Служба создания библиотеки Fab-антител

Введение в услугу создания библиотеки Fab-антителПотрясающе

Fab (фрагмент связывания антигена) изготавливается из полноразмерного антитела (например, IgG) путем ферментативного или химического расщепления, его размер составляет около 50 кДа, это домен связывания антигена молекулы антитела, который содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH), вариабельную область легкой цепи (VL), константную область тяжелой цепи 1 (CH1) и константную область легкой цепи (CL). Fab имеет много преимуществ и имеет широкий спектр применения в диагностике и лечении заболеваний. Fab имеет небольшой размер и может более эффективно проникать в ткани и быстрее выводиться из крови. имеет небольшой размер и может более эффективно проникать в ткани, а также быстрее выводится из кровотока. Fab не мешает обнаружению антител, опосредованных анти-Fc, из-за отсутствия фрагментов Fc. Благодаря своей проницаемости антитело Fab стало незаменимым инструментом для различных исследовательских приложений, таких как иммуногистохимия, иммунофлуоресценция и проточная цитометрия.
Fab антитело-Alpha Lifetech

Alpha Lifetech может предоставить

Имея многолетний опыт в исследовании рекомбинантных антител, Alpha Lifetech предоставляет профессиональные услуги по созданию и подготовке библиотек антител Fab. Мы можем использовать два различных метода для подготовки фрагментов Fab. Первый метод заключается в ферментативном расщеплении всего антитела, т. е. расщеплении всего антитела папаином, пепсином и ферментом фузариум и т. д. для образования фрагментов F(ab')2, а затем восстановлении этих фрагментов для получения фрагментов Fab. Другой метод заключается в синтезе фрагментов антител F(ab')2 путем рекомбинации, а затем химическом восстановлении этих фрагментов для получения Fab. В настоящее время большинство фрагментов рекомбинантных антител генерируются библиотеками антител с фаговым дисплеем. Библиотеки антител Fab имеют очевидные преимущества: во-первых, по сравнению с традиционными и громоздкими моноклональными антителами библиотеки антител Fab могут быстро и эффективно отсеивать Fab за короткое время. антитела за короткий период времени. Во-вторых, как и антитела scFv, легче генерировать антитела Fab с более высокой аффинностью. В-третьих, преимуществом Fab-фрагментов является их высокая стабильность при длительном хранении и совместимость с обычно тестируемыми антисыворотками.

Различные типы библиотек антител	Система отображения различных библиотек антител	Фаговая частица	Бактерии-хозяева	Человеческий или животный источник	Ткани или клетки
Отличная родная библиотека	Дисплей дрожжей, дисплей рибосом, дисплей клеток млекопитающих, дисплей фагов	PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E	TG1 E. coli, XL1-Blue и ER2738	Люди, крысы, кролики, овцы, крупный рогатый скот	Селезенка, PBMC у людей или других животных, гибридомы
Fab-иммунная библиотека
Библиотека синтеза Fab
Fab полусинтетическая библиотека

Процесс создания библиотеки Fab-антител

Библиотека антител Fab, созданная Alpha Lifetech, богата разнообразием и имеет большой размер, и будет проверена, чтобы найти идеальное антитело для наших клиентов. У нас есть зрелая система конструирования библиотек антител Fab, которая может конструировать библиотеки антител Fab на человеке и различных животных, включая иммунные библиотеки, естественные библиотеки, полусинтетические библиотеки, синтетические библиотеки и т. д., которые могут удовлетворить различные потребности клиентов. Библиотеки антител Fab, которые мы можем конструировать, включают библиотеки фагов, рибосомальные библиотеки, библиотеки отображения мРНК, библиотеки дрожжевых клеток, библиотеки клеток млекопитающих и бактериальные библиотеки и т. д., среди которых библиотеки отображения фагов являются наиболее востребованными клиентами. У нас есть различные платформы фагов, включая M13, T4, T7 и λ фаг, которые могут удовлетворить различные потребности клиентов и предоставлять персонализированные услуги по конструированию библиотек фагов Fab. Наши исследователи имеют многолетний опыт в создании фаговых библиотек и создали библиотеки Fab размером до 1010 с богатым разнообразием, что значительно увеличивает возможность создания высокоаффинных Fab-антител. Fab-антитела, которые мы готовим, могут быть направлены против различных антигенов, таких как вирусы, бактерии, токсины, рецепторы и опухолевые антигены, пептиды и т. д. Технология гибридом имеет недостатки, такие как громоздкая работа, длительное время цикла, легкое загрязнение и высокая иммуногенность. Технология отображения фаговых антител проста в эксплуатации, имеет короткий экспериментальный цикл, низкие требования к окружающей среде и может экспрессировать Fab-антитела в больших количествах с помощью прокариотической системы экспрессии. Мы предоставляем различные фаговые векторы, включая PMECS, pComb3X и pCANTAB 5E, для удовлетворения различных потребностей клиентов. Мы также предоставляем различные бактерии-хозяева, такие как TG1 E. coli, XL1-Blue и ER2738, для удовлетворения потребностей наших клиентов. Alpha Lifetech предоставит комплексные услуги по созданию библиотеки Fab для удовлетворения различных потребностей исследователей в стране и за рубежом. Наша цель — понять и удовлетворить потребности различных клиентов в препаратах рекомбинантных антител, а также помочь в решении любых проблем в исследовательской работе.

Рабочий процесс службы создания библиотеки Fab-антител

Шаги	Спецификация	Хронология
Шаг 1: Фабричная подготовка	Метод 1: Все антитело расщеплялось папаином, пепсином и фузаразой с образованием фрагментов F(ab')2, которые затем восстанавливались для получения фрагментов Fab.	14 дней
	Метод 2: Фрагменты антител F(ab')2 были синтезированы путем рекомбинации, а затем эти фрагменты были химически восстановлены для получения Fab.
Шаг 2: Ферментативное расщепление и лигирование	Ген Fab был расщеплен и лигирован с помощью ДНК-лигазы T4.	1 день
Шаг 3: Трансформация плазмиды	Первичные библиотеки Fab-антител получают путем электрохимического или химического преобразования.	3 дня
Шаг 4: Определение разнообразия библиотеки Fab и проверка методом ПЦР	Библиотеки были титрованы и размер библиотеки был рассчитан; положительные клоны были протестированы с помощью ПЦР.	2 дня