monoclonali

Putem oferi servicii de dezvoltare a anticorpilor monoclonali de înaltă calitate, puritate ridicată și specificitate ridicată, inclusiv producția de anticorpi monoclonali de șoarece și anticorpi monoclonali de iepure.

Platforma Tehnologică a Hibridoamelor

Inclusiv program de imunizare, servicii de preparare a anticorpilor, purificare a anticorpilor, secvențiere cu randament ridicat de anticorpi, validare a anticorpilor etc.

screening pentru celule B - Alpha Lifetech

Platformă de sortare a celulelor B individuale

Alpha Lifetech are avantaje în ceea ce privește timpul de screening și obținerea de anticorpi de înaltă calitate. Poate oferi servicii de proiectare, sinteză și modificare a antigenelor, imunitate animală, screening pentru îmbogățirea celulelor B individuale și secvențiere celulară individuală.