Introducere în bibliotecile de anticorpi sintetizați

Biblioteca de anticorpi sintetizată, cunoscută și sub denumirea de bibliotecă De novo, este o metodă sintetică care utilizează tehnici precum sinteza ADN-ului sau afișarea fagilor pentru a proiecta și sintetiza regiuni variabile complete ale anticorpilor, inclusiv regiuni cadru și CDR-uri, fără a se baza pe biblioteci de anticorpi naive.

Biblioteca de anticorpi semisintetici este creată prin combinarea bibliotecilor de anticorpi naturale cu diversitate sintetică. De obicei, aceasta implică sintetizarea oligonucleotidelor ADN pentru a produce un set de regiuni determinante complementare (CDR) diferite, care sunt apoi combinate cu un cadru constant de anticorpi derivat din surse naturale, cum ar fi celulele B umane sau animale. CDR-ul sintetizat introduce diversitate în bibliotecă, rezultând anticorpi care vizează o gamă largă de epitopi. Biblioteca de anticorpi semisintetici oferă un compromis între diversitatea naturală a sistemului imunitar și diversitatea controlată obținută prin metode sintetice.

Distincția dintre bibliotecile de anticorpi naivi și sintetici depinde de sursa genelor imunoglobulinelor. Între timp, diferența dintre o bibliotecă de anticorpi semisintetizată și una sintetizată constă în faptul că prima constă dintr-o parte din segmente de anticorpi naivi, cum ar fi lanțul ușor sau lanțul greu, și doar unul dintre ele este sintetizat in vitro; în timp ce cea sintetizată este derivată în totalitate dintr-o sinteză artificială prin PCR in vitro.

Alpha Lifetech poate oferi

Alpha Lifetech Inc.poate oferi o bibliotecă de anticorpi semi-sintetizați/sintetizați de la animale și oameni, bazată pe platforma noastră profesională de descoperire a anticorpilor. Cu ani de experiență în modificarea genetică și construirea de biblioteci, se pot construi biblioteci sintetizate capabile să producă anticorpi sintetici cu afinitate și specificitate dincolo de capacitatea anticorpilor naturali.Alpha LifetechExperții sunt mândri să anunțe că putem garanta o rată ridicată de succes în construirea unei biblioteci de anticorpi care conține 10^8 – 10^10 clone independente.

Alpha Lifetech Inc.este mândră să ofere servicii complete de construire a bibliotecilor de anticorpi pentru a satisface nevoile diverse ale cercetătorilor la nivel global, inclusiv scFv, Fab, anticorpi VHH și biblioteci personalizate. Scopul nostru este de a înțelege și de a satisface cerințele diferiților clienți și de a oferi asistență în rezolvarea oricăror probleme viitoare și emergente în activitatea de cercetare.

Procesul serviciului de construcție a bibliotecilor de anticorpi sintetizați

Proiecta
Faza de proiectare implică selectarea structurilor de anticorpi și a regiunilor care determină complementaritatea (CDR) pe baza secvențelor de anticorpi existente sau a datelor structurale. Anticorpii CDR sintetici pot fi, de asemenea, proiectați pentru a introduce funcționalități specifice sau pentru a îmbunătăți proprietățile de legare.

Sinteză
ADN-ul sintetic care codifică secvențele de anticorpi proiectate, incluzând atât regiunile cadru, cât și CDR-urile, este sintetizat folosind metode chimice sau enzimatice.

Asamblare
Fragmentele de ADN sintetizate sunt asamblate în vectori de expresie a anticorpilor folosind tehnici precum PCR, ligatura sau asamblarea Gibson. Acești vectori pot fi apoi introduși în sisteme de expresie precum celule bacteriene, de drojdie sau de mamifere pentru producerea de anticorpi.

Selecție și screening
Bibliotecile de anticorpi construite sunt analizate și selectate pentru anticorpii cu proprietățile dorite folosind metode de screening cu randament ridicat. Aceasta poate implica tehnici precum afișarea pe fagi, afișarea pe drojdie sau afișarea pe ribozomi, în funcție de formatul și aplicația bibliotecii.

Serviciul de Construcție a Bibliotecilor de Anticorpi Sintetizați

Alpha Lifetech Inc.oferă clienților un serviciu complet de proiectare și sintetizare a bibliotecilor de anticorpi prin ligarea repertoriilor de gene V ale lanțurilor grele și ușoare într-un vector fagic utilizând sistemul de recombinare specific situsului Cre-lox pentru a crea un repertoriu de Fab-uri afișate pe fag cuprinzând 6,5 × 10^10 clone. Biblioteca a produs anticorpi împotriva numeroși antigeni, unii cu afinități nanomolare. Generarea bibliotecii de anticorpi umani se bazează pe tehnologia de afișare a fagului M13 (prezentată în figura de mai jos).