Служба гуманизации антител

Альфа Лайфтех Инк.имеет технологию прививки областей, определяющих комплементарность (CDR-grafting), которая характеризуется рандомизацией небольшого набора остатков каркаса с использованием технологии фагового дисплея и компьютерного моделирования.Альфа Лайфтех Инк.Поэтому была разработана технология компьютерного моделирования для рандомизации определенных остатков каркаса в дополнение к прививке CDR.

Альфа Лайфтех Инк.Мы также можем предоставить мощный инструмент, такой как библиотека CDR мыши, для отбора специфических антител к антигену непосредственно из наших готовых библиотек антител с использованием фагового дисплея. Обладая многолетним опытом конструирования и экспрессии рекомбинантных антител на основе нашей собственной платформы фагового дисплея, учёныеАльфа Лайфтех Инк.Мы гордимся и уверены, что можем предоставить вам комплексную гарантию. Пожалуйста, пришлите нам антиген, и наши учёные создадут гуманизированное антитело с гарантированной авидностью.

Что такое гуманизация антител?

Исследования в области производства моноклональных антител являются ключевым этапом гуманизации антител. Процесс преобразования мышиных антител в человеческие называется гуманизацией антител.

Первыми моноклональными антителами, использовавшимися в клинической практике, были моноклональные антитела мышиного происхождения. Однако использование антител мышиного происхождения имело ограничения из-за различий между видами человека и мыши. Хотя мышиные антитела способны связываться со специфическими целевыми антигенами и способны связываться с ними, они не активируют иммунную систему человека, например, комплемент-зависимую цитотоксичность и антитело-зависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (CDC). Следовательно, реакции антиген-антитело не могут происходить в норме. Однако мышиные антитела, попадающие в организм человека, можно считать экзогенными белками. Это может привести к тому, что иммунная система будет вырабатывать специфические антитела, использующие мышиные антигены (например, человеческие антимышиные антитела (HAMA)), и они часто быстро выводятся из организма человека с очень коротким периодом полураспада. Гуманизация мышиных антител проводилась с помощью технологии рекомбинантной ДНК из-за ограничений клинического применения мышиных антител.

Процесс гуманизации антител

Гуманизация антител используется для снижения иммуногенности моноклональных антител (мкАТ) животных и повышения их активности в иммунной системе человека. Наши учёные оптимизировали традиционный алгоритм техники пересадки CDR. Сочетание преимуществ наших эмпирических подходов к гуманизации антител и традиционных алгоритмов позволяет нам эффективно повышать стабильность и аффинность гуманизированных антител в организме. Мы идентифицируем CDR из вашей гибридомной клеточной линии или последовательности антитела (исходного антитела) и пересаживаем эти CDR в каркасные области, тщательно отобранные из баз данных, содержащих сотни тысяч зрелых человеческих антител. Каркасные области иммуноглобулина человека выбираются на основе ряда факторов, включая гомологию и положение ключевых остатков.

 
Шесть петель CDR, образующих антигенсвязывающую область, пересажены в каркасные области человека. Простая пересадка CDR от грызунов в каркасные области человека не всегда приводит к восстановлению аффинности или специфичности связывания исходного антигена. Это связано с тем, что остатки каркасной области играют роль в связывании антигена. Они либо поддерживают конформацию петель CDR, либо напрямую контактируют с антигеном.

Привитые CDR и случайные остатки объединяются в фаговую библиотеку. После клонирования библиотека подвергается скринингу для выявления гуманизированных антител с наивысшей аффинностью. Это позволяет сохранить эпитопную специфичность. Прививка остатков, определяющих специфичность (SDR), используется для снижения иммуногенности антител, привитых к CDR. Внутри каждого CDR есть более вариабельные позиции, непосредственно участвующие во взаимодействии с антигеном, то есть остатки, определяющие специфичность (SDR), в то время как есть более консервативные остатки, поддерживающие конформацию петель CDR.

Процесс гуманизации антител

Получение и характеристика эталонного мышиного антитела или отбор из готовой библиотеки антител и определение его константы аффинности.

Определение специфических последовательностей вариабельных областей мыши.

Структурное моделирование вариабельных областей моноклональных антител, построение панели вариантов для тестирования и оптимизация аффинности антител.

Характеристика аффинности и анализ гуманизированных вариантов с последующей рекомбинантной экспрессией в клетках млекопитающих, таких как клетки CHO и 293T.