Услуга по созданию библиотеки Fab-антител
Введение в услугу по созданию библиотек Fab-антителФаб
Fab-фрагмент (антиген-связывающий фрагмент) получают из полноразмерного антитела (например, IgG) путем ферментативного или химического расщепления. Его размер составляет около 50 кДа. Это антиген-связывающий домен молекулы антитела, содержащий вариабельный регион тяжелой цепи (VH), вариабельный регион легкой цепи (VL), константный регион тяжелой цепи 1 (CH1) и константный регион легкой цепи (CL). Fab-фрагмент обладает множеством преимуществ и имеет широкий спектр применения в диагностике и лечении заболеваний. Fab-фрагмент имеет небольшой размер, что позволяет ему более эффективно проникать в ткани и быстрее выводиться из крови. Благодаря отсутствию Fc-фрагментов, Fab-фрагмент не мешает обнаружению антител, опосредованному анти-Fc-фрагментом. Благодаря своей проницаемости, Fab-антитело стало незаменимым инструментом для различных исследовательских применений, таких как иммуногистохимия, иммунофлуоресценция и проточная цитометрия.
Компания Alpha Lifetech может предоставить
Компания Alpha Lifetech, обладающая многолетним опытом в исследованиях рекомбинантных антител, предоставляет профессиональные услуги по созданию и подготовке библиотек Fab-антител. Мы используем два различных метода для получения Fab-фрагментов. Первый метод заключается в ферментативном расщеплении всего антитела, то есть расщеплении всего антитела папаином, пепсином и ферментом фузариума и т. д., для образования фрагментов F(ab')2, а затем восстановлении этих фрагментов для получения Fab-фрагментов. Другой метод заключается в синтезе фрагментов F(ab')2 антител путем рекомбинации, а затем химическом восстановлении этих фрагментов для получения Fab. В настоящее время большинство рекомбинантных фрагментов антител создаются с помощью фагового дисплея. Библиотеки Fab-антител имеют очевидные преимущества: во-первых, по сравнению с традиционными и трудоемкими моноклональными антителами, библиотеки Fab-антител позволяют быстро и эффективно отбирать Fab-антитела за короткий период времени. Во-вторых, как и в случае с scFv-антителами, легче получать Fab-антитела с более высокой аффинностью. Во-третьих, Fab-фрагменты обладают тем преимуществом, что они очень стабильны в условиях длительного хранения и совместимы с обычно тестируемыми антисыворотками.
| Различные типы библиотек антител | Система отображения для различных библиотек антител | Фаговая частица | бактерии хозяина | Источник: человек или животное | Ткани или клетки |
| Замечательная нативная библиотека | Дрожжевая дисплейная модель, рибосомная дисплейная модель, дисплейная модель клеток млекопитающих, фаговая дисплейная модель. | PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E | TG1 E. coli, XL1-Blue и ER2738 | Люди, крысы, кролики, овцы, крупный рогатый скот | Селезенка, периферические мононуклеарные клетки крови у человека или других животных, гибридомы |
| Библиотека иммунных Fab-фрагментов | |||||
| Библиотека синтеза Fab | |||||
| Библиотека полусинтетических материалов Fab |
Процесс создания библиотеки Fab-антител

Рабочий процесс создания библиотеки Fab-антител
| Шаги | Спецификация | Хронология |
|---|---|---|
| Шаг 1: Подготовка фабрики | Метод 1: Целое антитело расщепляли папаином, пепсином и фузаразой с образованием фрагментов F(ab')2, которые затем восстанавливали для получения фрагментов Fab. | 14 дней |
| Метод 2: Фрагменты антитела F(ab')2 были синтезированы путем рекомбинации, а затем эти фрагменты были химически восстановлены для получения Fab. | ||
| Шаг 2: Ферментативное расщепление и лигирование | Ген Fab был расщеплен и лигирован с помощью ДНК-лигазы Т4. | 1 день |
| Шаг 3: Трансформация плазмиды | Первичные библиотеки Fab-антител получают путем электрохимической или химической трансформации. | 3 дня |
| Шаг 4: Определение разнообразия библиотеки Fab-фрагментов и валидация методом ПЦР. | Была проведена титрация библиотек и рассчитан их размер; положительные клоны были протестированы методом ПЦР. | 2 дня |

-
Дополнительная услуга
Подробная программа подготовки производства
-
Множество видов
Включая человека, мышь, источник, овцу, корову и т. д.
-
Множественные фаги
Фаги M13, T4, T7 и λ
-
Несколько типов
Нативные библиотеки, полусинтетические и синтетические библиотеки.
-
Многофункциональные системы отображения
Фаговый дисплей, дрожжевой дисплей, мРНК-дисплей, дисплей в клетках млекопитающих.








2018-07-16 

