Служба гуманизации антител

Alpha Lifetech Inc.технология трансплантации комплементарно-определяющих регионов (CDR-трансплантация), которая характеризуется рандомизацией небольшого набора остатков каркаса с использованием технологии фагового дисплея и компьютерного моделирования.Alpha Lifetech Inc.Поэтому была разработана методика компьютерного моделирования для случайного распределения определенных остатков каркаса, в дополнение к прививке CDR.

Alpha Lifetech Inc.Мы также можем предоставить мощный инструмент, такой как библиотека CDR-последовательностей мышей, для отбора специфических антител к антигенам непосредственно из наших готовых библиотек антител, полученных методом фагового дисплея. Обладая многолетним опытом в конструировании и экспрессии рекомбинантных антител на основе нашей собственной платформы фагового дисплея, ученые компании...Alpha Lifetech Inc.Мы гордимся тем, что можем предложить вам комплексную гарантию. Пожалуйста, пришлите антиген, и наши ученые предоставят вам гуманизированное антитело с гарантированной аффинностью.

Что такое гуманизация антител?

Исследования в области производства моноклональных антител являются ключевой частью гуманизации антител. Процесс преобразования мышиных антител в человеческие антитела называется гуманизацией антител.

Первоначально в клинической практике использовались моноклональные антитела, полученные от мышей. Однако использование мышиных антител имело ограничения из-за различий между видами человека и мыши. Хотя мышиные антитела могут связываться со специфическими целевыми антигенами и способны к этому, они не активируют иммунную систему человека, например, комплемент-зависимую цитотоксичность и антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (КЗЦ). Следовательно, реакции антиген-антитело не могут происходить в норме. Однако мышиные антитела, попадающие в организм человека, могут рассматриваться как экзогенные белки. Это может привести к тому, что иммунная система начнет вырабатывать специфические антитела, используя мышиные антигены (например, человеческие антитела против мышиных антигенов (HAMA)), и они часто быстро выводятся из организма человека с очень коротким периодом полураспада. Гуманизация мышиных антител проводилась с использованием технологии рекомбинантной ДНК из-за ограничений в клиническом применении мышиных антител.

Процесс гуманизации антител

Гуманизация антител используется для снижения иммуногенности животных моноклональных антител (мАт) и для повышения их активности в иммунной системе человека. Наши ученые оптимизировали традиционный алгоритм техники трансплантации CDR, сочетая преимущества наших эмпирических подходов к гуманизации антител и традиционных алгоритмов, что позволяет эффективно повысить стабильность и аффинность гуманизированных антител в организме. Мы идентифицируем CDR из вашей гибридомной клеточной линии или последовательности антитела (родительского антитела) и трансплантируем эти CDR в тщательно отобранные из баз данных, содержащих сотни тысяч зрелых человеческих антител, каркасные области человеческого иммуноглобулина. Каркасные области человеческого иммуноглобулина выбираются на основе ряда факторов, включая гомологию и положение ключевых остатков.

 
Шесть петель CDR, образующих область связывания антигена, имплантированы в области каркаса человеческого белка. Простая имплантация CDR от грызунов в человеческий каркас не всегда приводит к восстановлению сродства связывания или специфичности исходного антигена. Это связано с тем, что остатки каркаса играют роль в связывании антигена. Они либо поддерживают конформацию петель CDR, либо непосредственно контактируют с антигеном.

Присоединение CDR-повторов и случайных остатков объединяется в фаговую библиотеку. После клонирования библиотека проверяется для выявления гуманизированных антител с наивысшей аффинностью. Это позволяет сохранить специфичность эпитопа. Присоединение специфически определяющих остатков (SDR) используется для снижения иммуногенности антител с присоединенными CDR-повторами. В каждом CDR имеется больше вариабельных позиций, непосредственно участвующих во взаимодействии с антигеном, т.е. специфически определяющих остатков (SDR), тогда как имеется больше консервативных остатков, поддерживающих конформацию петель CDR.

Процесс гуманизации антител

Получение и характеристика эталонного мышиного антитела или отбор из готовой библиотеки антител и определение его константы аффинности.

Определение специфических последовательностей вариабельных регионов мыши.

Структурное моделирование вариабельных областей моноклональных антител, создание панели вариантов для тестирования и оптимизация аффинности антител.

Характеристика и анализ аффинности гуманизированных вариантов с последующей рекомбинантной экспрессией в клетках млекопитающих, таких как клетки CHO и 293T.