Platforma de dezvoltare a anticorpilor Phage Display

Alpha Lifetech, cu experiența sa vastă în proiecte în descoperirea anticorpilor, poate oferi servicii personalizate de anticorpi monoclonali și policlonali pentru mai multe specii, precum și servicii de construcție și screening de biblioteci de anticorpi. Alpha Lifetech poate oferi clienților anticorpi de calitate garantată și produse de anticorpi recombinanți, precum și servicii corespunzătoare, pentru a pregăti anticorpi eficienți, foarte specifici și stabili. Utilizând platforme complete de anticorpi și inginerie de anticorpi, oferim servicii care acoperă în amonte și în aval producția de anticorpi, inclusiv servicii tehnice, cum ar fi pregătirea anticorpilor, purificarea, secvențierea anticorpilor și validarea.

Alpha Lifetech are o platformă matură de descoperire a anticorpilor care oferă clienților o gamă largă de servicii, inclusiv imunitatea animalelor, construcția și screeningul bibliotecii de anticorpi de afișare a fagilor, secvențierea anticorpilor, exprimarea anticorpilor, purificarea anticorpilor, validarea anticorpilor și etichetarea anticorpilor bazate pe tehnologia hibridomului, tehnologia cu celule B unice, tehnologia de afișare a fagilor și multe altele. Alpha Lifetech are o linie de producție standard și, pe lângă serviciile de preparare a anticorpilor, pot fi furnizate și servicii de sprijin, cum ar fi umanizarea anticorpilor, maturarea afinității anticorpilor, proiectarea și dezvoltarea medicamentelor ADC și proiectarea secvenței ulterioare CAR-T. În același timp, Alpha Lifetech a construit o bibliotecă de anticorpi bazată pe platformele tehnologice de afișare cu fagi M13, T4 și T7, cu o capacitate de stocare de până la 10^8-10^9. Rata pozitivă, rata de inserare și diversitatea bibliotecii pot ajunge la peste 90%.

Tehnologia de afișare a fagilor

Producția de anticorpi monoclonali a fost preparată inițial utilizând tehnologia anticorpilor monoclonali de hibridom pentru a produce anticorpi monoclonali de hibridom de șoarece. În mod specific, prin fuzionarea celulelor splinei de la șoareci imunizați cu celule de mielom de la oameni sau șoareci, se formează celule de hibridom, care secretă anticorpi monoclonali specifici de hibridom. Prin modificarea umanizată a anticorpilor monoclonali de șoarece și modificarea prin inginerie genetică a anticorpilor pentru a le oferi o regiune constantă a imunoglobulinei umane, imunogenitatea lor poate fi redusă. Ingineria anticorpilor monoclonali este utilizat pe scară largă în aplicații biomedicale și clinice.

Alpha Lifetech poate oferi servicii unice de inginerie a anticorpilor, de la proiectarea protocolului de cercetare preclinica la descoperirea conjugaților de anticorpi (ADC) și validarea animalelor. Conjugații de medicamente cu anticorpi (ADC) pot furniza medicamente pentru chimioterapie celulelor canceroase. După legarea de ținte specifice exprimate pe celulele canceroase, ADC eliberează medicamente citotoxice în celulele canceroase. Alpha Lifetech poate oferi clienților servicii complete de maturare a afinității anticorpilor. Cu optimizarea avansată a mutațiilor și tehnologia de screening de afișare a fagilor de mare randament, anticorpii cu o anumită afinitate sunt mai întâi testați, iar apoi sunt introduse mutații de aminoacizi pentru a genera diverse variante. Ulterior, anticorpii de mare afinitate au fost evaluați și analizați folosind tehnici de screening. După mai multe runde de optimizare și analiză structurală, în cele din urmă au fost obținuți anticorpi cu afinitate mai mare și specificitate mai puternică.

Alpha Lifetech poate construi diferite tipuri de biblioteci de afișare a fagilor de anticorpi, inclusiv biblioteci imune, biblioteci native, biblioteci semi-sintetice și biblioteci sintetice. Pe baza capacității mari a bibliotecilor de anticorpi, se pot obține anticorpi foarte specifici. Pot fi furnizați mai mulți vectori fagemidi cum ar fi pMECS, pComb3X și pCANTAB 5E, precum și tulpini precum TG1 E. coli, XL1 Blue și ER2738. Pe lângă o capacitate de bibliotecă de până la 10^9, rata de inserare a fragmentelor țintă a bibliotecii este, de asemenea, mare, creând condiții suficiente pentru screeningul anticorpilor care satisfac clienții. Diagrama de flux a serviciului de preparare a anticorpilor Alpha Lifetech bazat pe tehnologia de afișare a fagilor este prezentată în Figura 1.

Fig.1 Diagrama procesului de preparare a anticorpilor monoclonali pe baza tehnologiei de afișare a fagilor.

Flux de lucru pentru producția de anticorpi de afișare a fagilor

Pași	Conținutul serviciului	Cronologie
Pasul 1: Imunizarea animalelor	(1) Imunizarea animalelor de 4 ori, imunizare de rapel 1 doză, în total 5 doze imunizate. (2) A fost colectat ser negativ înainte de imunizare și a fost efectuat ELISA la a patra doză pentru a detecta titrul serului. (3) Dacă titrul de anticorpi seric al celei de-a patra doze îndeplinește cerințele, se va administra o doză suplimentară de imunizare cu 7 zile înainte de recoltarea sângelui. Dacă nu îndeplinește cerințele, va continua imunizarea de rutină. (4) Potenta calificata, colectarea sangelui si separarea monocitelor	10 săptămâni
Pasul 2: Prepararea ADNc	(1) Extracție ARN total PBMC (kit de extracție a ARN) (2) Preparare RT-PCR de înaltă fidelitate a ADNc (kit de transcripție inversă)	1 zi
Pasul 3: Construirea bibliotecii de anticorpi	(1) Folosind cADN ca șablon, genele au fost amplificate prin două runde de PCR. (2) Construcția și transformarea fagilor: vector fagemid de îmbinare a genelor, transformarea prin electroporare a bacteriilor gazdă TG1, construcția bibliotecii de anticorpi. (3) Identificare: selectați aleatoriu 24 de clone, rata pozitivă de identificare PCR + rata de inserție. (4) Preparare asistată de fagi: amplificare fagi M13+purificare. (5) Salvarea bibliotecii de afișare a fagilor	3-4 saptamani
Pasul 4: Screeningul bibliotecii de anticorpi (3 runde)	(1) Screening implicit în 3 runde (screening în fază solidă): screening prin presiune pentru a elimina anticorpii nespecifici în măsura maximă posibilă. (2) Bacterofag selectat cu amplificare cu o singură clonă + expresie indusă de IPTG + detectarea ELISA a clonelor pozitive. (3) Toate clonele pozitive au fost selectate pentru secvențierea genelor.	4-5 săptămâni

Avantajul tehnologiei phage Display

Alpha Lifetech are o experiență bogată în domeniul dezvoltării anticorpilor. De-a lungul anilor, Alpha Lifetech a creat o platformă cuprinzătoare de dezvoltare a anticorpilor.

Servicii de suport

Putem oferi diferite servicii de construcție de biblioteci imune pe bază de animale și servicii de screening de biblioteci de anticorpi naturali în funcție de nevoile clienților

Țintă Multiplă

Sunt disponibile mai multe servicii de descoperire a anticorpilor țintă: proteine, peptide, molecule mici, viruși, proteine membranare, ARNm etc.

Vectori multipli

Serviciu personalizat de construcție de biblioteci, putem oferi diferiți vectori bacteriofagi, inclusiv PMECS, pComb3X și pCANTAB 5E, și îi putem modifica în funcție de nevoile clienților

Platformă matură

Capacitatea de stocare poate ajunge la 10 ^ 8-10 ^ 9, ratele de inserție sunt toate peste 90%, iar afinitatea anticorpilor obținuți prin screening este în general la nivelul nM pM

SERVICIUL aferent

Strategii multiple de dezvoltare a anticorpilor

Serviciul de dezvoltare a anticorpilor monoclonali

Platforma tehnologică Hybridoma

Platformă de sortare cu o singură celule B

Platforma de dezvoltare a anticorpilor Phage Display

dezvoltarea anticorpilor monoclonali-Alpha Lifetech

Serviciul de dezvoltare a anticorpilor monoclonali

Putem oferi servicii de dezvoltare de anticorpi monoclonali de înaltă calitate, puritate ridicată și foarte specifice, inclusiv producția de anticorpi monoclonali de șoarece și anticorpi monoclonali de iepure

Platforma tehnologică Hybridoma

Inclusiv programul de imunizare, serviciile de preparare a anticorpilor, purificarea anticorpilor, secvențierea anticorpilor cu randament ridicat, validarea anticorpilor etc.

Platformă de sortare cu o singură celule B

Alpha Lifetech are avantaje în timpul de screening și obținerea de anticorpi de înaltă calitate. Poate asigura proiectarea, sinteza și modificarea antigenului, imunitatea animalelor, screening-ul pentru îmbogățirea celulelor B, secvențierea unei singure celule.